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GB 5009.83-2016

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基本信息
标准编号 GB 5009.83-2016 (GB5009.83-2016)
中文名称 食品安全国家标准 食品中胡萝卜素的测定
英文名称 National Food Safety Standard -- Determination of Carotene in Foods
行业 国家标准
中标分类 X09
字数估计 13,177
发布日期 2016-12-23
实施日期 2017-06-23
旧标准 (被替代) GB 5413.35-2010; GB/T 5009.83-2003; NY/T 82.15-1988
标准依据 National Health and Family Planning Commission Notice No.17 of 2016

GB 5009.83-2016: 食品安全国家标准 食品中胡萝卜素的测定
GB 5009.83-2016 英文名称: National Food Safety Standard -- Determination of Carotene in Foods
中华人民共和国国家标准
1 范围
本标准规定了食品中胡萝卜素的测定方法。
本标准色谱条件一适用于食品中α-胡萝卜素、β-胡萝卜素及总胡萝卜素的测定,色谱条件二适用于
食品中β-胡萝卜素的测定。
5 分析步骤
注:整个实验操作过程应注意避光。
5.1 试样制备
谷物、豆类、坚果等试样需粉碎、研磨、过筛(筛板孔径0.3mm~0.5mm);蔬菜、水果、蛋、藻类等试
样用匀质器混匀;固体粉末状试样和液体试样用前振摇或搅拌混匀。4℃冰箱可保存1周。
5.2 试样处理
5.2.1 普通食品试样
5.2.1.1 预处理
蔬菜、水果、菌藻类、谷物、豆类、蛋类等普通食品试样准确称取混合均匀的试样1g~5g(精确至
0.001g),油类准确称取0.2g~2g(精确至0.001g),转至250mL锥形瓶中,加入1g抗坏血酸、75mL
无水乙醇,于60℃±1℃水浴振荡30min。
如果试样中蛋白质、淀粉含量较高( >10%),先加入1g抗坏血酸、15mL45℃~50℃温水、0.5g
木瓜蛋白酶和0.5gα-淀粉酶,盖上瓶塞混匀后,置55℃±1℃恒温水浴箱内振荡或超声处理30min
后,再加入75mL无水乙醇,于60℃±1℃水浴振荡30min。
5.2.1.2 皂化
加入25mL氢氧化钾溶液,盖上瓶塞。置于已预热至53℃±2℃恒温振荡水浴箱中,皂化30min。取出,静置,冷却到室温。
5.2.2 添加β-胡萝卜素的食品试样
5.2.2.1 预处理
固体试样:准确称取1g~5g(精确至0.001g),置于250mL锥形瓶中,加入1g抗坏血酸,加
50mL45℃~50℃温水混匀。加入0.5g木瓜蛋白酶和0.5gα-淀粉酶(无淀粉试样可以不加α-淀粉
酶),盖上瓶塞,置55℃±1℃恒温水浴箱内振荡或超声处理30min。
液体试样:准确称取5g~10g(精确至0.001g),置于250mL锥形瓶中,加入1g抗坏血酸。
5.2.2.2 皂化
取预处理后试样,加入75mL无水乙醇,摇匀,再加入25mL氢氧化钾溶液,盖上瓶塞。置于已预
热至53℃±2℃恒温振荡水浴箱中,皂化30min。取出,静置,冷却到室温。
注:如皂化不完全可适当延长皂化时间至1h。
5.3 试样萃取
将皂化液转入500mL分液漏斗中,加入100mL石油醚,轻轻摇动,排气,盖好瓶塞,室温下振荡
10min后静置分层,将水相转入另一分液漏斗中按上述方法进行第二次提取。合并有机相,用水洗至
近中性。弃水相,有机相通过无水硫酸钠过滤脱水。滤液收入500mL蒸发瓶中,于旋转蒸发器上
40℃±2℃减压浓缩,近干。用氮气吹干,用移液管准确加入5.0mL二氯甲烷,盖上瓶塞,充分溶解提
取物。经0.45μm膜过滤后,弃出初始约1mL滤液后收集至进样瓶中,备用。
注:必要时可根据待测样液中胡萝卜素含量水平进行浓缩或稀释,使待测样液中α-胡萝卜素和/或β-胡萝卜素浓度
在0.5μg/mL~10μg/mL范围内。
5.4 色谱测定
5.4.1 色谱条件一(适用于食品中α-胡萝卜素、β-胡萝卜素及总胡萝卜素的测定)
5.4.1.1 参考色谱条件
参考色谱条件列出如下:
a) 色谱柱:C30柱,柱长150mm,内径4.6mm,粒径5μm,或等效柱;
b) 流动相:A相:甲醇∶乙腈∶水=73.5∶24.5∶2;
B相:甲基叔丁基醚;
5.4.1.3 试样测定
在相同色谱条件下,将待测液注入液相色谱仪中,以保留时间定性,根据峰面积采用外标法定量。
α-胡萝卜素根据标准曲线回归方程计算待测液中α-胡萝卜素浓度,β-胡萝卜素根据全反式β-胡萝卜素响应因子进行计算。
5.4.2 色谱条件二(适用食品中β-胡萝卜素的测定)
5.4.2.1 参考色谱条件
参考色谱条件列出如下:
a) 色谱柱:C18柱,柱长250mm,内径4.6mm,粒径5μm,或等效柱;
b) 流动相:三氯甲烷∶乙腈∶甲醇=3∶12∶85,含抗坏血酸0.4g/L,经0.45μm膜过滤后备用;
c) 流速:2.0mL/min;
d) 检测波长:450nm;
e) 柱温:35℃±1℃;
f) 进样体积:20μL。
5.4.2.2 标准曲线的制作
将β-胡萝卜素标准工作液注入HPLC仪中(色谱图见图C.2),以保留时间定性,测定峰面积。以标
准系列工作液浓度为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线,计算回归方程。
5.4.2.3 试样测定
在相同色谱条件下,将待测试样液分别注入液相色谱仪中,进行 HPLC分析,以保留时间定性,根
据峰面积外标法定量......
   
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