| 标准编号 | SN/T 4097-2015 (SN/T4097-2015) | | 中文名称 | 贝类派琴虫实时荧光PCR检测方法 | | 英文名称 | Real-time fluorescent PCR quarantine protocol for Perkinsus sp.in shellfish | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 国际标准分类 | 07.080 | | 字数估计 | 8,862 | | 发布日期 | 2015-02-09 | | 实施日期 | 2015-09-01 | | 引用标准 | GB/T 6682 | | 标准依据 | 国质检认[2015]59号;行业标准备案公告2016年第1号(总第193号) | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | 本标准规定了贝类中派琴虫的实时荧光PCR检测方法。本标准适用于贝类组织中派琴虫的检测。 | SN/T 4097-2015
(Shellfish piano insect send real-time PCR detection method)
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
贝类派琴虫实时荧光PCR检测方法
2015-02-09发布
2015-09-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:张雪、肇慧君、李叶、李振荣、贾赟。
贝类派琴虫实时荧光PCR检测方法
1 范围
本标准规定了贝类中派琴虫的实时荧光PCR检测方法。
本标准适用于贝类组织中派琴虫的检测。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
实时荧光PCR real-timefluorescentPCR
在普通聚合酶链反应的基础上加入一条特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一
个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR
扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告基团和淬灭基团分离,从而荧光监测系统可
接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现荧光信号的累积与PCR产物形
成完全同步,达到实时定量的目的。
3.2
Ct值 cyclethreshold
每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数,也可称为Cp值。
4 试剂和材料
4.1 1mol/LTris·Cl(pH8.0)、0.5mol/LEDTA溶液(pH8.0)、SDS(10%)。溶液配制见附录A。
4.2 蛋白酶K溶液(20mg/mL)。
4.3 Tris-饱和酚。
4.4 三氯甲烷。
4.5 异戊醇。
4.6 无水乙醇。
4.7 生理盐水。
4.8 10×PCRbuffer、25mmol/LMg......
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