| 标准编号 | GB 29706-2013 (GB29706-2013) | | 中文名称 | 食品安全国家标准 动物性食品中氨苯砜残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 | | 英文名称 | Determination of Dapsone residues in animal derived food by Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometric method | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | C53 | | 国际标准分类 | 67.020 | | 字数估计 | 10,187 | | 引用标准 | GB/T 6682; GB/T 1.1-2000 | | 采用标准 | GB/T 6682; GB/T 1.1-2000 | | 标准依据 | 农业部公告第1927号 | | 发布机构 | 中华人民共和国农业部、中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 | | 范围 | 本标准规定了动物性食品中氨苯砜残留量检测的制样和液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于猪和牛的肌肉及肝组织中氨苯砜残留量的检测。 | GB 29706-2013
Determination of Dapsone residues in animal derived food by Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometric method
中华人民共和国国家标准
食品安全国家标准
动物性食品中氨苯砜残留量的测定
液相色谱-串联质谱法
2013-09-16发布
2014-01-01实施
中 华 人 民 共 和 国 农 业 部
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布
食品安全国家标准
动物性食品中氨苯砜残留量的测定
液相色谱-串联质谱法
1 范围
本标准规定了动物性食品中氨苯砜残留量检测的制样和液相色谱-串联质谱测定方法。
本标准适用于猪和牛的肌肉及肝组织中氨苯砜残留量的检测。
2 规范性引用文件
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GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。
3 原理
试料中残留的氨苯砜,用乙腈萃取,正己烷除脂,MCX柱净化,液相色谱-串联质谱测定,外标法
定量。
4 试剂和材料
以下所用的试剂,除特别注明外均为分析纯试剂,水为符合GB/T 6682规定的一级水。
4.1 氨苯砜标准品:含量≥98%。
4.2 乙腈:色谱纯。
4.3 正己烷。
4.4 浓氨水。
4.5 盐酸。
4.6 MCX固相萃取柱:60mg/3mL,或相当者。
4.7 1mol/L盐酸溶液:取浓盐酸8.4mL,用水溶解并稀释至100mL。
4.8 0.1mol/L盐酸溶液:取浓盐酸0.84mL,用水溶解并稀释至100mL。
4.9 5mmol/L乙酸铵溶液:取乙酸铵0.385g,用水溶解并稀释至1000mL,滤膜过滤。
4.10 5%氨化乙腈:取浓氨水5mL,用乙腈溶解并稀释至100mL。
4.11 1mg/mL氨苯砜标准贮备液:精密称取氨苯砜10mg,于10mL量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻
度,配制成浓度为1mg/mL的氨苯砜标准贮备液。-20℃避光保存,有效期6个月。
4.12 10μg/mL氨苯砜标准工作液:精密量取1mg/mL氨苯砜标准贮备液0.1mL,于10mL量瓶中,
用甲醇稀释至刻度,配制成浓度为10μg/mL的氨苯砜标准工作液。-20℃避光保存,有效期6个月。
4.13 100ng/mL氨苯砜标准工作液:精密量取10μg/mL氨苯砜标准工作液0.1mL,于10mL量瓶
中,用甲醇稀释至刻度,配制成浓度为100ng/mL的氨苯砜标准工作液。-20℃避光保存,有效期
6个月。
5 仪器和设备
5.1 液相色谱-串联质谱仪:配有ESI源。
5.2 分析天平:感量0.00001g。
