路径: 主页 > SN/T > 第70页 > SN/T 5206-2020 | 标准编号 | SN/T 5206-2020 (SN/T5206-2020) | | 中文名称 | 洋葱黄矮病毒的检疫鉴定方法 | | 英文名称 | (Quarantine and identification methods of onion yellow dwarf virus) | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 国际标准分类 | 65.020.01 | | 字数估计 | 11,187 | | 发布日期 | 2020-12-30 | | 实施日期 | 2021-07-01 | | 标准依据 | 海关总署公告2020年第136号 | | 发布机构 | 海关总署 | SN/T 5206-2020: 洋葱黄矮病毒的检疫鉴定方法
SN/T 5206-2020 英文名称: (Quarantine and identification methods of onion yellow dwarf virus)
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
代替 SN/T 1162-2002
洋葱黄矮病毒的检疫鉴定方法
中华人民共和国海关总署 发 布
前言
本文件按照 GB/T 1.1-2020 给出的规则起草。
本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。
本文件起草单位：中华人民共和国福州海关、中华人民共和国厦门海关、中国检验检疫科学研
究院、中国农业科学院生物技术研究所、福建农林大学。
本文件主要起草人：沈建国、林玲、黄智辉、张永江、李为民、陈细红、廖富荣、高芳銮、周
卫川、吴祖建、陈寿铃。
洋葱黄矮病毒的检疫鉴定方法
1 范围
本文件规定了洋葱黄矮病毒检测的程序和方法。
本文件适用于进出境植物及其产品中洋葱黄矮病毒的检测。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用
文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）
适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
SN/T 2122 进出境植物及植物产品检疫抽样
SN/T 2964 植物病毒检测规范
SN/T 3457 植物病毒分子生物学检测规范
3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4 原理
洋葱黄矮病毒的血清学特性和基因组特征是制定本检疫鉴定方法的主要依据。
5 仪器设备、用具及试剂
5.1 仪器设备
高速冷冻离心机、电子天平（1/1000 g）、酶联仪、PCR 仪、电泳仪、水平电泳槽、-20℃低温冰
箱和 -80℃超低温冰箱、凝胶成像分析系统、pH 计、微波炉、磁力搅拌器、恒温水浴锅、高压灭菌
锅、超净工作台等。
5.2 用具
各种量程的可调移液器（1000 μL、200 μL、100 μL、20 μL、10 μL、2 μL）、PCR 反应管、离心管
（1.5 mL）、研钵等。
5.3 试剂
除另有规定外，所有试剂均为分析纯，实验用水应符合 GB/T 6682 中相关规定。DAS-ELISA 试剂
见附录 A、RT-PCR 试剂见附录 B。
6 抽样和样品制备
6.1 抽样
抽样方法按照 SN/T 2122 相关中规定执行。
有病毒危害症状的植物材料单独抽样，OYDV 的危害症状描述参见附录 C；无危害症状的植物材
料抽样方法按照 SN/T 2122 中相关规定执行。
6.2 样品制备
分别按照有症和无症进行样品制备，具体方法按照 SN/T 2964 和 SN/T 3457 中规定执行。
7 检测与鉴定
7.1 DAS-ELISA
DAS-ELISA 具体方法见附录 A。
7.2 RT-PCR
RT-PCR 具体方法见附录 B。
8 结果判定与记录
8.1 结果判定
样品检测时，检测流程及结果判定按下述原则进行：
首先采用 DAS-ELISA 进行初步筛检。
若检测结果为阳性，采用 RT-PCR 方法进行验证。若验证结果为阴性，则判定样品不携带
OYDV；若验证结果为阳性，则判定样品携带 OYDV。
若检测结果为阴性，采用 RT-PCR 方法进行验证。若验证结果为阴性，则判定样品不携带
OYDV；若 RT-PCR 验证结果为阳性，则需要将 PCR 产物进行测序，测定的序列为 OYDV 序列时判定
样品携带 OYDV。
8.2 结果记录
记录包括样品来源、样品种类、检测时间、检测地点、检测方法和结果、检测人员签字。DAS-
ELIS......
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