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| 标准编号 | GB/T 21105-2007 (GB/T21105-2007) | | 中文名称 | 动物源性饲料中狗源性成分定性检测方法 PCR方法 | | 英文名称 | Identification of canis derived materials in animal-originated feedstuffs -- PCR method | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B46 | | 国际标准分类 | 65.120 | | 字数估计 | 7,790 | | 发布日期 | 2007-10-24 | | 实施日期 | 2008-04-01 | | 标准依据 | 中国国家标准批准发布公告2007年第11号(总第111号) | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | 本标准规定了动物源性饲料中狗源性成分检测的PCR方法, 该检测方法的检出限为0.1%。本标准适用于动物源性饲料中狗源性成分的定性检测。 | GB/T 21105-2007
Identification of canis derived materials in animal-originated feedstuffs.PCR method
ICS ６５．１２０
B４６
中华人民共和国国家标准
GB/T ２１１０５-２００７
动物源性饲料中狗源性成分定性
检测方法 PCR方法
２００７-１０-２４发布
２００８-０４-０１实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准的附录Ａ为资料性附录。
本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出。
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。
本标准起草单位：中华人民共和国山东出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、中华人民共
和国辽宁出入境检验检疫局、中华人民共和国深圳出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：高宏伟、梁成珠、王岩、于立新、徐宝梁、陈颖、吴亚君、宗卉、温燕辉、曹际娟。
本标准首次发布。
GB/T ２１１０５-２００７
动物源性饲料中狗源性成分定性
检测方法 PCR方法
１ 范围
本标准规定了动物源性饲料中狗（Ｃａｎｉｓ）源性成分检测的ＰＣＲ方法，该检测方法的检出限为
０．１％。
本标准适用于动物源性饲料中狗源性成分的定性检测。
２ 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有
的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB ６６８２ 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T １４６９９．１ 饲料 采样（GB/T １４６９９．１-２００５，ISO ６４９７：２００２，ＩＤＴ）
ＳＮ/T １１９３ 基因检验实验室技术要求
３ 术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
３．１
用于扩增位于两段已知序列之间ＤＮＡ（ｄｅｏｘｙｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅａａｃｉｄ，脱氧核糖核酸）的方法。模板
ＤＮＡ经过高温变性成单链，在ＤＮＡ聚合酶和适宜的温度下，两条互不互补的寡核苷酸片段即引物分
别与模板ＤＮＡ两条链上的一段互补序列发生退火，接着在ＤＮＡ聚合酶的催化下以４种ｄＮＴＰ（ｄｅ-
ｏｘｙｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，脱氧核苷酸三磷酸）为底物，使退火引物得以延伸，如此反复变性、退火
和ＤＮＡ合成这一循环，使位于两段已知序列之间的ＤＮＡ片段呈几何倍数扩增，经２５个～３０个扩增
循环，扩增倍数达到约１０６。
４ 原理
利用裂解液破碎细胞，三氯甲烷抽提蛋白质，异丙醇沉淀得到ＤＮＡ；以提取的ＤＮＡ为模板进行
ＰＣＲ扩增，琼脂糖凝胶电泳检测ＰＣＲ扩增产物；ＰＣＲ阳性产物应用限制性内切酶酶切反应进行确证。
５ 试剂和材料
除另有规定外，试剂为分析纯或生化试剂，实验用水符合GB ６６８２的要求。
５．１ 狗源性成分检测用引物（对）序列为：
ｃａｎｉｓＦ：５’-ＴＣＣＡＧＧＴＡＡＡＣＣＣＴＴＣＴＴ-３’
ｃａｎｉｓＲ：５’-ＴＡＣＧＡＧＣＡＡＧＧＧＴＴＧＡＴＧＧ-３’
５．４ ......
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