路径: 主页 > GB > 第29页 > GB 31658.2-2021 | 标准编号 | GB 31658.2-2021 (GB31658.2-2021) | | 中文名称 | | | 英文名称 | (National Food Safety Standard Determination of Chloramphenicol Residues in Animal Foods Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry) | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | X04 | | 字数估计 | 8,876 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生健康委员会、国家市场监督管理总局 | GB 31658.2-2021: 食品安全国家标准 动物性食品中氯霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
食品安全国家标准
动物性食品中氯霉素残留量的测定
液相色谱-串联质谱法
中华人民共和国国家标准
中华人民共和国国家卫生健康委员会发布
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
中华人民共和国农业农村部
前言
本文件按照GB/T １１-２０２０«标准化工作导则 第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定
起草.
本文件系首次发布.
食品安全国家标准
动物性食品中氯霉素残留量的测定
液相色谱Ｇ串联质谱法
１ 范围
本文件规定了猪、鸡肌肉、肝脏和鱼、虾可食性组织中氯霉素残留检测的制样和液相色谱Ｇ串联质谱测
定方法.
本文件适用于猪、鸡肌肉、肝脏和鱼、虾可食组织中氯霉素残留量的测定.
２ 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,仅
该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件.
GB/T ６６８２ 分析实验室用水规格和试验方法
３ 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
４ 原理
试料中残留的氯霉素,采用间位氯霉素或氘代氯霉素作内标,依次用乙腈、４％氯化钠去蛋白,正己烷
脱脂,乙酸乙酯提取,固相萃取柱净化,氮气吹干,液相色谱Ｇ串联质谱法测定,内标法定量.
５ 试剂与材料
除另有规定外,所有试剂均为分析纯,水为符合GB/T ６６８２规定的一级水.
５１ 试剂
５１１ 乙腈(CH３CN):色谱纯.
５１２ 甲醇(CH３OH):色谱纯.
５１３ 正己烷(C６H１４).
５１４ 乙酸乙酯(CH３COOC２H５).
５１５ 氯化钠(NaCl).
５２ 标准品
５２１ 氯霉素(CAP,Chloramphenicol,C１１H１２Cl２N２O５,CAS号:５６Ｇ７５Ｇ７),含量≥９８０％.
５２２ 内标:间位氯霉素(mＧCAP)或氘代氯霉素(CAPＧD５,ChloramphenicolD５,C１１H７D５Cl２N２O５,CAS
号:２０２４８０Ｇ６８Ｇ０),含量≥９８０％.
５３ 溶液配制
５３１ ４％氯化钠溶液:取氯化钠４g,用水溶解并稀释至１００mL,临用前配制.
５３２ 水饱和乙酸乙酯溶液:取乙酸乙酯４００mL,于５００mL棕色试剂瓶中,加水５０mL,加盖、振摇、静
置,使用时取上层溶液.
５４ 标准溶液制备
５４１ 氯霉素标准储备液:取氯霉素约１０mg,精密称定,用甲醇适量超声使溶解并稀释定容至１００mL
容量瓶,制成浓度为１００μg/mL的标准储备液.-１８℃保存,有效期１年.
５４２ 内标储备液:取内标１０mg,精密称定,用甲醇适量超声使溶解并稀释至１００mL容量瓶,制成浓
度为１００μg/mL的内标储备液.-１８℃保存,有效期１年.
５４３ 氯霉素标准工作液:精密量取氯霉素标准储备液适量,用流动相稀释成浓度为１０ng/mL和
５０ng/mL的标准工作液.４℃保存,有效期３个月.
５４４ 内标工作液:精密量取内标储备液适量,用流动相稀释成浓度为２０ng/mL的内标工作液.４℃
保存,有效期３个月.
５５ 材料
C１８固相萃取柱:５００mg/３mL,或相当者.
６ 仪器和设备
６１ 液相色谱Ｇ串联质谱仪:配电喷雾离子源.
６２ 分析天平:感量０００００１g和００１g.
６３ 涡旋混合器.
６４ 组织匀浆器.
６５ 低温离心机.
６６ 样品浓缩仪.
６７ 固相萃取装置.
７ 试料的制备与保存
７１ 试料的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试组织,绞碎,并使均质.
a) 取均质的供试样品,作为供试试料;
b) 取均质的空白样品,作为空白试料;
c) 取均质的空白样品,添加适宜浓度的标准工作液,作为空白添加试料.
７２ 试料的保存
-１８℃以下保存.
８ 测定步骤
８１ 提取
取试料５g(准确至±００２g),加内标工作液２５０μL、乙腈５mL、４％氯化钠溶液５mL,涡旋振荡
２min,４０００r/min离心１０min,取上清液,残渣重复提取１次,合并上清液.加正己烷５mL,涡旋振荡
１min,２０００r/min离心１０min,弃去上层液,正己烷重复处理１次.加水饱和的乙酸乙酯溶液５mL,涡
旋振荡１min,２０００r/min离心１０min,上层液转移到１５mL离心管中,重复提取１次,合并提取液,氮气
吹干,加水Ｇ乙腈(９５∶５)３mL使溶解,备用.
８２ 净化
取固相萃取柱,依次用甲醇、水各１０mL预洗.取备用液过柱,加水洗柱２次,每次３mL,加流动相
４mL,以１mL/min速度洗脱,收集洗脱液.加水饱和乙酸乙酯溶液４mL,涡旋振荡１min,２０００r/min
离心５min,取上层液,重复处理１次,合并上层溶液,氮气吹干.加流动相１０mL溶解,滤过,供液相色
谱Ｇ串联质谱测定.
８３ 标准曲线的制备
按表１精密量取氯霉素标准工作液和内标工作液适量,用流动相稀释成氯霉素浓度分别为
０５ng/mL、１０ng/mL、２０ng/mL、５０ng/mL、１０ng/mL、内标浓度为５０ng/mL的标准溶液,供液相
色谱法Ｇ串联质谱法测定.以测得特征离子质量色谱峰外标和内标峰面积比为纵坐标、对应的标准溶液浓
GB ３１６５８２-２０２１
度为横坐标,绘制标准曲线.求回归方程和相关系数.
８４ 测定
８４１ 液相色谱条件
a) 色谱柱:C１８(１５０mm×３２mm,５μm);
b) 流动相:甲醇Ｇ水(５０∶５０);
c) 流速:０４mL/min;
d) 柱温:３０℃;
e) 进样量:２０μL;
f) 运行时间:１０min.
８４２ 质谱条件
a) 离子源:电喷雾离子源;
b) 扫描方式:负离子扫描;
c) 检测方式:多反应监测;
d) 电离电压:２８kV;
e) 源温:１２０℃;
f) 碰撞气:氩气３０×１０-３mbar;
g) 脱溶剂气速:５００L/h;
h) 锥孔气速:２０L/h;
i) 数据采集窗口:１０min;
j) 驻留时间:０６s;
k) 测试药物定性离子对、定量离子对及对应的锥孔电压和碰撞能量见表２.
８４３ 测定法
取试料溶液和相应的标准溶液,作单点或多点校准,按内标法以色谱峰面积定量.氯霉素特征离子质
谱图见图A１,标准溶液中各特征离子的质量色谱图分别见图A２.
８５ 空白试验
取空白试料,除不加标准溶液外,采用相同的测定步骤进行平行操作.
９ 结......
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