[PDF] GB 23200.21-2016 - 中国标准 英文版
| 标准号码 | 美元 | 购买PDF | 工期 | 标准名称(英文版) |
| GB 23200.21-2016 | 219 | GB 23200.21-2016 | <=3 | 食品安全国家标准 水果中赤霉酸残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法 |
| 基本信息 | |
|---|---|
| 标准编号 | GB 23200.21-2016 (GB23200.21-2016) |
| 中文名称 | 食品安全国家标准 水果中赤霉酸残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法 |
| 英文名称 | Food safety national standard -- Determination of gibberellic acid residues in fruits by liquid chromatography-mass spectrometry / mass spectrometry |
| 行业 | 国家标准 |
| 中标分类 | G25 |
| 字数估计 | 11,135 |
| 发布日期 | 2016-12-18 |
| 实施日期 | 2017-06-18 |
| 旧标准 (被替代) | SN/T 0350-2012 |
| 标准依据 | State Health Commission, Ministry of Agriculture, Food and Drug Administration Notice No. 16 of 2016 |
| 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会、国家食品药品监督管理总局 |
GB 23200.21-2016: 食品安全国家标准 水果中赤霉酸残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法
GB 23200.21-2016 英文名称: Food safety national standard -- Determination of gibberellic acid residues in fruits by liquid chromatography-mass spectrometry / mass spectrometry
中华人民共和国国家标准
GB
代替SN 0350-2012
食品安全国家标准
水果中赤霉酸残留量的测定
液相色谱-质谱/质谱法
1 范围
本标准规定了水果中赤霉酸残留量的制样和液相色谱-质谱/质谱测定方法。
本标准适用于进出口苹果、桔子、桃子、梨和葡萄中赤霉酸残留量的检测，其它食品可参照执行。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法。
3 原理
用乙腈提取试样中残留的赤霉酸，提取液经液液分配净化后，用液相色谱-质谱/质谱测定和确证，
外标法定量。
4 试剂和材料
除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682中规定的一级水。
4.1 试剂
4.1.1 乙腈（C2H3N）：色谱纯。
4.1.2 甲醇（CH4O）：色谱纯。
4.1.3 乙酸乙酯（C4H8O2）：色谱纯。
4.1.4 甲酸（CH2O2）:色谱级。
4.1.5 磷酸二氢钾(K2HPO4)。
4.1.6 氢氧化钠（NaOH）。
4.1.7 硫酸（H2SO4）。
4.1.8 氯化钠（NaCl）。
4.2 溶液配制
4.2.1 硫酸水溶液（pH2.5）: 1滴硫酸加入 100 mL水中，调节水 pH为 2.5。
4.2.2 磷酸盐缓冲溶液(pH7): 6.7 g磷酸二氢钾和 1.2 g氢氧化钠溶解于 1 L水中。
4.2.3 0.15%甲酸溶液:移取 0.15 mL甲酸，用水稀释至 100 mL。
4.3 标准品
4.3.1 赤霉酸标准品（gibberellic acid, CAS NO.为 77-06-5, C19H22O6）:纯度≥98%。
4.4 标准溶液配制
4.4.1 赤霉酸标准储备溶液:称取适量标准品，用甲醇溶解，溶液浓度为 100 µg/mL。0C～4C冷藏避
光保存。有效期三个月。
4.4.2 标准工作溶液: 根据需要用空白样品溶液将标准储备液稀释成 4、5、10、100 和 150 ng/mL 的
