| 标准编号 | GB/T 31789-2015 (GB/T31789-2015) | | 中文名称 | 冬生疫霉菌检疫鉴定方法 | | 英文名称 | Detection and identification of Phytophthora hibernalis Carne | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 国际标准分类 | 65.020.01 | | 字数估计 | 15,119 | | 发布日期 | 2015-07-03 | | 实施日期 | 2015-11-27 | | 标准依据 | 国家标准公告2015年第22号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 31789-2015
Detection and identification of Phytophthora hibernalis Carne
ICS 65.020.01
B16
中华人民共和国国家标准
冬生疫霉菌检疫鉴定方法
2015-07-03发布
2015-11-27实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布
机构不承担识别这些专利的责任。
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口。
本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国厦门出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:杜洪忠、吴品珊、王宏毅、严进、张秋娥。
冬生疫霉菌检疫鉴定方法
1 范围
本标准规定了冬生疫霉菌的检疫鉴定方法。
本标准适用于针对冬生疫霉菌寄主的苗木、枝条、枝叶、果实以及夹带土壤和介质中冬生疫霉菌的
鉴定。
2 仪器和用具
2.1 仪器
生物显微镜、超净工作台、光照培养箱、电子天平(1/1000g)、高压灭菌锅、冰箱、PCR扩增仪、荧光
PCR扩增仪、电泳仪、凝胶成像仪、高速冷冻离心机、恒温水浴锅。
2.2 用具
烧杯、三角瓶、量筒、试管、培养皿、酒精灯、镊子、剪刀、解剖刀、接种针、载玻片、盖玻片、塑料研杵、
移液器、移液器吸头、离心管、液氮罐。
3 试剂、材料和培养基
3.1 试剂
匹马霉素(pimaricin),氨苄青霉素钠盐(ampicilin),利福平钠盐(rifampicin),五氯硝基苯(penta-
chloronitrobenzene),碳酸钙(CaCO3),β-谷甾醇(β-sitosterol),色氨酸(tryptophan),硫氨(thiamine),
氯化钙(CaCl2·H2O),次氯酸钠(NaClO)。
琼脂糖,Tris-HCl,MgCl2,HCl,EDTA(乙二胺四乙酸四钠盐),NaOH,NaOAc,KCl,Tris,CTAB
(十六烷基三甲基溴化铵),TAE,无水乙醇(Ethanol),三氯甲烷(Chloroform),异丙醇(Isopropanol),异
戊醇(Isoamylalcohol),SYBRGreenI核酸染料,蛋白酶K,TaqDNA聚合酶,dNTPs,DNA相对分子
质量标准物,PCR引物PHIB1和PHIB2,实时荧光PCR引物PH-F和PH-R及TaqMan-MGB 探针
PH-Pr。
3.2 材料
琼脂粉、V8汁、雪松松针(Cedrusdeodara)、柑橘叶片(Citrusspp.)、胡萝卜、玉米油。
3.3 培养基
V8培养基、胡萝卜丝培养基CPA、选择性培养基PA......
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