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| 标准编号 | GB/T 37077-2018 (GB/T37077-2018) | | 中文名称 | 禽蛋中胆固醇含量的测定 酶法 | | 英文名称 | Determination of cholesterol in eggs -- Enzymatic method | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | X04 | | 国际标准分类 | 67.050 | | 字数估计 | 6,639 | | 发布日期 | 2018-12-28 | | 实施日期 | 2019-07-01 | | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 37077-2018
Determination of cholesterol in eggs--Enzymatic method
ICS 67.050
X04
中华人民共和国国家标准
禽蛋中胆固醇含量的测定 酶法
2018-12-28发布
2019-07-01实施
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
中国国家标准化管理委员会 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由中华人民共和国农业农村部提出。
本标准由全国畜牧业标准化技术委员会(SAC/TC274)归口。
本标准起草单位:农业农村部家禽品质监督检验测试中心(扬州)、中国农业科学院家禽研究所。
本标准主要起草人:高玉时、葛庆联、马丽娜、唐修君、陈大伟、刘茵茵、张静、张小燕、蒲俊华、
唐梦君、樊艳凤、顾荣。
禽蛋中胆固醇含量的测定 酶法
1 范围
本标准规定了酶法测定禽蛋中胆固醇含量的方法。
本标准适用于鸡蛋、鸭蛋、鹅蛋、鸽蛋、鹌鹑蛋等鲜禽蛋。
本标准方法检出限为1mg/100g,定量限为3mg/100g。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 原理
胆固醇酯在胆固醇酯酶作用下水解为游离胆固醇和脂肪酸,胆固醇在胆固醇氧化酶作用下,生成
△4-胆甾烯酮和 H2O2,H2O2 在4-氨基安替比林及苯酚参与下,经过氧化物酶作用,生成红色醌亚胺。
在波长505nm处测定样品吸光度,醌亚胺吸光度与样品中胆固醇含量成正比。根据其吸光度与标准
曲线比较或由标准曲线回归方程计算样品中胆固醇含量。
4 试剂或材料
除非另有说明,本标准所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的三级水。
4.1 甲醇(CH3OH)。
4.2 乙醚(C4H10O)。
4.3 无水乙醇(C2H6O)。
4.4 氢氧化钾(KOH)。
4.5 氯化钠(NaCl)。
4.6 胆固醇酯酶(EC3.1.1.13):来源于微生物(如假单胞菌属、念珠菌属),葡萄糖氧化酶与尿酸酶含量
小于0.01%,不含过氧化氢酶,比活性约100kU/g酶蛋白(25℃,胆固醇油酸酯为底物)。
4.7 胆固醇氧化酶(EC1.1.1.6):来源于微生物(如诺卡氏菌、球孢链霉菌),葡萄糖氧化酶与尿酸酶含
量小于0.01%,不含过氧化氢酶,比活性约45kU/g酶蛋白(37℃,胆固醇为底物)。
4.8 过氧化物酶(EC1.11.1.9):来源于辣根,纯度值(Reinheitszah1比值,A403nm/A275nm)约为3.0,比活
性1000kU/g酶蛋白[25℃,2,2'-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)为底物]。
4.9 胆固醇(C27H46O,CAS号:57-88-5):纯度≥99%。
4.10 氢氧化钾溶液(600g/L):称取600g氢氧化钾,加水溶解并定容至1000mL,摇匀。
4.11 氯化钠溶液(50g/L):称取50g氯化钠,加......
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