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| 标准编号 | SN/T 3483-2013 (SN/T3483-2013) | | 中文名称 | 松江鲈鱼的物种鉴定方法 PCR方法 | | 英文名称 | Identification protocol for Trachidermus fasciatus. PCR | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B52 | | 国际标准分类 | 07.080 | | 字数估计 | 12,154 | | 引用标准 | GB/T 6682 | | 标准依据 | 质检总局关于发布2013年第一批179项出入境检验检疫行业标准的通知 ;行业标准备案公告2013年第9号(总第165号) | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | 本标准规定了松江鲈鱼物种鉴定PCR方法的技术规范。本标准适用于松江鲈鱼的种质鉴定。 |
SN/T 3483-2013
Identification protocol for Trachidermus fasciatus.PCR
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
松江鲈鱼的物种鉴定方法
PCR方法
2013-03-01发布
2013-09-16实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国山东出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:徐彪、赵玉然、岳志芹、张太翔、郑小龙、赵巍。
松江鲈鱼的物种鉴定方法
PCR方法
1 范围
本标准规定了松江鲈鱼物种鉴定PCR方法的技术规范。
本标准适用于松江鲈鱼的种质鉴定。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
Ct值 cycle threshold
荧光信号由本底进入指数增长期时拐点所对应的实时荧光定量PCR循环次数。
3.2
扩增曲线 amplificationcurve
在实时荧光定量PCR反应中,模板被扩增,实时荧光定量PCR产物经过线性增长期、指数增长期
以及平台期三个阶段,实时荧光定量PCR产物的量随时间的变化而得到的曲线。
4 技术原理
本实验是利用松江鲈鱼细胞色素b(Cytochromeb,Cytb)基因的保守性与特异性设计引物与探
针,建立实时荧光定量PCR方法。该方法是在常规PCR的基础上,加入一条特异性的荧光探针。探针
为一段寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的
荧光信号被淬灭基团吸收;实时荧光定量PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使
报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可以接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,
就有一个荧光分......
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