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| 标准编号 | WS/T 631-2018 (WS/T631-2018) | | 中文名称 | 日本血吸虫毛蚴检测 尼龙绢袋集卵孵化法 | | 英文名称 | Detection of Schistosoma japonicum miracidium - Egg hatching method after nylon mesh bag concentration | | 行业 | 卫生行业标准 (推荐) | | 中标分类 | C61 | | 字数估计 | 11,115 | | 发布日期 | 2018-09-26 | | 实施日期 | 2019-04-01 | | 标准依据 | 国卫通(2018)21号 | | 发布机构 | 卫生健康委员会 | WS/T 631-2018: 日本血吸虫毛蚴检测 尼龙绢袋集卵孵化法
WS/T 631-2018 英文名称: Detection of Schistosoma japonicum miracidium - Egg hatching method after nylon mesh bag concentration
ICS 11.020
C 61
WS
中 华 人 民 共 和 国 卫 生 行 业 标 准
日本血吸虫毛蚴检测 尼龙绢袋集卵孵化法
1 范围
本标准规定了检测人体粪便中日本血吸虫毛蚴的尼龙绢袋集卵孵化法。
本标准适用于各级疾病预防控制机构和医疗机构对日本血吸虫毛蚴的检测。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
WS 233 病原微生物实验室生物安全通用准则
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
日本血吸虫虫卵 Schistosoma japonicum egg
呈椭圆形，淡黄色，大小为（74～106）μm×（55～80）μm，卵壳薄而均匀，无卵盖，侧面有一小
棘，成熟虫卵内可见毛蚴。
3.2
日本血吸虫毛蚴 Schistosoma japonicum miracidium
日本血吸虫幼虫发育中的最早阶段，呈梨形或长椭圆形，左右对称，银灰色，大小为（78～120）
μm×（30～40）μm，前端有锥形突起，体表具有纤毛。
3.3
毛蚴孵化 miracidium hatching
毛蚴在日本血吸虫虫卵内完成胚胎发育后破壳而出的现象。
6 检测步骤
6.1样本准备
采集受检者新鲜粪便，重量不少于30 g，存放于广口带盖且防渗漏洁净的密闭容器中，将受检者基
本信息（姓名、编号、送检日期）标记于容器外部。采集后的样本应及时送检，如未能及时检测，应在
4℃条件下冷藏保存，时间不超过24 h。
6.2 样本检测
6.2.1 验收登记
验看粪便重量、质量及标签，核对无误后统一编号，登记。
6.2.2 淋水冲洗
6.2.2.1 将筛子叠放于尼龙绢袋上，尼龙绢袋下口用夹子夹住。
6.2.2.2 取受检者粪便30 g置于筛子中，用水冲淋，压舌板或竹签调浆，使粪液滤入尼龙绢袋中。
6.2.2.3 移去筛子，继续用水冲洗袋内粪渣，用压舌板或竹签轻轻振荡尼龙绢袋使过滤加速，直至滤出
液变清为止。
6.2.2.4 将尼龙绢袋下口移入烧瓶口内，取下夹子，将袋内的滤渣用孵化用水淋洗入烧瓶，继续加孵化
用水满至离瓶口1 cm处。
6.2.3 毛蚴孵化
将盛有滤渣的烧瓶置于光照培养箱（20℃～30℃）或相同室温下孵化，在3 600 Lx～3 800 Lx光照
强度下，孵化4 h～12 h（范围为0.5 h～24 h），需观察2～3次，参见附录C。
每批实验均需设置血吸虫虫卵阳性粪便作为对照。
6.2.4 毛蚴观察
取出烧瓶，瓶口向着光源，背衬以黑色背景，平视观察水面下0～4 cm范围内浮游生物，每瓶每次
观察时间不少于3 min。必要时可用放大镜观察。发现毛蚴后，用毛细吸管吸出，均匀分滴于载玻片上，
观察其游动状态，然后加1滴碘酒固定，在显微镜下（40 ×～100 ×）观察形态。
毛蚴应与水中原生动物相鉴别，参见附录D。
为提高检出率，如孵化阴性，可进行沉渣镜检虫卵。
6.3 结果判定
查见日本血吸虫毛蚴即判定为阳性。
AA
附 录 A
（资料性附录）
孵化用水、用具及废弃物处理
A.1孵化用水处理
A.1.1自来水处理 将自来水放在敞开的容器内静置 24 h让其自然脱氯，或在自来水中加入硫代硫
酸钠（4 mg/L～8 mg/L），静置 30 min后使用。
A.1.2井水处理 若水质较浑浊，可静置至澄清或加入明矾澄清水质（30 mg/L～40 mg/L）。若含有
水中原生动物，可加入 65%有效氯的漂精片（3.4 mg/L）或 30%有效氯的漂白粉（7 mg/L）进行杀虫，
然后静置 24 h自然脱氯或硫代硫酸钠脱氯。
A.1.3余氯测定
取处理后的水 100 mL于纳氏比色管中，加邻甲苯联胺 5 mL混合 2 min～3 min后，与余氯标准管
比色测定。达到杀死水中原生动物的水余氯浓度应为 0.7 mg/L～1.0 mg/L，
符合孵化用水余氯浓度应低于 0.3 mg/L。
A.1.4 pH调节
孵化用水需经过 pH值的测试，若水质偏酸，可采用 10%氢氧化钠溶液调节；若水质偏碱，可用
10%盐酸溶液调节。调节至最适宜的 pH值范围内。
A.2 孵化用具处理
用具每次使用后要洗刷干净，用70℃～80℃热水浸泡2 min～3 min灭卵。
A.3 废弃物处理
存放粪便样本的容器、调浆后的淋洗水、粪渣等废弃物依据 WS 233进行处理。
附 录 B
（资料性附录）
尼龙绢袋和筛子制作
尼龙绢袋：呈圆锥弧形，上口直径为 80 mm，下口直径为 15 mm，深 200 mm。绢孔为 57 μm/25.4 mm
（260目）。示意图见图 B.1。
筛子：呈圆柱形，外径为 90 mm ，内径为 75 mm。筛孔为 250 μm/25.4 mm（60目）
附 录 C
（资料性附录）
毛蚴孵化观察时间
毛蚴孵化一般需观察 2～3次，观察时间随温度高低而不同。温度高时毛蚴孵化快，温度低时毛蚴
孵化慢。25 ℃是毛蚴孵化的适宜温度。
温度超过 30 ℃时，第 1次观察可在 0.5 h～1 h后进行，阴性者可在 4 h后观察第 2次，......
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