5.3 天平:感量0.01g。
5.4 离心机。
5.5 氮气吹干装置。
5.6 旋涡混合器。
5.7 固相萃取装置。
5.8 超声波清洗机。
5.9 均质机。
5.10 滤膜:0.22μm。
5.11 离心管:50mL。
6 试料的制备与保存
6.1 试料的制备
取新鲜或冷冻空白或供试组织,绞碎,并使均质。
---取均质后的供试样品,作为供试试料。
---取均质后的空白样品,作为空白试料。
---取均质后的空白样品,添加适宜浓度的标准工作液,作为空白添加试料。
6.2 样品的保存
-20℃以下保存。
7 测定步骤
7.1 提取
称取试料2g±0.05g,于离心管中,加乙腈10mL,旋涡混合2min,加正己烷5mL,漩涡混合
1min,超声5min,5000r/min离心10min,弃上层正己烷液。取乙腈液于另一离心管中,加1mol/L
盐酸溶液10mL,旋涡混匀,备用。
7.2 净化
MCX柱依次用甲醇5mL和水5mL活化,取备用液过柱,控制流速小于1mL/min,用0.1mol/L
盐酸溶液5mL和甲醇5mL淋洗,抽干,用5%氨化乙腈5mL洗脱,于40℃水浴氮气吹干,用流动相
1.0mL溶解残余物,旋涡混匀,供液相色谱-串联质谱测定。
7.3 标准曲线的制备
精密量取100ng/mL氨苯砜标准工作液适量,用甲醇稀释,配制成浓度分别为0.5、1、2、5、10和
20μg/L的系列标准溶液。供液相色谱-串联质谱测定。以特征离子质量色谱峰面积为纵坐标,对照溶
液浓度为横坐标,绘制标准曲线,求回归方程和相关系数。
7.4 测定
7.4.1 液相色谱条件
7.4.1.1 色谱柱:C18(150mm×2.1mm,粒径5μm),或相当者。
7.4.1.2 流动相:乙腈+5mmol/L乙酸铵(50+50,体积比)。
7.4.1.3 柱温:40℃。
7.4.1.4 进样量:20μL。
7.4.2 质谱条件
7.4.2.1 离子源:ESI源。
7.4.2.2 扫描方式:正离子扫描。
7.4.2.3 检测方式:选择反应监测。
7.4.2.4 喷雾电压:4800V。
7.4.2.5 离子传输管温度:350℃。
7.4.2.6 鞘气压力:40arb。
7.4.2.7 辅助气压力:5arb。
7.4.2.8 氨苯砜选择反应监测的优化参数:见表1。
表1 氨苯砜选择反应监测的优化参数
药物名称 定性离子对 定量离子对
碰撞能量
eV
氨苯砜
249.0 >108.1
249.0 >92.2
249.0 >108.1 21
7.4.3 测定
7.4.3.1 定性测定
通过试样色谱图的保留时间与相应标准品的保留时间、各色谱峰的特征离子与相应浓度标准溶液
各色谱峰的特征离子相对照定性。试样与标准品保留时间的相对偏差不大于5%;试样特征离子的相
对丰度与浓度相当混合标准溶液的相对丰度一致,相对丰度偏差不超过表2的规定,则可判断试样中存
在相应的被测物。
表2 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差
相对离子丰度 >50 20~50 10~20 ≤10
允许的相对偏差 ±20 ±25 ±30 ±50
将供试试样和标准溶液的定量离子面积之比作单点校正定量。
7.4.3.2 定量测定
取试样溶液和标准溶液,按外标法,以峰面积定量,标准溶液及试样溶液中的氨苯砜响应值均应在
仪器检测的线性范围内。在上述色谱-质谱条件下,氨苯砜标准溶液、空白组织试样和空白组织添加试
样溶液中特征离子质量色谱图见附录A。
7.5 空白试验
除不加试料外,采用完全相同的步骤进行平行操作。
8 结果计算与表述
试料中氨本砜的残留量(μg/kg)按式(1)计算:
X=
A×cS×V
AS×m
(1)
式中:
X---供试试料中氨本砜残留量,单位为微克每千克(μg/kg);
A---试样溶液中氨本砜的峰面积;
cS---标准工作液中氨本砜的浓度,单位为微克每升(μg/L);
V---溶解残余物所用流动相的体积,单位为毫升(mL);
AS---标准工作液中氨本砜的峰面积;
m---供试试料质量,单位为克(g)。
注:计算结果需扣除空白值,测定结果用平行测定的算术平均值表示,保留三位有效数字。
9 检测方法灵敏度、准确度和精密度
9.1 灵敏度
本方法的检测限为0.1μg/kg,定量限为0.5μg/kg。
9.2 准确度
......
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