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| 标准编号 | WS/T 640-2018 (WS/T640-2018) | | 中文名称 | 临床微生物学检验样本的采集和转运 | | 英文名称 | Specimen collection and transport in clinical microbiology | | 行业 | 卫生行业标准 (推荐) | | 中标分类 | C59 | | 字数估计 | 25,266 | | 发布日期 | 2018-12-11 | | 实施日期 | 2019-06-01 | | 标准依据 | 国卫通(2018)23号 | | 发布机构 | 卫生健康委员会 | WS/T 640-2018: 临床微生物学检验样本的采集和转运
WS/T 640-2018 英文名称: Specimen collection and transport in clinical microbiology
ICS 11.020
C 50
WS
中 华 人 民 共 和 国 卫 生 行 业 标 准
临床微生物学检验标本的采集和转运
1 范围
本标准规定了临床微生物学（病毒学、细菌学和真菌学）检验标本采集和转运的技术要求。
本标准适用于开展临床微生物学检验的各级医疗机构及其临床微生物学实验室。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
WS/T 348 尿液标本的收集及处理指南
WS/T 499 下呼吸道感染细菌培养操作指南
WS/T 442 临床实验室生物安全指南
WS/T 503 临床微生物实验室血培养操作规范
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
微生物学检验标本 Clinical Microbiological Specimen
本文件微生物学标本指临床病毒学、细菌学和真菌学检验（包括涂片镜检、培
养、抗原、抗体和分子技术等）所用的标本。
3.2
紧急检查标本 STAT
因疾病可能危及患者生命而需要立即处理的标本。
3.3
采样拭子 Sampling swab
用于采集含病原微生物标本的拭子，由两部分组成： ① 涂抹棒：柄部常为塑料或铝杆，柄部的一
端是具有吸附作用的采样头，采样头材质包括脱脂棉、合成聚酯纤维、聚酰胺纤维、人造丝和泡沫聚氨
酯等；② 手柄：位于柄部的另一端，也可作为转运装置（容器或管）的帽。
3.4
转运 Transport
标本由采样地点运送到检验地点的过程，分为内部转运（如使用人工或气动传输等内部送样方式）
和外部转运（如使用汽车、飞机或火车等外部送样方式）。
3.5
转运容器 Transport container
用于盛放转运培养基和送检标本的容器。该容器应无菌、无消毒剂及防腐剂、无污染、密封性好及
透明以便于从外部观察。当采样装置具备密闭功能，且能有效保护样本不被污染时，可作为转运容器运
送标本。
3.6
转运培养基 Transport medium
液体或半固体的培养基，用于保护和维持标本在转运期间（从标本采集后到实验室处理这段时间）
的完整性。转运培养基一般不促进微生物增殖，但保证它们存活。对于苛养菌，可以采用分离培养用的
培养基作为转运培养基（如羊血琼脂或巧克力琼脂等）。
3.7
一套血培养 A set of blood culture
从一个穿刺部位抽取血液，分别注入需氧和厌氧血培养瓶分别进行需氧和厌氧培养。
4 标本采集、转运及处理的总原则
4.1 标本采集手册
实验室应制定所在机构的临床微生物学检验标本采集手册，该手册提供的信息包括（但不限于）下
列内容：
a) 检验项目；
b) 检验方法；
c) 适应证；
d) 标本采集部位；
e) 标本类型；
f) 标本采集、转运所需要的装置/容器和转运培养基；
g) 标本采集方法；
h) 标本的体积或质量；
i) 转运时限、贮存条件；
j) 标本的标识方法；
k) 重复检验频率；
l) 生物安全防护信息；
m) 需要获得的临床资料。
4.2 检验的申请
4.2.1 样本采集依检验项目的申请，实验室应建立临床微生物学检验的申请程序。检验申请单提供的
信息包括（但不限于）下列内容：
a) 患者姓名；
b) 患者性别；
c) 患者年龄或出生日期；
d) 患者唯一性标识，如病历号；
e) 就诊病区和病房；
f) 检验申请者姓名；
g) 检验申请者科室；
