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| 标准编号 | SN/T 5130-2019 (SN/T5130-2019) | | 中文名称 | 疣粒稻鉴定方法 | | 英文名称 | Identification of Oryza granulata Nees et Arn. Ex Hook.f | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 国际标准分类 | | | 字数估计 | 14,165 | | 发布日期 | 2019-09-03 | | 实施日期 | 2020-03-01 | | 标准依据 | 海关总署公告2019年第142号 | | 发布机构 | 海关总署 | SN/T 5130-2019: 疣粒稻鉴定方法
SN/T 5130-2019 英文名称: Identification of Oryza granulata Nees et Arn.Ex Hook.f
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
疣粒稻鉴定方法
中华人民共和国海关总署 发 布
前言
本标准按照GB/T １．１-２００９给出的规则起草。
本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。
本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院，中华人民共和国合肥海关，中华人民共和国重庆海关。
本标准主要起草人：宋云、徐晗、宗凯、许瑾、孙涛、陈乃中。
疣粒稻鉴定方法
１ 范围
本标准规定了疣粒稻种质资源的检验鉴定方法。
本标准适用于疣粒稻和其遗传材料的检测鉴定。
２ 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本
文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T ６６８２ 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T １４０７２ 林木种质资源保存原则与方法
ＳＮ/T １１９３ 基因检验实验室技术要求
４ 疣粒稻基本信息
学名：ＯｒｙｚａｇｒａｎｕｌａｔａＮｅｅｓｅｔＡｒｎ．ｅｘＨｏｏｋ．ｆ．
分类地位：植物界（Ｐｌａｎｔａｅ），被子植物门（Ａｎｇｉｏｓｐｅｒｍａｅ），单子叶植物纲（Ｍｏｎｏｃｏｔｙｌｅｄｏｎｅａｅ），禾
稻属内有２０余种（参见附录Ａ）。
５ 方法原理
疣粒稻可能以植株、谷粒、核酸等形式出入境。对于植株、谷粒样品，可通过显微镜观察疑似物种的
植株、小穗、外稃，根据形态特征（见附录Ａ、附录Ｂ）进行初步鉴定；对于核酸等无形态特征的样品，根据
疣粒稻的ＴＰＩ基因序列特异位点设计引物开展ＰＣＲ检测，进行准确鉴定。
６ 仪器设备和试剂
６．１ 仪器和设备
液氮罐、纯水机、电子天平、水浴锅、高压灭菌器、高温干燥箱、离心机、电泳仪、ＰＣＲ仪、电泳槽、显
微镜、扫描电镜、凝胶成像系统、高通量研磨机、涡旋震荡器、可调移液器（１０００μＬ，２００μＬ，１００μＬ，
２０μＬ，１０μＬ，２．５μＬ）、可调移液器枪头、离心管。
６．２ 试剂
ＰＣＲ反应常用试剂、电泳试剂和核酸分子量标准等，均为分析纯或生化纯（另有规定的除外），水按
照GB/T ６６８２规定的执行。
７ 鉴定方法
７．１ 形态鉴定
７．１．１ 稻属植株形态特征
一年生或多年生草本。秆直立，丛生。
７．１．１．１ 叶
叶鞘无毛；叶舌长膜质或具叶耳；叶片线形扁平，宽大。
７．１．１．２ 花
顶生圆锥花序疏松开展，常下垂。
７．１．１．３ 小穗
小穗含一两性小花，其下附有２枚退化外稃，两侧甚压扁；颖退化，仅在小穗柄顶端呈二半月形之痕
迹；孕性外秤硬纸质，具小疣点或细毛，有５脉，顶端有长芒或尖头；内稃与外稃同质，有３脉，侧脉接近
边缘而为外稃之２边脉所紧握；鳞被２；雄蕊６枚；柱头２，帚刷状，自小穗两侧伸出。
７．１．２ 疣粒稻形态特征（参见附录A和附录B）
多年生草本。有时具短根状茎。秆高３０-７０厘米，压扁，具５-９节。
７．１．２．１ 叶
叶鞘无毛，长５-８厘米，短于其节间；叶舌长１-２毫米，无毛，具明显叶耳；叶片线状披针形，长
５-２０厘米，宽６-２０毫米，上面沿脉有锯齿状粗糙，下面平滑，干时内卷，顶端尖，基部圆形。
７．１．２．２ 花
圆锥花序简单，直立，长３-１２厘米，分枝２-５枚，上升，疏生小穗，棱粗糙。
７．１．２．３ 小穗
小穗长圆形，长约６毫米，约为宽的３倍，浅绿色或灰色；颖退化仅留痕迹；内、外稃表面具钩状乳突
且周围具疣粒。
７．２ 分子生物学鉴定
７．２．１ DNA提取
按ＣＴＡＢ法提取ＤＮＡ（详见附录Ｃ）。
７．２．２ PCR检测
对样品提取的ＤＮＡ进行ＰＣＲ检测（详见附录Ｄ）。防污染措施应符合ＳＮ/T １１９３的规定。
８ 结果判定
符合７．１．１和７．１．２内与样品物态对应的相关描述可初步判定为疣粒稻；样品经符合附录Ｄ描述的
ＰＣＲ检测为阳性，可判定为疣粒稻。
９ 样品保存与复核
９．１ 样品保存
物种资源的样品保存方法见GB/T １４０７２的规定。
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