| 标准编号 | GB 31613.4-2022 (GB31613.4-2022) | | 中文名称 | 食品安全国家标准 牛可食性组织中吡利霉素残留量的测定液相色谱-串联质谱法 | | 英文名称 | (National Food Safety Standard Determination of Perilimycin Residues in Bovine Edible Tissues by Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry) | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | X22 | | 字数估计 | 9,957 | | 发布日期 | 2022-09-20 | | 实施日期 | 2023-02-01 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生健康委员会、国家市场监督管理总局 | GB 31613.4-2022: 食品安全国家标准 牛可食性组织中吡利霉素残留量的测定液相色谱-串联质谱法
GB 31613.4-2022 英文名称: (National Food Safety Standard Determination of Perilimycin Residues in Bovine Edible Tissues by Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry)
中华人民共和国国家卫生健康委员会
食品安全国家标准
牛可食性组织中吡利霉素残留量的测定
液相色谱-串联质谱法
中华人民共和国国家标准
发 布
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
中华人民共和国农业农村部
前 言
本文件按照 GB/T １１-２０２０«标准化工作导则 第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定
起草.
本文件系首次发布.
食品安全国家标准
牛可食性组织中吡利霉素残留量的测定 液相色谱Ｇ串联质谱法
１ 范围
本文件规定了牛可食性组织中吡利霉素残留检测的制样和液相色谱Ｇ串联质谱测定方法.
本文件适用于牛肌肉、肝脏、肾脏和脂肪中吡利霉素的残留检测.
２ 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件.
GB/T ６６８２ 分析实验室用水规格和试验方法
３ 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
４ 原理
试料中残留的吡利霉素,用５％甲酸乙腈溶液提取,固相萃取柱净化,液相色谱Ｇ串联质谱测定,基质
匹配标准溶液外标法定量.
５ 试剂与材料
除另有规定外,所有试剂均为分析纯,水为符合GB/T ６６８２规定的一级水.
５１ 试剂
５１１ 乙腈(CH３CN):色谱纯.
５１２ 甲醇(CH３OH):色谱醇.
５１３ 甲酸(HCOOH):色谱纯.
５１４ 无水硫酸钠(Na２SO４).
５１５ 氯化钠(NaCl).
５２ 溶液配制
５２１ ５％甲酸乙腈溶液:取甲酸５mL,用乙腈稀释至１００mL.
５２２ ０１％甲酸乙腈溶液:取甲酸１mL,用乙腈稀释至１０００mL.
５２３ ０１％甲酸溶液:取甲酸１mL,用水稀释至１０００mL.
５２４ ８０％甲醇溶液:取甲醇８０mL,用水稀释至１００mL.
５３ 标准品
吡利霉素(Pirlimycin,C１７H３１ClN２O５S,CAS号:７９５４８Ｇ７３Ｇ５),含量≥９９０％.
５４ 标准溶液的制备
５４１ 标准储备液:精密称取吡利霉素标准品约１０mg,于１０mL容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,
配制成浓度为１mg/mL的吡利霉素标准储备液.-１８℃以下保存,有效期１２个月.
５４２ 标准中间液:精密量取吡利霉素标准储备液０１mL,于１０mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,配
制成浓度为１０μg/mL的吡利霉素标准中间液.２℃~８℃保存,有效期６个月.
GB ３１６１３４-２０２２
５４３ 标准工作液:精密量取吡利霉素标准中间液０１mL,于１０mL容量瓶中,用８０％甲醇稀释至刻
度,配制成浓度为１００ng/mL的吡利霉素标准工作液.２℃~８℃保存,有效期６个月.
５５ 材料
５５１ 固相萃取小柱:基质增强脂肪去除柱(３００mg/３mL),或相当者.
５５２ 陶瓷均质子.
５５３ 亲水性聚四氟乙烯微孔滤膜:０２２μm.
６ 仪器和设备
６１ 液相色谱Ｇ串联质谱仪:配有电喷雾离子源(ESI).
６２ 分析天平:感量００１g和０００００１g.
６３ 涡旋混合器.
６４ 高速离心机.
７ 试样的制备与保存
７１ 试样的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试样品,绞碎并均质.
a) 取均质后的供试样品,作为供试试样;
b) 取均质后的空白样品,作为空白试样;
c) 取均质后的空白样品,添加适宜浓度的标准工作液,作为空白添加试样.
７２ 试样的保存
-１８℃以下保存.
８ 测定步骤
８１ 提取
称取试料２g(准确至±００５g)于５０mL离心管中,加入陶瓷均质子,加入５％甲酸乙腈溶液１０mL,
涡旋３０s,加入无水硫酸钠４g、氯化钠１g,涡旋３０s,４℃下８０００r/min离心８min后,快速移取上层乙
腈２４mL至另一离心管中,加水０６mL,混匀,备用.
８２ 净化
将备用液直接过固相萃取小柱,自然流出,收集滤液,并挤干.取滤液适量过微孔滤膜后,供液相色
谱Ｇ串联质谱仪测定.
８３ 基质匹配标准曲线的制备
精密量取吡利霉素标准工作液适量,用提取净化后的空白试样溶液稀释成含药物浓度分别为
１ng/mL、２ng/mL、５ng/mL、１０ng/mL、１００ng/mL和４００ng/mL的基质匹配系列标准溶液,从中各取
１０mL,过微孔滤膜上机测定.以特征离子质量色谱峰面积为纵坐标、基质匹配标准溶液浓度为横坐标,
绘制标准曲线.
８４ 测定
８４１ 液相色谱参考条件
a) 色谱柱:五氟苯基柱(５０mm×３０mm,２６μm),或性能相当者.
b) 流动相:A为０１％甲酸溶液,B为０１％甲酸乙腈溶液.流动相梯度:０min~１min保持
１０％B;１min~３min,１０％B线性变化到９０％B;３min~４min保持９０％B;４min~５min保持
１０％B.
c) 流速:０４mL/min.
d) 进样量:５μL.
e) 柱温:３０℃.
８４２ 串联质谱参考条件
a) 离子源:电喷雾离子源;
b) 扫描方式:正离子扫描;
c) 检测方式:多反应离子监测(MRM);
d) 电喷雾电压:５５００V.
e) 离子源温度:５００℃.
f) 辅助气１:５０psi.
g) 辅助气２:５０psi.
h) 气帘气:２５psi.
i) 碰撞气:Medium.
j) 吡利霉素定性、定量离子对和对应的去簇电压、碰撞能量参考值见表１.
８４３ 测定法
试样溶液的保留时间在基质匹配标准溶液保留时间的±２５％之内.试样溶液中的离子相对丰度与
基质匹配标准溶液中的离子相对丰度相比,符合表２的要求.
８５ 空白试验
取空白试料,除不加药物外,采用完全相同的测定步骤进行测定.
９ 结果计算和表述
试样中吡利霉素的残留量按标准曲线或公式(１)计算.
１０ 方法灵敏度、准确度和精密度
１０１ 灵敏度
本方法对牛肌肉、肝脏、肾脏和......
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