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| 标准编号 | GB/T 27535-2011 (GB/T27535-2011) | | 中文名称 | 猪流感HI抗体检测方法 | | 英文名称 | The detection method of hemagglutination inhibition antibody against swine influenza | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 7,711 | | 发布日期 | 2011-11-21 | | 实施日期 | 2012-03-01 | | 标准依据 | 国家标准批准发布公告2011年第18号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | 本标准规定了猪流感病毒血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验的技术要求。本标准适用于猪流感血清HI抗体的检测。 | GB/T 27535-2011
The detection method of hemagglutination inhibition antibody against swine influenza
ICS 11.220
B41
中华人民共和国国家标准
猪流感HI抗体检测方法
2011-11-21发布
2012-03-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。
本标准起草单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。
本标准主要起草人:乔传玲、杨焕良、陈艳、辛晓光、陈化兰。
猪流感HI抗体检测方法
1 范围
本标准规定了猪流感病毒血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验的技术要求。
本标准适用于猪流感血清HI抗体的检测。
2 仪器
水浴箱、4℃冰箱等。
3 试验材料
单道及多道微量移液器、吸头。
4 试剂
4.1 0.01mol/LpH7.2PBS(参见附录A中A.1)。
4.2 胰酶溶液(参见附录A中A.2)。
4.3 0.01mol/LKIO4 溶液(参见附录A中A.3)。
4.4 1%丙三醇盐水(参见附录A中A.4)。
4.5 阿氏(Alsevers)液(参见附录A中A.5)。
4.6 0.5%鸡红细胞悬液(参见附录A中A.6)。
4.7 HI试验抗原和阴、阳性血清(参见附录A中A.7)。
5 血凝(HA)试验
5.1 用多道微量移液器在微量反应板的1~12孔均加入0.05mLPBS,换吸头。
5.2 吸取0.05mL抗原,加入第1孔,反复抽打3~5次混匀。
5.3 从第1孔吸取0.05mL抗原加入第2孔,混匀后吸取0.05mL加入第3孔,如此进行对倍稀释至
第11孔,从第11孔吸取0.025mL弃之,换吸头。第12孔作为红细胞对照。
5.4 每孔均加入0.05mL0.5%(体积分数)鸡红细胞悬液(将鸡红细胞悬液充分摇匀后加入)。
5.5 轻轻混匀,室温(20℃~25℃)下静置20min后观察结果(如果环境温度太高,可置4℃环境下)。
对照孔红细胞显著呈钮扣状时判定结果。
5.6 结果判定:将反应板倾斜45°,观察红细胞若没有呈泪滴状流淌,则判为 HA阳性;完全血凝(不流
淌)的病毒最高稀释......
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