h) 标本类型；
i) 标本采集部位；
j) 检验项目；
k) 标本采集日期和时间；
l) 采集标本所用的特殊方法（适用时）；
m) 临床诊断和主要临床表现；
n) 特殊培养要求或可疑病原体（适用时）；
o) 患者是否应用抗微生物药物及具体种类；
p) 患者和检验申请者的联系电话(适用时)。
4.2.2 细菌学和真菌学检验项目的选择：
a) 无菌体液标本、组织标本、痰标本、支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid， BALF）、
尿液标本和脓液标本等宜同时选择标本直接涂片染色镜检和培养；
b) 怀疑隐球菌感染的脑脊液标本：宜同时选择墨汁染色、隐球菌荚膜多糖抗原检验和隐球菌培养；
c) 怀疑分枝杆菌感染的标本：宜同时选择抗酸染色、分枝杆菌培养和分枝杆菌核酸检验；
d) 怀疑厌氧菌感染的标本：宜同时选择革兰染色和厌氧培养，不能排除需氧菌时，宜同时做需氧培养
e) 怀疑诺卡菌感染的标本：宜同时选择革兰染色、弱抗酸染色和培养；
f) 怀疑侵袭性真菌感染的标本：宜同时选择 10% KOH压片、真菌培养和真菌抗原检验。另可进行
乳酸酚棉兰染色或荧光染色等。
4.2.3 实验室发布的标本采集手册宜对特殊菌的培养要求给予明确说明，以保证医护人员对采集的标
本进行明确标识，检验申请单中特殊培养要求包括（但不限于）下列内容：
a) 延长培养时间，例如：血液标本怀疑巴尔通体、布鲁菌、弗朗西斯菌等引起的感染，呼吸道标
本怀疑诺卡菌引起的感染等；
b) 选择专用培养基。例如：血液中怀疑分枝杆菌感染宜选择专用的分枝杆菌培养瓶；
c) 特殊的气体和温度环境要求。例如：脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌等需要 CO2环境，弯曲菌和幽
门螺杆菌培养需要微需氧环境；怀疑二相真菌感染，宜同时选择 25 ℃及 37 ℃两个温度进行
培养。
d) 特定感染宜进行厌氧培养。例如：肝脓肿等封闭脓肿、腹膜炎、腹腔感染和糖尿病足感染等。
厌氧菌感染的特征性表现包括：①局部有气体产生为重要指征之一；②发生在黏膜附近的感染；
③深部外伤，如枪伤、人或动物咬伤后的继发感染；④分泌物有恶臭或暗红血色或在紫外光下
发出红色荧光，或脓汁中有硫磺颗粒等。
4.3 标本的选择
4.3.1 实验室标本采集手册应详细描述感染性疾病病原体检验的标本类型和临床适应证，病原体应包
括（但不限于）病毒、细菌和真菌。
4.3.2 选择标本类型须考虑感染症状、患者免疫状态、患者疾病严重程度及接受有创检查的风险、流
行病学、可疑病原体的特性和播散能力和受累的器官及感染部位等多方面因素。
4.3.3 适于进行普通细菌、厌氧菌检验的标本类型见表 1～表 2。
4.4 标本的采集时机、部位、方法
4.4.1 在抗微生物药物治疗之前或者在起始治疗后立即采集标本，治疗中为评估治疗效果或治疗后为
评估结局可以进行相采样。
4.4.2 应当尽快在疾病初发时采集首份标本。
4.4.3 须避免感染部位周围以及感染部位附近皮肤或黏膜定植菌群的污染。
4.4.4 对于有多种细菌定植的部位，宜选择合适的方法检验特定的病原菌，并防止非致病定植菌群的污染。
4.4.5 检验呼吸道病毒宜采用植绒拭子采集鼻咽标本。
4.4.6 普通拭子标本不宜用于厌氧菌培养。
4.4.7 除了血液标本外，其他所有标本进行厌氧培养前均应进行革兰染色（粪便艰难梭菌培养除外）。
4.4.8 无菌体液（例如胸水、滑膜液、心包液和脑脊液）宜放入无菌管或含抗凝剂（注意某些抗凝剂
对一些细菌有抑制作用，如果使用，则需告知临床其中的影响）的无菌管送检，也可注入一定量（最好
10 mL）的样品到血培养瓶中进行增菌培养；怀疑细菌或真菌感染时，除了血液标本之外，所有无菌体
液标本均宜进行革兰染色镜检。
4.4.9 外科手术标本，宜送液体或组织做涂片和培养，拭子标本仅用于特殊情况。
4.4.10 采集静脉血时，应首先采集血培养标本，再采集用于其他检验的标本。
4.4.11 血标本采集时机见 WS/T 503，痰标本采集时机见 WS/T 499，尿标本采集时机见 WS/T 348。
4.4.12 不宜送检或接收导尿管的管尖进行培养。
4.4.13 真菌培养宜采集深部标本或组织标本。
4.4.14 做病毒血清学检验时，宜根据不同病毒选择不同的采集时间和抗体类型；发病早期通常检验病
毒特异的 IgM抗体；而对恢复期患者，在疾病急性发作和发作后间隔 2周～4周采集双份血清，检验 IgG抗体。
