| 标准编号 | GB/T 18641-2018 (GB/T18641-2018) | | 中文名称 | 伪狂犬病诊断方法 | | 英文名称 | Diagnostic method for pseudorabies | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 22,227 | | 发布日期 | 2018-09-17 | | 实施日期 | 2019-04-01 | | 旧标准 (被替代) | GB/T 18641-2002 | | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 18641-2018
Diagnostic method for pseudorabies
ICS 11.220
B41
中华人民共和国国家标准
代替GB/T 18641-2002
伪狂犬病诊断方法
2018-09-17发布
2019-04-01实施
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
中国国家标准化管理委员会 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准代替GB/T 18641-2002《伪狂犬病诊断技术》。与GB/T 18641-2002相比,主要技术变化
如下:
---增加了检测猪伪狂犬病病毒gB抗体的阻断ELISA方法;
---增加了检测伪狂犬病病毒野毒gE-PCR方法。
本标准由中华人民共和国农业农村部提出。
本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。
本标准起草单位:华中农业大学、中国动物卫生与流行病学中心。
本标准主要起草人:何启盖、库旭钢、吴斌、陈品、方六荣、李晓成、姜雯、孟宪荣、范盛先、刘正飞、
吴发兴、吴美洲、陈焕春。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为:
---GB/T 18641-2002。
引 言
伪狂犬病(Pseudorabies,Pr;Aujeszky’sdisease,AD)是由伪狂犬病病毒(Pseudorabiesvirus,
PrV)引起的一种多种动物共患传染病,可危害猪、牛、羊、犬、猫、家兔、小鼠、狐狸和浣熊等多种动物,呈
世界性分布。该病对养猪业的危害最为严重,病毒感染后,妊娠母猪出现流产、产死胎和木乃伊胎;
15日龄内仔猪出现神经症状,致死率100%;断奶仔猪出现神经症状和呼吸道症状,致死率10%~
20%;生长猪和育肥猪出现呼吸道症状,增重缓慢、饲料报酬低;种母猪发生返情和空怀,屡配不孕;公猪
出现睾丸炎性肿胀或萎缩,失去种用能力。除猪外,其他动物感染伪狂犬病病毒后,可出现体温升高、奇
痒和脑脊髓炎等临床症状,最终死亡,但呈散发形式。
本标准规定的常规血清学技术可用于非免疫动物的诊断、血清流行病学调查和免疫动物抗体检测。
其中,中和试验特异性强,是国际贸易中通用的法定方法,用于口岸进出口检疫;乳胶凝集试验简便快
速、敏感性高,适用于基层单位对该病的现场检测和筛查;酶联免疫吸附试验(ELISA)包括全病毒抗原
ELISA(PrV-ELISA)和gB-ELISA方法,适用于实验室开展大批血清样品抗体检测。本标准中的gE-
ELISA鉴别诊断方法,可区分伪狂犬病病毒gE基因缺失疫苗免疫猪和自然感染猪,因此,可用于猪群
野毒感染的诊断和流行病学调查。本标准中规定的3种ELISA方法仅用于检测猪血清中的伪狂犬病
病毒抗体,不适用于检测其他动物血清中伪狂犬病病毒抗体。
本标准规定的病原学诊断方法用于检测死亡和剖检动物的病料、流产胎儿组织(如扁桃体、肺脏和
脑组织等)、活体动物的扁桃体、鼻拭子和公猪精液中的伪狂犬病病毒。其中,病毒分离鉴定限于有条件
的实验室使用,聚合酶链式反应具有快速和灵敏的特点,可同时检测大批样品,但需注意样品交叉污染。
家兔接种试验需在有隔离和消毒条件的动物房中进行。
伪狂犬病诊断方法
1 范围
本标准规定了伪狂犬病的血清中和试验、乳胶凝集试验、伪狂犬病病毒抗体ELISA(PrV-ELISA)、
猪伪狂犬病gB-ELISA(阻断法)和gE-ELISA(阻断法)等抗体检测方法及病毒分离鉴定、聚合酶链式反
应和家兔接种试验等病原检测方法。
本标准适用于猪、牛、羊、犬、猫及其他易感动物的伪狂犬病诊断、检疫、免疫抗体评估和流行病学调
查等。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
NY/T 678 猪伪狂犬病免疫酶试验方法
3 血清中和试验(采用固定病毒稀释血清法)
3.1 仪器
3.1.1 二氧化碳培养箱。
3.1.2 生物安全柜。
3.1.3 微量移液器。
3.2 耗材
3.2.1 细胞培养瓶。
3.2.2 96孔细胞培养板。
3.2.3 吸管。
3.2.4 移液器吸头。
3.3 试剂
3.3.1 DMEM培养液(见附录......
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