| 标准编号 | SN/T 4799-2017 (SN/T4799-2017) | | 中文名称 | 动物结核病病原菌检测方法 变性高效液相色谱法 | | 英文名称 | Detection of tuberculosis pathogenic organisms of animals. DHPLC method | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 字数估计 | 10,128 | | 发布日期 | 2017-07-21 | | 实施日期 | 2018-03-01 | | 引用标准 | GB 19489 | | 标准依据 | 国质检认(2017)337号 | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | 本标准规定了结核分枝杆菌复合群、结核分枝杆菌、牛分枝杆菌多重PCR联合变性高效液相色谱(mPCR-DHPLC)检测方法的技术要求和操作规范。本标准适用于快速检测细菌培养物、动物组织、血样、痰液等临床样品中结核分枝杆菌复合群、结核分枝杆菌、牛分枝杆菌。 | SN/T 4799-2017
Detection of tuberculosis pathogenic organisms of animals.DHPLC method
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
动物结核病病原菌检测方法
变性高效液相色谱法
DHPLCmethod
2017-07-21发布
2018-03-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
中华人民共和国出入境检验检疫
行 业 标 准
动物结核病病原菌检测方法
变性高效液相色谱法
中 国 标 准 出 版 社 出 版
网址:www.spc.org.cn
2018年6月第一版
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国广东出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:刘志玲、陈茹、王莹、吴晓薇、朱道中、段燕喻、林志雄。
动物结核病病原菌检测方法
变性高效液相色谱法
1 范围
本标准规定了结核分枝杆菌复合群、结核分枝杆菌、牛分枝杆菌多重PCR联合变性高效液相色谱
(mPCR-DHPLC)检测方法的技术要求和操作规范。
本标准适用于快速检测细菌培养物、动物组织、血样、痰液等临床样品中结核分枝杆菌复合群、结核
分枝杆菌、牛分枝杆菌。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB 19489 实验室 生物安全通用要求
3 缩略语
下列缩略语适用于本文件。
TEAA:三乙基铵醋酸盐。
4 概述
人与动物结核病涉及多种病原菌或病原菌复合群。结核分枝杆菌复合群(Mycobacteriumtuber-
枝杆菌和田鼠分枝杆菌。其中,主要感染人与家畜并致病的是结核分枝杆菌和牛分枝杆菌。与 MTC
相对应的是种类繁多的各种非结核分枝杆菌(NTM)。NTM感染患者的临床症状及病理变化与 MTC
引起的结核病极为相似,但多数NTM对抗结核药物有天然耐药性。此外,NTM 感染可造成结核菌素
皮内变态反应或血清学检测假阳性。采用多重PCR联合变性高效液相色谱检测的方法可同步区分结
核分枝杆菌复合群与非结核分枝杆菌复核群,并鉴别结核分枝杆菌与牛分枝杆菌
mPCR反应的原理、操作过程与普通PCR相同。在同一PCR反应体系里加入多对特异性引物,对
多个DNA模板或同一模版不同区域扩增出多个目的DNA片段。DHPLC分析技术是利用液相色谱
技术,在高压闭合液相流路中,将DNA样品自动注入并在缓冲液携带下流过DNA分离柱,DNA片段
分子中带负电荷的磷酸根基团与TEAA分子中带正电荷的氨基发生静电作用相互吸引,同时TEAA
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