| 标准编号 | WS/T 361-2011 (WS/T361-2011) | | 中文名称 | 乳酸脱氢酶催化活性浓度测定参考方法 | | 英文名称 | Reference procedure for the measurement of catalytic activity concentration of lactate dehydrogenase | | 行业 | 卫生行业标准 (推荐) | | 中标分类 | C50 | | 国际标准分类 | 11.020 | | 字数估计 | 25,249 | | 发布日期 | 2011-12-14 | | 实施日期 | 2012-06-01 | | 采用标准 | 《IFCC 37℃酶催化活性浓度测定原级参考方法 第3部分:乳酸脱氢酶催化浓度测定参考方法》, MOD | | 标准依据 | 卫通(2011)22号;行业标准备案公告2012年第2号(总第146号) | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 | | 范围 | 本标准规定了在临床医学应用中, 测定乳酸脱氢酶(LDH)催化活性浓度的参考方法。本标准主要适用于参考实验室, 作为乳酸脱氢酶催化活性浓度测定的溯源, 也可作为与酶催化活性浓度检验有关的仪器和试剂生产企业的溯源, 可供有关认可单位及质量管理部门应用。 | WS/T 361-2011: 乳酸脱氢酶催化活性浓度测定参考方法
WS/T 361-2011 英文名称: Reference procedure for the measurement of catalytic activity concentration of lactate dehydrogenase
ICS 11 020
C 50
中 华 人 民 共 和 国 卫 生 行 业 标 准
Ws/T 361-⒛ll
乳酸脱氢酶催化活性浓度测定参考方法
1 范围
本标准规定了在临床医学应用 中 ,测 定乳酸脱氢酶 (△DH)催化活性浓度 的参考方法 。
本标准主要适用于参考实验室 ,作 为乳酸脱氢酶催化活性浓度测定的溯源 ,也 可作为与酶催化活性
浓度检验有关的仪器和试剂生产企业 的溯源 ,可 供有 关认可单位 及质量管理部 门应用 。
2 术语和缩略语
2.1 术语和定义
下列术语和定 义适用于本文件 。
2.1.1原始样本
最初从一个系统 中取 出的一个或几J个部分的集合物 ,旨 在提供该 系统 的信息或作 为对该 系统做 出决定的基础 。
注:在某些情况下、所提供的信息可以适用于一个较大的系统或一组系统 ,此时取样系统是这些系统的组成部分。
2.1.2实验室样本
准各送到实验室或实验室接收的川于测定的原始样本或原始样本的分样本 。
2,1.3分析样本
白实验室样本制备的、可从 巾取 出分析部分的样本 。 `
注:在取出分析部分之前,分析样本可经过各种处理。
2.1.4彡卜+f音阝
从分析样本 中取 出的用于实际测定和观察的物质部分 。
注:如果不需预处理,分析部分亩接从原始样本或实验室样本中取出。某些怙况下 ,需将分析部分溶解成分析溶液冉上机测定。
2.1,5分析溶液
将分析部分溶解在气体 、液体或 固体 巾而制备的溶液 ,溶解过程 中可以有反应发生或无反应发生 。
21.6(某 一物质 系统的 )基 质
一个物质系统 中除被分析物之外的所有成分。
2,1.7参考方法
在校准或表征标准物质时为提供测定结果所采用 的测定方法 ,适 用 丁评定 由同类量 的其他测定 方
法获得的被测定量值的测定止确度 。
2,1,8测定 系统 的灵敏 度 变
测定系统 的示值变化 除 以相 应 的被测 定值变化 所得 的商 。
注 1:测定系统的灵敏度可能与被测定的蚩值有关。
注 2:所 考虑的被测定值的变化必须大于测定系统的分辨力。
2.1.9彡卜lf卡手乒旮l±
测定方法 只测定可测定 的量 的能力 。
2.1.10分析干扰
由一个影 响量 引起 的系统测定误差 ,该影 响壁 向身在测定 系统 中不产生信号 ,但它会 引起示值 的增高或降低 。
