路径: 主页 > SN/T > 第70页 > SN/T 5207-2020 | 标准编号 | SN/T 5207-2020 (SN/T5207-2020) | | 中文名称 | 蓝莓休克病毒检疫鉴定方法 | | 英文名称 | (Quarantine and identification method of blueberry shock virus) | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 国际标准分类 | 65.020.01 | | 字数估计 | 14,170 | | 发布日期 | 2020-12-30 | | 实施日期 | 2021-07-01 | | 标准依据 | 海关总署公告2020年第136号 | | 发布机构 | 海关总署 | SN/T 5207-2020: 蓝莓休克病毒检疫鉴定方法
SN/T 5207-2020 英文名称: (Quarantine and identification method of blueberry shock virus)
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
蓝莓休克病毒检疫鉴定方法
中华人民共和国海关总署 发 布
前言
本文件按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布
机构不承担识别这些专利的责任。
本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。
本文件起草单位：中华人民共和国福州海关、福建省农业科学院、中国检验检疫科学研究院、
福建农林大学。
本文件主要起草人：蔡伟、谢丽雪、李雪珍、李韬、张永江、沈建国、高芳銮、吴祖建、陈
寿铃。
蓝莓休克病毒检疫鉴定方法
1 范围
本文件规定了蓝莓休克病毒检疫鉴定的原理，仪器设备、用具及试剂，检测与鉴定，结果判定
与记录，以及样品的保存。
本文件适用于进出境蓝莓种苗中蓝莓休克病毒的检测。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文
件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适
用于本文件。
SN/T 2122 进出境植物及植物产品检疫抽样方法
3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4 基本信息
蓝莓休克病毒的基本信息如下：
--学名：Blueberry shock virus，缩写：BlShV。
--分类地位：雀麦花叶病毒科（Bromoviridae）、等轴不稳环斑病毒属（Ilarvirus）成员。
--蓝莓休克病毒的分类地位、寄主范围、病害症状、分布地区、传播途径、粒体形态、病毒
基因组等参见附录 A。
5 原理
蓝莓休克病毒的血清学和分子生物学特性是制定本检疫鉴定方法的主要依据。
6 仪器设备、用具及试剂
6.1 仪器设备
高速冷冻离心机、电子天平（1/1000 g）、PCR 仪、电泳仪、水平电泳槽、-20℃ 低温冰箱
和 -80℃ 超低温冰箱、全自动酶联免疫分析系统、凝胶成像分析系统、pH 计、微波炉、磁力搅
拌器、恒温水浴锅、高压灭菌锅、超净工作台、酶标仪等。
6.2 用具
各种量程的可调移液器（1 000 μL、200 μL、100 μL、20 μL、10 μL、2 μL）、PCR 反应管、
无 RNase 离心管（1.5 mL）、研钵、酶联板等。
6.3 试剂
双抗体夹心酶联免疫吸附测定（DAS-ELISA）试剂见附录 B，普通 RT-PCR 检测试剂见附录 C，
巢式 RT-PCR 检测试剂见附录 D，实时荧光 RT-PCR 检测试剂见附录 E。
7 检测与鉴定
7.1 抽样检查
按照 SN/T 2122 给出的方法进行抽样、取样，并检查植株是否有矮化、畸型，叶片花叶、斑
驳等疑似病毒危害症状。
7.2 DAS-ELISA
检测方法见附录 B。
7.3 普通 RT-PCR 检测
检测方法见附录 C。
7.4 巢式 RT-PCR 检测
检测方法见附录 D。
7.5 实时荧光 RT-PCR 检测
检测方法见附录 E。
8 结果判定与记录
8.1 结果判定
8.1.1 DAS-ELISA 初步筛检，若检测结果为阴性，则判定样品不携带 BlShV ；若检测结果为阳性，
则采用普通 RT-PCR 检测、巢式 RT-PCR 检测或实时荧光 RT-PCR 检测中的任一方法进行验证。
8.1.2 若验证结果为阳性，则判定样品携带 BlShV。
8.2 结果记录
记录好各项实验数据，包括样品来源、种类、时间，实验的时间、地点、方法和结果等，并
要有经手人和实验人员的签字。血清学检测结果保留吸光......
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