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| 标准编号 | SN/T 3438-2012 (SN/T3438-2012) | | 中文名称 | 南方菜豆花叶病毒检疫鉴定方法 | | 英文名称 | Detection and identification of southern bean mosaic virus | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 字数估计 | 11,123 | | 标准依据 | 国质检认(2012)777号;行业标准备案公告2013年第4号(总第160号) | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | 本标准规定了南方菜豆花叶病毒的血清学和分子生物学检测方法。本标准适用于可能携带南方菜豆花叶病毒的豆科种子的检疫鉴定。 | SN/T 3438-2012
Detection and identification of southern bean mosaic virus
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
南方菜豆花叶病毒检疫鉴定方法
2012-12-12发布
2013-07-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国厦门出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、中华人民共
和国云南出入境检验检疫局、中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:陈青、陈岩、李旻、刘忠梅、陈红运、廖富荣、林石明。
南方菜豆花叶病毒检疫鉴定方法
1 范围
本标准规定了南方菜豆花叶病毒的血清学和分子生物学检测方法。
本标准适用于可能携带南方菜豆花叶病毒的豆科种子的检疫鉴定。
2 原理
典型成员。抗原特性和基因组特征(参见附录A)是检疫鉴定的主要依据。
3 仪器、设施及试剂
3.1 仪器与设施
酶联检测仪、电子天平(感量0.0001g)、定性PCR仪、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统、恒温水浴、
低温冰箱、普通冰箱、离心机等;微量移液器(2.5μL,10μL,20μL,100μL,200μL,1000μL);酶联板、
研钵等;防虫温室。
3.2 试剂
酶联检测试剂(见附录B),RT-PCR检测试剂(见附录C)。
4 检疫与鉴定
4.1 制样
挑取畸形、不成熟的种子播于灭菌土中,待长出3~4片真叶后将表现症状的植株编号,未表现症状
的植株分组(10株为1组)并编号。采集的叶片分成两份,分别用于酶联检测和分子生物学检测。
4.2 检测
4.2.1 双抗体夹心酶联免疫吸附检测
把制备的样品上清液加入已包被SBMV抗体的96孔酶联板中,进行DAS-ELISA检测。每个样
品平行加到两个孔中。健康的植物组织作阴性对照,感染SBMV的植物组织作阳性对照,样品提取缓
冲液作空白对照,其中阴性对照种类和材料(如:种子或叶片)应尽量与检测样品一致。不同的检测试剂
或试剂盒根据试剂或试剂盒的说明操作。
具体操作见附录B。
4......
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