| 标准编号 | SN/T 3631-2013 (SN/T3631-2013) | | 中文名称 | 出口贝类中肠道病毒EV71的检验方法 实时荧光RT-PCR方法 | | 英文名称 | Detection of Enterovirus 71 in shellfish for epxort. Real-time fluorescence RT-PCR | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | X20 | | 国际标准分类 | 67.120.30 | | 字数估计 | 10,195 | | 引用标准 | GB/T 6682; GB 19489 | | 标准依据 | 国质检认(2013)464号;行业标准备案公告2014年第1号(总第169号) | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | 本标准规定了贝类中EV71病毒的荧光RT-PCR检测方法。本标适用于贝类中EV71病毒的检测。 | SN/T 3631-2013
Detection of Enterovirus 71 in shellfish for epxort.Real-time fluorescence RT-PCR
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
出口贝类中肠道病毒EV71的检验方法
实时荧光RT-PCR方法
2013-08-30发布
2014-03-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国湖北出入境检验检疫局、深圳太太基因工程有限公司。
本标准主要起草人:曾宪东、陈建军、徐家文、肖性龙、郭明星、赵晖、冯汉利、王振华。
出口贝类中肠道病毒EV71的检验方法
实时荧光RT-PCR方法
1 范围
本标准规定了贝类中EV71病毒的荧光RT-PCR检测方法。
本标准适用于贝类中EV71病毒的检测。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件,凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB 19489 实验室 生物安全通用要求
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
肠道病毒EV71 Enterovirus71
肠道病毒EV71,即肠道病毒71型(简称EV71),属于微小RNA病毒科、肠道病毒属,EV71及Cox
A16型是手足口病最为常见的致病病毒。肠道病毒属包括脊髓灰质炎病毒(Poliovirus),柯萨奇病毒
(Coxasckievirus)A组16、4、5、7、9、10型和B组2、5、13型,埃可病毒(ECHOviruses)以及肠道病毒
68、69、70、71、72等血清型。
3.2
荧光RT-PCR reai-timefluorescence RT-PCR
实时荧光定量RT-PCR方法是在常规RT-PCR的基础上,加入了一条特异性的荧光探针。该探针
为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发出的信
号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬火
荧光基团分离,从而荧光监测系统可接受到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,
实现了荧光信号的积累与PCR产物形成完全同步。
3.3
Ct值 cyclethreshold
每个反应管内的荧光信号量达到设定的阈值时所经历的循环数。
4 方法概要
在甘氨酸缓冲液中通过高速匀浆的物理方式对食品样品进行均质,经过温育促进病毒颗粒的释放,
再利用PEG8000沉降病毒粒子。然后采用......
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