| 标准编号 | SN/T 2728-2010 (SN/T2728-2010) | | 中文名称 | 枯草芽孢杆菌检测鉴定方法 | | 英文名称 | Detection and identification of Bacillus subtilis | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 国际标准分类 | 07.100 | | 字数估计 | 9,959 | | 发布日期 | 2010-11-01 | | 实施日期 | 2011-05-01 | | 引用标准 | GB/T 6682; GB 19489; WS/T 230 | | 标准依据 | National Quality Inspection (2010) 582 | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | 本标准规定了枯草芽孢杆菌的形态学鉴定、生化鉴定以及PCR、荧光PCR检测鉴定方法。本标准适用于枯草芽孢杆菌检测鉴定。 | SN/T 2728-2010
Detection and identification of Bacillus subtilis
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
枯草芽孢杆菌检测鉴定方法
2010-11-01发布
2011-05-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中华人民共和国山东出入境检验检
疫局。
本标准主要起草人:王芳、王金玲、张莹、马骏、王涛、孟祥勇、林颍、耿庆华、李成墉、雷质文。
枯草芽孢杆菌检测鉴定方法
1 范围
本标准规定了枯草芽孢杆菌的形态学鉴定、生化鉴定以及PCR、荧光PCR检测鉴定方法。
本标准适用于枯草芽孢杆菌检测鉴定。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本使用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB 19489 实验室 生物安全通用要求
WS/T 230 临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术的应用
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
枯草芽孢杆菌 Bacillussubtilis
革兰氏阳性杆菌,芽孢杆菌科,芽孢杆菌属,内生孢子,接触酶阳性,发酵葡萄糖产酸,水解淀粉,不
水解马尿酸盐,可还原硝酸盐,水解酪素,在55℃可生长的一群芽孢菌。
4 人员防护
为了保护实验室人员的安全,应由具备资格的工作人员检测,所有培养物应小心处置。在对微生物
菌剂的取样和检测过程中,按照GB 19489中的生物二级防护的规定执行。
5 主要试剂和培养基
除另有规定外,试剂为分析纯或生化试剂,试验用水应符合GB/T 6682。所有试剂均用无DNA酶
污染的容器分装。
5.1 营养琼脂:蛋白胨10g,牛肉浸膏3.0g,氯化钠5.0g,琼脂15.0g,1L蒸馏水,加热煮沸到完全溶
解,调节pH7.3±0.1,121℃灭菌15min。
5.2 营养肉汤:蛋白胨10g,牛肉浸膏3.0g,氯化钠5.0g,1L蒸馏水,加热煮沸到完全溶解,调节pH
7.3±0.1,121℃灭菌15min。
5.3 TE缓冲液:10mmol/LTris,1mmol/LEDTA,pH8.0。
5.4 10×PCR缓冲液:100mmol/LTris-HCl(pH8.4),500mmol/L氯化钾(KC......
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