| 标准编号 | GB/T 31801-2015 (GB/T31801-2015) | | 中文名称 | 丁香疫霉菌检疫鉴定方法 | | 英文名称 | Detection and identification of Phytophthora syringae Kleb. | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 国际标准分类 | 65.020.01 | | 字数估计 | 15,132 | | 发布日期 | 2015-07-03 | | 实施日期 | 2015-11-27 | | 标准依据 | 国家标准公告2015年第22号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 31801-2015
Detection and identification of Phytophthora syringae Kleb.
ICS 65.020.01
B16
中华人民共和国国家标准
丁香疫霉菌检疫鉴定方法
2015-07-03发布
2015-11-27实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布
机构不承担识别这些专利的责任。
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口。
本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国天津出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:杜洪忠、罗加凤、吴品珊、严进。
丁香疫霉菌检疫鉴定方法
1 范围
本标准规定了丁香疫霉菌的检疫鉴定方法。
本标准适用于针对丁香疫霉菌寄主的苗木、枝条、枝叶、果实及其夹带土壤和介质中丁香疫霉菌的
鉴定。
2 仪器和用具
2.1 仪器
生物显微镜,超净工作台,光照培养箱,电子天平(1/1000g),高压灭菌锅,冰箱,PCR扩增仪,荧光
PCR扩增仪,电泳仪,凝胶成像仪,高速冷冻离心机,恒温水浴锅。
2.2 用具
烧杯,三角瓶,量筒,试管,培养皿,酒精灯,镊子,剪刀,解剖刀,接种针,载玻片,盖玻片,塑料研杵,
移液器,移液器吸头,离心管,液氮罐。
3 试剂、材料和培养基
3.1 试剂
β-谷甾醇,匹马霉素(pimaricin),氨苄青霉素钠盐(ampicilin),利福平钠盐(rifampicin),五氯硝基
酸四钠盐(EDTA),NaOH,NaOAc,KCl,Tris,十六烷基三甲基溴化铵(CTAB),TAE,无水乙醇(etha-
nol),三氯甲烷(chloroform),异丙醇(isopropanol),异戊醇(isoamylalcohol),SYBRGreenI核酸染料,
蛋白酶K,TaqDNA聚合酶,dNTP,通用引物ITS5和ITS4,实时荧光PCR引物PS-F和PS-R及Taq-
Man-MGB 探针PS-Pr。
3.2 材料
琼脂粉,V8汁,夏栎叶片或苹果或梨,鲜橙皮或杜鹃叶片。
3.3 培养基
PDA培养基,V8培养基,V8鲜橙皮培养基,V8杜鹃叶片培养基,选择性培......
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