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| 标准编号 | LY/T 2305-2014 (LY/T2305-2014) | | 中文名称 | 油茶品种微卫星标记鉴别技术规程 | | 英文名称 | Technical regulations of Camellia varieties identification by SSR markers | | 行业 | 林业行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B61 | | 国际标准分类 | 65.020.20 | | 字数估计 | 28,240 | | 实施日期 | 12/1/2014 | | 标准依据 | 国家林业局公告2014年第12号;行业标准备案公告2015年第3号(总第183号) | | 发布机构 | 国家林业局 | | 范围 | 本标准规定了以油茶(Camellia spp.)幼嫩组织(叶片、芽等)为材料, 利用微卫星标记法对油茶品种进行分子鉴定的术语、原理、主要仪器和设备、试剂与溶液、操作程序和鉴定。本标准适用于附录A中所列油茶品种的鉴别。 | LY/T 2305-2014
Technical regulations of Camellia varieties identification by SSR markers
ICS 65.020.20
B61
中华人民共和国林业行业标准
油茶品种微卫星标记鉴别技术规程
2014-08-21发布
2014-12-01实施
国 家 林 业 局 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由国家林业局提出。
本标准由全国林木种子标准化技术委员会(SAC/TC115)归口。
本标准负责起草单位:南京林业大学。
本标准参加起草单位:湖北省林业科学研究院、福建省林木种苗总站。
本标准主要起草人:尹佟明、戴晓港、陈赢男、李淑娴、史洁、张新叶、陈伟。
油茶品种微卫星标记鉴别技术规程
1 范围
本标准规定了以油茶(Camelliaspp.)幼嫩组织(叶片、芽等)为材料,利用微卫星标记法对油茶品
种进行分子鉴定的术语、原理、主要仪器和设备、试剂与溶液、操作程序和鉴定。
本标准适用于附录A中所列油茶品种的鉴别。
2 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
2.1
微卫星 microsatelite
也称基因组中由2个~6个核苷酸组成的DNA串联重复序列。
2.2
基因型频率 genotypefrequency
群体中某一位点特定基因型个体数占全部个体数的比率。
3 原理
微卫星广泛分布于植物基因组的不同位置,微卫星位点具有高度的遗传多态性,微卫星标记具有高
度的物种特异性和良好的扩增重现性,是用于植物品种遗传鉴别的首选标记。本标准采用高通量测序
获得了大量微卫星标记,通过实验检测,筛选了10对高度多态性的微卫星标记,用于油茶品种的遗传鉴
别。在检验过程中,我们可采用真实品种的DNA模板做为标准品,从待检苗木中抽样做为待检样品。
利用微卫星引物进行扩增时,若待检样品与标准品在任一引物扩增位点上基因型不同,则可判定待检样
品与标准品不是同一品种。当不同引物扩增位点上基因型都相同时,可根据标准品种在不同位点上的
基因型频率乘积,计算出待检样品与标准品是同一品种的概率。
4 主要仪器和设备
4.1 PCR扩增仪。
4.2 离心机12000r/min。
4.3 微量可调移液器(2μL、10μL、100μL、1000μL)。
4.4 EPS-300数显式稳压稳流电泳仪(电压10V~300V,电流10mA~400mA)。
4.5 全自动数码凝胶图像分析系统(透射紫外波长......
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