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| 标准编号 | SN/T 1350-2004 (SN/T1350-2004) | | 中文名称 | 牛锥虫病补体结合试验方法 | | 英文名称 | Protocol of compliment fixation test for trypanosomiasis | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 8,876 | | 发布日期 | 2004-06-01 | | 实施日期 | 2004-12-01 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 | SN/T 1350-2004
Protocol of compliment fixation test for trypanosomiasis
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN／T１３５０-２００４
牛 锥 虫 病 补 体 结 合 试 验 方 法
２００４-０６-０１发布
２００４-１２-０１实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准的附录Ａ为规范性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国山东出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：孟广校、徐彪、朱咏梅、生成选。
本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。
SN／T１３５０-２００４
牛 锥 虫 病 补 体 结 合 试 验 方 法
１ 范围
本标准规定了牛锥虫病补体结合试验方法。
本标准适用于牛锥虫病的抗体检测。
２ 试验材料
２．１ 器材
９６孔“Ｕ”型微量板、１０μＬ～１００μＬ可调移液器、培养箱、水浴锅、１５ｍＬ尖底离心管、离心机、
１２ｍｍ×７５ｍｍ试管。
２．２ 试剂
２．２．１ 溶血素：从生物制药厂购买，效价不低于１∶１５００。
２．２．２ 补体：选择成年雄性豚鼠３只～４只，绝食６ｈ～８ｈ后，从心脏采血，分离新鲜血清保存于普通
冰箱中备用。也可以购买冻干补体。
２．２．３ 锥虫病抗原、阳性血清和阴性血清：从生物制品厂购买。
２．２．４ 绵羊红细胞悬液的制备：见第Ａ．１章。
２．２．５ 巴比妥缓冲液（简称ＶＢＳ）：见第Ａ．２章。
２．２．６ 溶血标准比色孔的制备：见第Ａ．３章。
２．３ 血清的处理
被检血清、标准阳性血清和标准阴性血清，使用前均需５６℃灭活３０ｍｉｎ。
３ 预备试验
３．１ 溶血素效价的测定
３．１．１ 配制１：２０的补体。
３．１．２ 溶血素稀释：将溶血素用ＶＢＳ做１∶５００，１∶１０００，１∶１５００，１∶２０００，１∶２５００，１∶３０００，
１∶３５００，１∶４０００，１∶４５００，１∶５０００稀释。
３．１．３ 溶血素效价测定：取９６孔“Ｕ”型微量板，按表１中各成分的量加入各孔中。
表１ 溶血素效价测定表 单位为微升
成分
管 号
１ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ １０ 溶血素补体红细胞
溶血素
稀释度
５００× １０００× １５００× ２０００× ２５００× ３０００× ３５００× ４０００× ４５００× ５０００× １∶１００ - -
溶血素 ２５ ２５ ２５ ２５ ２５ ２５ ２５ ２５ ２５ ２５ ２５ - -
ＶＢＳ ５０ ５０ ５０ ５０ ５０ ５０ ５０ ５０ ５０ ５０ ７５ ７５ １００
补体
１∶２０
２５ ２５ ２５ ２......
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