| 标准编号 | SN/T 4077-2014 (SN/T4077-2014) | | 中文名称 | 齿兰环斑病毒检疫鉴定方法 | | 英文名称 | (Odontoglossum ringspot virus quarantine and identification methods) | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 发布日期 | 12/1/2014 | | 实施日期 | 5/1/2015 | | 标准依据 | 国质检认[2014]614号;行业标准备案公告2016年第2号(总第194号) | | 发布机构 | 海关总署 | SN/T 4077-2014
(Odontoglossum ringspot virus quarantine and identification methods)
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
齿兰环斑病毒检疫鉴定方法
2014-11-19发布
2015-05-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国厦门出入境检验检疫局、中华人民共和国江苏出入境检验检疫
局、厦门市植保植检站。
本标准主要起草人:陈青、黄峰、李彬、廖富荣、谢毅璇、陈红运、林石明。
齿兰环斑病毒检疫鉴定方法
1 范围
本标准规定了齿兰环斑病毒检疫鉴定的免疫学和分子生物学检测方法。
本标准适用于可能带有齿兰环斑病毒的兰花苗及植物产品的检疫鉴定。
2 齿兰环斑病毒基本信息
缩写:ORSV
分类地位:烟草花叶病毒属(Tobamovirus)的成员。
ORSV主要通过机械性传播,桃蚜能传毒。
详细资料参见附录A。
3 方法原理
根据齿兰环斑病毒与抗体之间的特异性反应,对兰花叶片进行ELISA检测;根据该病毒基因组特
性进行PCR特异性检测,通过电泳条带大小进行结果判定。
4 仪器、设施及试剂
4.1 仪器与设施
酶联检测仪、电子天平(感量0.0001g)、PCR仪、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统、恒温水浴、低温冰
箱、普通冰箱、离心机等;微量移液器(2.5μL,10μL,20μL,100μL,200μL,1000μL);酶联板、研钵
等;防虫温室。
4.2 试剂
酶联检测试剂(见附录B),RT-PCR检测试剂(见附录C),IC-RT-PCR检测试剂(见附录D)。
5 检疫与鉴定
5.1 制样
观察样品,有症状(如:叶片畸形、花叶、斑驳等)的苗木编号单独检测。没有症状的分组并编号检
测,分组,10株为一组,采集的叶片分成两份,分别用于酶联检测和分子生物学检测,不足10株可每株
取样进行检测。......
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