2.1,11最彡口向量莨
被测定 以外 的可影 响测定结果 的壁 。
2.1.12被测量
拟测定 的量 。注 1:对被测定的说明要求了解量的种类 ,以 及含有该址的现象、物体或物质状态的描述 ,
包括有关成分及所涉及n勺化学实体。
注 2:在 VIM第二版和 IEC 60θ 5ll s0θ:⒛ 01中 .被 测定定义为受到测定的量。
注 3:测定包括测定系统和实施测定的条件 ,它 刂能会改变研究屮的现象、物体或物质 ,使 被测定的坩町能不同于
定义的被测定。在这种情况 卜。
2.1.13检 出限
由给定测定方 法获得 的测得值 ,其声称 的物质成分不存 在 的误 判 概 率 为
`,声称物 质成 分存 在 的误判概率 为 α。
注 1:国 际±lT论和应用化学联合会(1UPAC)推 荐α和卩的默认值为 0,05。
注 2:有 时使用缩写词 L()D。
注 3:不要用术语“灵敏度”表示“检出限 "。
2.1.14校准品
用 丁校准 的测定标 准 。
2.2 缩略语
下列缩 略语适 用 于本 文件 。
3 参考方法描述
3.1 测定原理和方法
3.2 检查列表
3.2.1 试剂列表
将所用 试剂按表 l列出。
3,2.2 分光光度计和辅助仪器列表
参考实验室应在表 2登记主要测定仪器 (分光光度计 )和 主要辅助仪器 (点 式温度计 、天平、pH计、
恒温水浴箱、稀释配液仪 、移液器等 )。
3.3 试剂
3.3.1 试剂原料信息
按表 3详细填写试剂原料详细信息 。
试剂系统名 通用名 `
LDH测定所用每个试剂原料详细信息表格见附录 B。 如怀疑一种化学药品含有不纯的物质影响
了分析物的催化活忤 ,应进行进一步的研究 ,例 如 ,比 较不同厂家和不同批号的产品。建议使川在对比
试验中已经鉴定或认 町的试剂。以下一种试剂需耍注意安伞 :
盐酸 :健康危害 :接触其蒸气或烟雾 ,可 引起急性中毒 ,出 现眼结膜炎 ,鼻 及 口腔黏膜有烧灼感 ,鼻
衄、齿龈出血 ,气 管炎等。误服可引起消化道灼伤、溃疡形成 ,有 可能引起 胃穿孔、腹膜炎等。眼和皮肤
接触可致灼伤。慢性影响 :长 期接触 ,引 起慢性鼻炎、慢性支气管炎、牙齿酸蚀症及皮肤损害。操作人员
必须经过专门培训 ,严格遵守操作规程 ,佩戴 自吸过滤式防毒面具 (全 面罩 ),穿橡胶耐酸碱服i戴橡胶耐
酸碱手套。远离易燃、可燃物。
3.3.2 试剂溶液
3.3,2,1 一般要求
制备溶液时各成分给出的质量是指 100%含量。如果化学物质的含量低于 100%E例如 y(%)],则
应用lAl子:F(。mt"=100/y,计算出与给出质量相当的某化学物质的质量。
溶液的制备应使用质量与双蒸水类似 的高纯度水 (电 导率 <2us·cm l,pH6~7,硅酸盐(0.1mg·Lˉ l)。
每次称重的扩展 (虑 =2)不确定度 (包括物质纯度的不确定度 )(正 态分布 ).应 ≤1.5%。
3,3,2.2 反应溶液
称量 7.30gN-甲基-D-葡 糖胺、0.552g乳酸一锂盐 ,将上述物质按以下步骤处理 :
--溶在约 80mI'水中 ;
--用 2m°l· Ll的盐酸调节 pH(37℃)歪刂9.4;
3.3,2,3 起始试剂溶液
称量 0.240g NAD游离酸及 0,558g NAD二水合锂盐 ,将⊥述物质按 以下步骤处理 :
--溶于约 6mL水中 ;
--转移至 10mL容量瓶 ;
--将容量瓶和水平衡至 ⒛ ℃ ;
--加水 (2O℃ )至 刻度线 。
最终配制的溶液中 N`0游离酸浓度为 36.23mmd·LI、 NΛD二水合锂盐浓度为 m。78mmd.I'l。
该溶液 2℃ ~8℃稳定性为 l月。
3.4 仪器
分光光度计及辅助仪器主要性能的要求 ,见 表 4。
3,5 采样和样本
3,5,1 通则
参考实验室主要接受外检样本......
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