标准工作溶液,相当于样品中含有 8 µg/kg、10 µg/kg、20 µg/kg、200 µg/kg、300 µg/kg 赤霉酸。临用前配制。
4.5 材料
4.5.1 有机相微孔滤膜:0.45 µm。
5 仪器和设备
5.1 液相色谱-质谱/质谱仪:配有电喷雾离子源。
5.2 分析天平: 分析天平：感量 0.01 g和 0.0001 g。
5.3 pH计。
5.4 旋转蒸发器。
5.5 旋涡混合器。
5.6 离心机:4 000 r/min。
6 试样制备与保存
从所取全部样品中取出有代表性样品约 500 g，取样部位按 GB 2763附录 A执行，用粉碎机粉碎，
混合均匀，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封，并标明标记。将试样于-18C冷冻保存。
在抽样和制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。
7 测定步骤
7.1 提取
称取5 g试样(精确到0.01 g)置于50 mL塑料离心管中，加入25 mL乙腈和2 g氯化钠，涡旋1 min,
以4 000 r/min离心5 min，将上层乙腈提取液转移至浓缩瓶中，下层溶液再用20 mL乙腈提取一次，合
并乙腈提取液，在45℃以下水浴减压浓缩至近干，用10 mL硫酸水溶液将残渣转移至50 mL塑料离心管中，
加入20 mL乙酸乙酯，涡旋1 min，以4 000 r/min离心5 min，乙酸乙酯转移至另一50 mL塑料离心管中，
再加入20 mL乙酸乙酯，重复上述操作，合并乙酸乙酯提取液，加入10 mL磷酸盐缓冲溶液，涡旋，以4 000
r/min离心5 min，分取磷酸盐缓冲盐溶液，乙酸乙酯层中再加入10 mL磷酸盐缓冲溶液提取一次，合并
磷酸盐缓冲溶液，滴加50％硫酸溶液调节溶液pH为2.50.2，加入20 mL乙酸乙酯，涡旋1 min，以4 000
r/min离心5 min，将上层乙酸乙酯转移至浓缩瓶中，磷酸盐缓冲盐溶液层中再加入20 mL乙酸乙酯提取
一次，合并乙酸乙酯提取液在45℃以下水浴减压浓缩至近干，加10.0 mL甲醇-水（1+1, 体积比）溶解
残渣，混匀，过0.45 m滤膜，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。
7.2 测定
7.2.1 液相色谱-质谱/质谱
液相色谱-质谱/质谱参考条件如下：
a）色谱柱:C18柱, 150 mm×4.6 mm(i.d) ,5μm 或相当者；-
b）流动相:乙腈-0.15 %甲酸水溶液（35+65，体积比）；
c）流速: 0.4 mL/min；
d) 进样量:30 µL；
e) 离子源:电喷雾离子源；
f) 扫描方式:负离子扫描；
g) 检测方式:多反应监测；
h) 雾化气、气帘气、辅助气、碰撞气均为高纯氮气；使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达
到检测要求，参考条件参见附录A表A.1；
7.2.2 液相色谱-质谱/质谱测定
根据样液中赤霉酸的含量情况，选定响应值适宜的标准工作液进行色谱分析，标准工作液应有五个
浓度水平。待测样液中赤霉酸的响应值均应在仪器检测的工作曲线范围内。在上述色谱条件下，赤霉酸
的参考保留时间约为 4.9 min。标准溶液的选择性离子流图参见附录 B中图 B.1。
7.2.3 液相色谱-质谱/质谱确证
按照上述条件测定样品和标准工作液，如果检测的质量色谱峰保留时间与标准工作液一致，允许偏
差小于2.5%；定性离子对的相对丰度与浓度相当标准工作液的相对丰度一致，相对丰度允许偏差不超
过表 1规定，则可判断样品中存在相应的被测物。
7.3 空白试验
除不加试样外，均按上述操作步骤进行。
8 结果计算和表述
用色谱数据处理机或按式（1）计算试样中赤霉酸残留含量,计算结果需扣除空白值:
9 精密度
9.1 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），
应符合附录D的要求。
9.2 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），
应符合附录 E的要求。
10 定量限和回收率
10.1 定量限
本方法的定量限为 10 µg/kg。
10.2 回收率
在不同添加水平条件下的回收率数据见附录C。
附 录 A
（资料性附录）
API 4000 LC-MS/MS系统电喷雾离子源参考条件
监测离子对及电压参数
a) 电喷雾电压(IS):-4500 V......