搜索结果: GB/T 27637-2011, GB/T27637-2011, GBT 27637-2011, GBT27637-2011
| 标准编号 | GB/T 27637-2011 (GB/T27637-2011) | | 中文名称 | 副结核分枝杆菌实时荧光PCR检测方法 | | 英文名称 | Real-time PCR method for the detection of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 11,138 | | 发布日期 | 2011-12-30 | | 实施日期 | 2012-04-01 | | 引用标准 | GB/T 6682-2008; GB 19489-2008 | | 标准依据 | 国家标准批准发布公告2011年第22号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | 本标准规定了副结核分枝杆菌(Mycobacterium avium subsp.paratuberculosis)实时荧光PCR检测方法的技术要求和操作规范。本标准适用于快速检测培养物、血样、奶样、粪便和组织等临床样品中副结核分枝杆菌。 | GB/T 27637-2011
ICS 11.220
B41
中华人民共和国国家标准
副结核分枝杆菌实时荧光PCR检测方法
2011-12-30发布
2012-04-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。
本标准起草单位:中华人民共和国广东出入境检验检疫局、吉林农业大学、北京盈九思科技发展有
限公司。
本标准主要起草人:刘中勇、陈茹、杨国海、高云航、曾碧健、朱道中、吴晓薇、高小博。
副结核分枝杆菌实时荧光PCR检测方法
1 范围
测方法的技术要求和操作规范。
本标准适用于快速检测培养物、血样、奶样、粪便和组织等临床样品中副结核分枝杆菌。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法
GB 19489-2008 实验室 生物安全通用要求
3 缩略语
下列缩略语适用于本文件。
Ct值:荧光信号量达到设定的阈值时所经历的循环数。
DMSO:dimethylsulfoxide,二甲基亚砜。
Taq酶:TaqDNA聚合酶。
4 原理
本标准方法采用了TaqMan探针实时荧光PCR技术原理。反应体系中包括一对用于扩增DNA
的引物,和一条能与PCR产物特异杂交的荧光标记探针。探针的5’端标记了被称为报告基团的荧光
素,3’端标记了淬灭基团。在进行PCR延伸反应时,Taq酶的5’外切酶活性将5’端荧光基团从探针上
切割下来,使其与淬灭基团分离,从而仪器能检测到5’端荧光基团所发出的荧光信号,一分子PCR扩
增产物的生成伴随一分子荧光信号的产生。随着扩增循环次数的增加,仪器检测到的荧光信号的累积
反应了扩增......
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