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| 标准编号 | SN/T 3400-2012 (SN/T3400-2012) | | 中文名称 | 松材线虫实时荧光PCR检测方法 | | 英文名称 | Detection of Bursaphelenchus xylophilus with real-time fluorescent polymerase chain reaction | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 字数估计 | 9,958 | | 引用标准 | GB/T 6682; SN/T 1132-2002; SN/T 1724-2006 | | 标准依据 | 国质检认(2012)777号;行业标准备案公告2013年第4号(总第160号) | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | 本标准规定了松材线虫的实时荧光PCR检测方法。本标准适用于针叶树原木、木制品和木质包装材料中松材线虫的检测。 | SN/T 3400-2012
Detection of Bursaphelenchus xylophilus with real-time fluorescent polymerase chain reaction
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
松材线虫实时荧光PCR检测方法
2012-12-12发布
2013-07-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国宁波出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:郭立新、段维军、顾建锋、闻伟刚、陈先锋、郑炜、王江岭。
引 言
本文件的发布机构提请注意,声明符合本文件时,可能涉及到5.13与“一种检测松材线虫的方法及
其专用引物和探针”相关的专利的使用。
本文件的发布机构对于该专利的真实性、有效性和范围无任何立场。
该专利持有人已向本文件的发布机构保证,他愿意同任何申请人在合理且无歧视的条款和条件下,
就专利授权许可进行谈判。该专利持有人的声明已在本文件的发布机构备案。相关信息可以通过以下
联系方式获得;
专利持有人姓名:刘杏忠 曹爱新 朱水芳
地址:100080 北京市海淀区中关村北一条13号中国科学院微生物研究所
请注意除上述专利外,本文件的某些内容仍可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专
利的责任。
松材线虫实时荧光PCR检测方法
1 范围
本标准规定了松材线虫的实时荧光PCR检测方法。
本标准适用于针叶树原木、木制品和木质包装材料中松材线虫的检测。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
SN/T 1132-2002 松材线虫检疫鉴定方法
SN/T 1724-2006 进境针叶树原木、木制品和木质包装材料中松材线虫的检疫操作规程
3 原理
3.1 松材线虫学名及分类地位
中文名称:松材线虫
英文名:Pinewoodnematode
缩写:PWN
分类地位:线虫门(Nematoda)、侧尾腺纲(Secernentea)、滑刃目(Aphelenchida)、滑刃科(Aphelen-
3.2 实时荧光PCR检测依据
样品经过提取DNA后,针对核糖体DNA内转录间隔区(ITS区)设计引物和探针,通过实时荧光
PCR技术,特异性扩增目的片断,根据实时荧光PCR扩增曲线,判断该样品中是否有松材线虫。
4 抽样和取样
抽样和取样见SN/T 1724。
5 试剂和溶液
除特别规定外,所有实验用试剂均为分析纯,实验用水应符合GB/T 6682中相关规定。
5.1 溶解缓冲液(200mmol/LNaCl;200......
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