| 标准编号 | GB/T 36780-2018 (GB/T36780-2018) | | 中文名称 | 辣椒轻斑驳病毒检疫鉴定方法 | | 英文名称 | Detection and identification of Pepper mild mottle virus | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 国际标准分类 | 65.020.01 | | 字数估计 | 22,216 | | 发布日期 | 2018-09-17 | | 实施日期 | 2019-04-01 | | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 36780-2018
Detection and identification of Pepper mild mottle virus
ICS 65.020.01
B16
中华人民共和国国家标准
辣椒轻斑驳病毒检疫鉴定方法
2018-09-17发布
2019-04-01实施
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
中国国家标准化管理委员会 发 布
目次
前言 Ⅰ
1 范围 1
2 规范性引用文件 1
3 病毒基本信息 1
4 原理 1
5 仪器、用具及试剂 1
5.1 仪器 1
5.2 用具 2
5.3 试剂 2
6 取样 2
6.1 种子取样 2
6.2 生长期植株取样 2
7 检测鉴定 3
7.1 双抗体夹心酶联免疫吸附测定 3
7.2 斑点酶联免疫吸附测定 3
7.3 胶体金免疫层析测定 3
7.4 RT-PCR检测 3
7.5 实时荧光RT-PCR检测 3
7.6 接种反应 3
8 结果判定 3
9 样品保存与结果记录 3
9.1 样品保存 3
9.2 结果记录 3
附录A(资料性附录) 辣椒轻斑驳病毒其他信息 4
附录B(规范性附录) 双抗体夹心酶联免疫吸附测定 6
附录C(规范性附录) 斑点酶联免疫吸附测定 9
附录D(规范性附录) 胶体金免疫层析测定 11
附录E(规范性附录) RT-PCR检测 13
附录F(规范性附录) 实时荧光RT-PCR检测 15
附录G(资料性附录) 种子感染水平和取样量 16
附录H (资料性附录) 接种反应 17
参考文献 19
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口。
本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共
和国甘肃出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:魏梅生、郭京泽、朱水芳、孔君、李桂芬、赵文军、王军平、文朝慧、尤佳。
辣椒轻斑驳病毒检疫鉴定方法
1 范围
本标准适用于寄主植株和未处理种子上辣椒轻斑驳病毒的检测。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 病毒基本信息
缩写:PMMoV
中文名:辣椒轻斑驳病毒
异名:烟草花叶病毒潜隐株系;烟草花叶病毒Samsun潜隐株系
分类地位:植物杆状病毒科(Virgaviridae),烟草花叶病毒属(Tobamovirus)
PMMoV的其他信息参见附录A。
4 原理
PMMoV的蛋白和基因组特征是该病毒检测鉴定的依据。采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定
(DAS-ELISA)、斑点酶联免疫吸附测定(Dot-ELISA)、胶体金免疫层析测定、RT-PCR、实时荧光
RT-PCR等方法来特异性检测该病毒,并判断样品是否带有PMMoV。
PMMoV的侵染性是该病毒生物学活性的重要指标。采用生物学接种的方法来判断病毒的活性。
5 仪器、用具及试剂
5.1 仪器
电子天平(感量0.001g)。
高速冷冻离心机(最大转速15000r/min)。
小型瞬时离心机(最大转速7000r/min)。
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