| 标准编号 | GB/T 31796-2015 (GB/T31796-2015) | | 中文名称 | 南美大豆猝死综合症病菌和北美大豆猝死综合症病菌检疫鉴定方法 | | 英文名称 | Detection and identification of Fusarium tucumaniae and Fusarium virguliforme | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 国际标准分类 | 65.020.010 | | 字数估计 | 19,154 | | 发布日期 | 2015-07-03 | | 实施日期 | 2015-11-27 | | 标准依据 | 国家标准公告2015年第22号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 31796-2015
Detection and identification of Fusarium tucumaniae and Fusarium virguliforme
ICS 65.020.010
B16
中华人民共和国国家标准
南美大豆猝死综合症病菌和北美大豆
猝死综合症病菌检疫鉴定方法
2015-07-03发布
2015-11-27实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口。
本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国深圳出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:吴品珊、王颖、章桂明、陈枝楠。
南美大豆猝死综合症病菌和北美大豆
猝死综合症病菌检疫鉴定方法
1 范围
本标准规定了南美大豆猝死综合症病菌和北美大豆猝死综合症病菌的检疫鉴定方法。
本标准适用于田间大豆和大豆粒携带的土壤和病残体中南、北美大豆猝死综合症病菌的鉴定。
2 仪器和用具
2.1 仪器
生物显微镜、超净工作台、光照培养箱、电子天平(1/1000g)、高压灭菌锅、冰箱、PCR扩增仪、荧光
PCR扩增仪、电泳仪、凝胶成像仪、高速冷冻离心机、恒温水浴锅、摇床。
2.2 用具
烧杯、三角瓶、量筒、试管、培养皿、酒精灯、镊子、剪刀、解剖刀、接种针、载玻片、盖玻片、塑料研杵、
移液器、移液器吸头、离心管、液氮罐。
3 试剂和培养基
3.1 试剂
琼脂粉,马铃薯,葡萄糖,乳酸,琼脂糖,无菌双蒸水,液氮,蛋白胨,磷酸二氢钾,硫酸镁,链霉素,新
霉素,五氯硝基苯,氯四环素,利福平,Tris-HCl,MgCl2,HCl,EDTA,NaOH,NaOAc,KCl,Tris,
CTAB,TAE,无水乙醇(Ethanol),苯酚(Phenol),溴化乙锭(EB),三氯甲烷(Chloroform),异丙醇
(Isopropanol),异戊醇(Isoamylalcohol),蛋白酶K,TaqDNA聚合酶,dNTP,DNA相对分子质量标准
物,双重PCR特异性引物Fu1/2和Fsg-α-1/2,实时荧光PCR特异性引物及探针16-FP/16-RP和
3.2 培养基
0.2%水琼脂培养液,选择性培养基PCNB,马铃薯葡萄糖培养基(PDA),低营养合成培养基
(SNA)。具体配方参见附录A。
4 检疫鉴定方法
4.1 症状检查
南、北美大豆猝死综合症在症状上区别不大,病害典型的症状是叶片的叶肉枯黄坏死,叶脉有时保
持绿色,根部维管束组织有褐色病......
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