路径: 主页 > GB > 第25页 > GB 31613.3-2021 | 标准编号 | GB 31613.3-2021 (GB31613.3-2021) | | 中文名称 | 食品安全国家标准 鸡可食性组织中二硝托胺残留量的测定 | | 英文名称 | National food safety standard--Determination of dinitolmide residues in chicken edible tissues | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | X22 | | 国际标准分类 | 67.120 | | 字数估计 | 16,133 | | 发布日期 | 2021-09-16 | | 实施日期 | 2022-02-01 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生健康委员会、国家市场监督管理总局 | GB 31613.3-2021: 食品安全国家标准 鸡可食性组织中二硝托胺残留量的测定
食品安全国家标准
鸡可食性组织中二硝托胺残留量的测定
中华人民共和国国家卫生健康委员会发布
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
１ 范围
本文件规定了鸡肌肉、肝脏、肾脏和脂肪中二硝托胺及其代谢物残留量检测的制样和液相色谱测定
方法.
本文件适用于鸡肌肉、肝脏、肾脏和脂肪中二硝托胺及其代谢物残留量的检测.
２ 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件.
GB/T ６６８２ 分析实验室用水规格和试验方法
３ 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
４ 原理
试样中残留的二硝托胺及其代谢物经磷酸盐缓冲液提取,HLB固相萃取柱净化,液相色谱分离,二极
管矩阵检测器检测,外标法定量.
５ 试剂与材料
除另有规定外,所有试剂均为分析纯,水为符合GB/T ６６８２规定的一级水.
５.１ 试剂
5.1.1磷酸二氢钾(KH₂PO₄)。
5.1.2磷酸氢二钾(K₂HPO₂)。
5.1.3氢氧化钠(NaOH)。
5.1.4乙腈(CH₃CN):色谱纯。
5.1.5甲酸(HCOOH):色谱纯。
5.1.6盐酸(HCl)。
5.2 溶液的配制
5.2.1 1.0 mol/L盐酸溶液：取盐酸21.2mL,用水稀释至250 mL,摇匀。
5.2.21.0 mol/L氢氧化钠溶液：取氢氧化钠40g,加水适量使溶解并稀释至1L,混匀。
5.2.3磷酸盐缓冲液(pH 6.0):取磷酸氢二钾2.0 g、磷酸二氢钾8.0g,加水适量使溶解并稀释至1000 mL,混匀。
5.2.4磷酸盐缓冲液(pH4.0):取磷酸盐缓冲液(pH 6.0),用1.0 mol/L盐酸溶液调pH至4.0,即得。
5.2.50.1%甲酸溶液：取甲酸1mL,用水稀释至1000mL,混匀。
5.2.60.1%甲酸-乙腈：取0.1%甲酸溶液800mL、乙腈200mL,混匀。
5.3标准品
二硝托胺、二硝托胺代谢物(３ＧANOT),含量均≥９５％,见附录A.
５.４ 标准溶液的制备
５.４.１ 标准储备液:取二硝托胺、３ＧANOT标准品各１０mg,精密称定,用适量乙腈溶解并定容至１００mL容量瓶,摇匀.-１８℃以下保存,有效期６个月.
５.４.２ 混合标准储备液:分别精密量取２种标准储备液各５０mL于１００mL容量瓶中,摇匀,即得.
-１８℃以下保存,有效期６个月.
５.４.３ 混合标准工作液:分别精密量取混合标准储备液适量,用０.１％甲酸Ｇ乙腈稀释制成含３ＧANOT和二硝托胺浓度为２５μg/L、５０μg/L、１００μg/L、２００μg/L、５００μg/L、１０００μg/L和２０００μg/L的混合标准工作液.现用现配.
５.５ 材料
５.５.１ HLB固相萃取柱:６０mg/３mL,或相当者.
５.５.２ 滤膜:孔径０.２２μm,有机系.
６ 仪器和设备
６.１ 液相色谱仪:配二极管矩阵检测器.
６.２ 分析天平:感量０.００００１g和０.０１g.
６.３ 固相萃取装置.
６.４ 均质机.
６.５ 离心管:聚丙烯塑料离心管,５０mL.
６.６ 离心机:８０００r/min或以上.
６.７ pH计.
７ 试料的制备与保存
７.１ 试料的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试组织,绞碎,并使均质.
a) 取均质后的供试样品,作为供试试料;
b) 取均质后的空白样品,作为空白试料;
c) 取均质后的空白样品,添加适宜浓度的标准工作液,作为空白添加试料.
７.２ 试料的保存
-１８℃以下保存,３个月内进行分析检测.
８ 测定步骤
８.１ 提取
取试料２g(准确至±０.０２g)于５０mL离心管,加磷酸盐缓冲液(pH６.０)１０.０mL[鸡肝脏、肾脏
加磷酸盐缓冲液(pH４.０)],１００００r/min均质１min,８０００r/min离心５min,收集上清液,残渣加相应
磷酸盐缓冲液１０.０mL,重复处理,合并上清液.准确移取上清液８mL,用氢氧化钠溶液调pH 至
７.０,８０００r/min离心５min,取上清液,备用.
８.２ 净化
固相萃取柱依次用甲醇３mL、水３mL活化.取备用液,过柱,待液面到达柱床表面时用水３mL淋
洗,抽干,用０.１％甲酸Ｇ乙腈４mL洗脱,收集洗脱液,过０.２２μm滤膜,供液相色谱仪测定.
８.３ 标准曲线的制备
分别精密量取混合标准工作液适量,注入液相色谱,记录色谱图.以各组分峰面积为纵坐标、相对应
的标准溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线.求回归方程和相关系数.
８.４ 测定
８.４.１ 液相色谱参考条件
a) 色谱柱:C１８色谱柱(１００mm×２.１mm,１.７μm),或相当者;
b) 流动相:A为０.１％甲酸溶液,B为乙腈,梯度洗脱条件见表１;
c) 流速:０.２mL/min;
d) 波长:２４６nm(二硝托胺);３１０nm(３ＧANOT);
e) 柱温:３０℃;
f) 进样量:１０μL.
８.４.２ 测定法
取试样溶液和标准溶液,作单点或多点校准,按外标法以色谱峰峰面积定量.标准溶液及试样溶
液中目标药物的峰面积均应在仪器检测的线性范围之内.试样液中二硝托胺和３ＧANOT的保留时间
与标准工作液中二硝托胺和３ＧANOT保留时间偏差在±２.５％以内.标准溶液液相色谱图见附录B中
的图B.１.
８.５ 空白试验
取空白试料,除不加标准溶液外,采用相同的测定步骤进行平行操作.
９ 结果计算和表述
试样中二硝托胺的残......
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