4.4.15 特殊情况下（如怀疑厌氧菌感染时）可以考虑床旁采样。
4.4.16 标本采集须符合生物安全规定。
4.5 标本采集量
4.5.1 采集足够量的标本用于常规细菌学检验，至少送检 0.5 mL或者 0.5 g（除外特殊标本）。当送
检标本体积不足时，与临床沟通，并根据医嘱选择优先检验项目。 脑脊液标本通常 2 mL～5 mL；胸水
和腹水 10 mL；BALF 10 mL～20 mL（≥5 mL）； 脓液 2 mL～5 mL；羊水、胆汁、关节穿刺液、心包液、
胸水、滑膜液大于 1 mL；腹透液 50 mL；眼前房液大于 0.1 mL，玻璃体洗液大于 1 mL。
4.5.2 采集足够量的标本用于病毒学检验，特别是液体标本（如脑脊液和血液），并严格遵照临床标
准的流程操作。脑脊液标本通常 2 mL～5 mL，血液 3 mL～5 mL；
4.5.3 宜采集大体积量的标本用于常规真菌学检验。
4.6 标本标识
标签宜由放入冰箱后仍能粘牢的材料制成。标签贴在容器上,而非容器盖上。标签上提供的信息至
少包括（但不限于）下列内容：
a) 患者姓名、患者唯一性标识；
b) 标本采集日期和时间；
c) 检验项目；
d) 标本类型；
e) 急查标本相应的标识（适用时）。
4.7 标本转运
4.7.1 标本采集手册应当明确说明某些检验项目的特殊转运方法，以保证医护人员、标本运送人员在
标本采集之前能获得有关标本采集和转运的准确信息。
4.7.2 标本的转运应由经过培训的专人负责。使用气动传输方式运送标本时,提前确认剧烈震荡、温度
等因素不对检验结果产生影响。
4.7.3 标本采集后，应减少运送环节，在规定时间内运达实验室，并尽可能缩短转运时间。
4.7.4 用于细菌学检验的标本：
a) 用于普通细菌学检验的标本：宜在 2 h内送到实验室。如果转运时间超过 2 h，宜使用转运培
养基或在冷藏条件下转运；一般而言，用于细菌培养的标本室温下保存不能超过 24 h；血培
养标本不可以冷藏转运；仅用于分子诊断的标本，宜冷藏或冷冻保存（-70 ℃以下最佳，避免反复冻融）。
b) 标本量较少的体液标本（＜1 mL）或组织标本（＜1 cm3）：宜在 30 min内送到实验室。大体
积的标本或采集于保存培养基中的标本，可以保存 24 h。
c) 可能分离出对周围环境敏感细菌的标本：采集后立即送检。对周围环境敏感的细菌如百日咳鲍
特菌、志贺菌属、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和厌氧菌。
d) 可能分离出对低温敏感细菌的标本：采集后不宜冷藏，如脑脊液、生殖道、眼部、中耳及呼吸
道标本。对低温敏感的细菌如淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌和肺炎链球菌。
e) 用于厌氧菌培养的标本：在常温下转运，标本量较少的标本宜在采集后 30 min内送到实验室，
转运过程中标本尽可能与空气隔绝。
4.7.5 用于病毒学检验的标本：
a) 用于病毒核酸检验的标本：采集后在 2 h～4 h 内送到实验室。血液标本室温运送，其他标本
在 2 ℃～8 ℃下转运；若运送时间超过 24 h，标本宜在-70 ℃或更低的温度下保存和转运。
b) 用于病毒培养和抗原检验的标本：在运送过程中宜保存在适当的病毒转运液（VTM）
或其他相应的缓冲液中。
c) 液体标本：如羊水、血液、脑脊液、尿液和 BALF等可直接送检，一般不需使用 VTM运送。
4.7.6 用于真菌培养的标本（除头发、皮肤和指甲宜干燥送检外），宜湿润条件下送检。
4.7.7 当标本需要进行多种微生物学检验时，如病毒、细菌、分枝杆菌和真菌等，分别采样或将标本
分装至合适的转运液或容器中。
4.7.8 细菌学检验常用的转运培养基：
a) Regan-Lowe 转运培养基：适用于百日咳鲍特菌和副百日咳鲍特菌的培养。
b) Amies或 Stuart 转运培养基：适用于分离脑膜炎奈瑟菌和白喉棒杆菌等。
c) Cary-Blair 转运培养基：适用于肠道病原菌的检验。
4.7.9 病毒学检验常用的转运培养基：
a) 病毒转运液可以由实验室自行配制或购买。基础成分包括：Hank平衡盐溶液、牛血清白蛋白、
L-谷氨酸、HEPES缓冲液（pH7.......
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