| 标准编号 | SN/T 3960-2014 (SN/T3960-2014) | | 中文名称 | 蓝莓矮化植原体检疫鉴定方法 | | 英文名称 | Detection and identification of Blueberry stunt phytoplasma | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 国际标准分类 | 07.080 | | 字数估计 | 12,188 | | 发布日期 | 4/9/2014 | | 实施日期 | 11/1/2014 | | 标准依据 | 国质检认(2014)210号;行业标准备案公告2015年第1号(总第181号) | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | 本标准规定了蓝莓矮化植原体的检疫和鉴定方法。本标准适用于进出境蓝莓树苗木及蓝莓产品中蓝莓矮化植原体的检疫和鉴定。 | SN/T 3960-2014
(Blueberry dwarf phytoplasma quarantine and identification methods)
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
蓝莓矮化植原体检疫鉴定方法
2014-04-09发布
2014-11-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。
本标准主要起草人:李鑫、林长军、王有福、姜一、曹冬梅、胡强、刘卉秋、王秀芬、徐凤敏、牟海青。
蓝莓矮化植原体检疫鉴定方法
1 范围
本标准规定了蓝莓矮化植原体的检疫和鉴定方法。
本标准适用于进出境蓝莓树苗木及蓝莓产品中蓝莓矮化植原体的检疫和鉴定。
2 蓝莓矮化植原体基本信息
分类地位:软壁菌门(Tenericutes),柔膜菌纲(Molicutes),非固醇菌原体目(Acholeplasmatales),
蓝莓矮化植原体的其他信息参见附录A。
3 方法原理
蓝莓矮化植原体生物学特性和基因特性作为本标准鉴定方法的主要依据。
DAPI染色后的形态学观察为初步筛查方法;以植原体核糖体16SrDNA通用引物进行PCR扩增、
测序及限制性内切酶指纹图谱为主要的判定依据。
4 仪器用具和主要试剂
4.1 仪器
PCR仪、超净工作台、高压灭菌锅、制冰机、台式冷冻离心机、台式小型离心机、超低温冰箱、常规冰
箱、涡旋振荡器、微量进样器、电泳仪、凝胶成像系统、荧光显微镜、透射电子显微镜、超薄切片机等。
4.2 用具
移液器、研钵、离心管、PCR管、量筒、烧杯、酒精灯、镊子等。
4.3 主要试剂
4.3.1 CTAB缓冲液
CTAB 20g/L
Tris-HCl 100mmol/L(pH8.0)
EDTA 20mmol/L(pH8.0)
NaCl 1.4mol/L
PVP-40 10g/L
4.3.2 PBS缓冲液(0.2mol/LpH7.4)
无水NaH2PO4 24g
......
|