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| 标准编号 | SN/T 4643-2016 (SN/T4643-2016) | | 中文名称 | 线虫标本采集分离保存规范 | | 英文名称 | Standards for sampling, detecting and preserving specimen of nematodes | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 字数估计 | 10,141 | | 发布日期 | 2016-08-23 | | 实施日期 | 2017-03-01 | | 标准依据 | 国质检认(2016)438号;行业标准备案公告2017年第8号(总第212号) | | 发布机构 | 海关总署 | SN/T 4643-2016
Standards for sampling, detecting and preserving specimen of nematodes
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
线虫标本采集分离保存规范
2016-08-23发布
2017-03-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位.中华人民共和国宁波出入境检验检疫局。
本标准主要起草人.顾建锋、陈先锋、张慧丽、何洁。
线虫标本采集分离保存规范
1 范围
本标准规定了出入境植物检疫中线虫标本的采集、制作和保存方法。
本标准适用于出入境检验检疫部门对线虫标本的采集、制作和保存工作。
2 方法原理
根据植物病原线虫不同的寄生方式,采集表现瘿瘤、叶斑、坏死、变色、畸形等症状的样品,或采集寄
主植物的根及根围土壤或介质,用改良漏斗分离法等分离线虫,然后浸泡保存或制作成永久玻片,达到
对线虫标本保存的目的。
3 仪器、试剂和用具
3.1 仪器
体视显微镜(10×以上,具透射光源)、恒温培养箱、移液器(20μL~200μL)、离心机(2000r/min
以上)、冷藏箱、天平、Fenwick漂浮器等。
3.2 试剂
福尔马林(4%甲醛)、甘油、乙醇、蔗糖、封片剂(中性树胶、阿拉伯树胶、指甲油)、石蜡、溶液Ⅰ(96%
乙醇/甘油/蒸馏水体积比20∶1∶79)、溶液Ⅱ(甘油/96%乙醇体积比1∶19)、乙二胺四乙酸二钠、二甲
基亚砜、氯化钠、氢氧化钠。
DESS溶液配制方法参见附录A。
3.3 用具
钟面皿或培养皿、细胞培养皿、盖玻片、载玻片、剪刀、线虫挑针、酒精灯、双层纸巾、线虫滤纸、纱布、
500μL微量离心管、密闭塑料盒、漏斗、漏斗架、乳胶管、止水夹、加热板、筛网(10目、60目、300目、400目、
500目)、取样铲、塑料袋、水桶、记号笔等。
4 样品采集
4.1 病变组织或土样的采集
植物病原线虫按寄生方式不同一般可分为内寄生和外寄生线虫。大多数寄生线虫危害寄主植物根
和地下茎,如根结属线虫Meloidogyne寄生于根内,孢囊属线虫Heterodera部分外露于根部。但也有
部分线虫(如粒属线虫Anguina、滑刃属线虫Aphelenchoides、伞滑刃属线虫Bursaphelenchus等)危害
植物地上的芽、叶片、茎杆、种子、穗部等。部分植......
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