| 标准编号 | GB/T 40189-2021 (GB/T40189-2021) | | 中文名称 | | | 英文名称 | Determination of metronidazole and norfloxacin in toothpaste - High performance liquid chromatography method | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | Y43 | | 字数估计 | 6,642 | | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 40189-2021: 牙膏中甲硝唑和诺氟沙星的测定 高效液相色谱法
GB/T 40189-2021 英文名称: Determination of metronidazole and norfloxacin in toothpaste - High performance liquid chromatography method
1 范围
本标准规定了牙膏中禁用抗生素类药物甲硝唑和诺氟沙星含量的高效液相色谱(HPLC)测定
方法。
本标准适用于牙膏中禁用抗生素类药物甲硝唑和诺氟沙星含量的测定。
本标准方法检出限为1mg/kg。
2 规范性引用文件
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GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 原理
样品用提取液提取后,上清液经0.45μm滤膜过滤,用高效液相色谱-紫外检测法测定,保留时间定
性,外标峰面积法定量。
4 试剂和标准物质
除非另有说明,所有试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。
4.1 提取液:0.1%(体积分数)甲酸水溶液∶乙腈(95∶5,体积比)。
4.2 乙腈(流动相用):色谱纯。
4.3 磷酸:分析纯。
4.4 三乙胺:分析纯。
4.5 甲硝唑标准储备液:称取0.1g(精确至0.0002g)甲硝唑标准品到100mL容量瓶中,加提取液定
容至刻度线,甲硝唑质量浓度为1mg/mL,作为标准储备液备用。
4.6 诺氟沙星标准储备液:称取0.1g(精确至0.0002g)诺氟沙星标准品到100mL容量瓶中,加提取
液定容至刻度线,诺氟沙星质量浓度为1mg/mL,作为标准储备液备用。
4.7 混合标准溶液:分别移取甲硝唑和诺氟沙星标准储备液各10mL至100mL容量瓶中,加提取液
定容至刻度线。配制成质量浓度为100mg/L的甲硝唑、诺氟沙星混合标准溶液。经0.45μm滤膜过滤。
5 仪器和设备
5.1 高效液相色谱仪:配有二极管阵列检测器。
5.2 分析天平:感量为0.0001g。
5.3 pH计。
5.4 超声波清洗器。
5.5 高速离心机。
5.6 比色管:25mL。
6 试样制备
牙膏样品挤弃约20mm后,准确称取5g样品(精确至0.0001g)至25mL比色管中,加入提取液
(4.1)至刻度线,涡旋振荡2min,25℃以下水浴超声10min。静置后移取上清液10mL至10mL具塞
离心管,4000r/min离心10min,0.45μm滤膜过滤待测。
7 高效液相色谱测定
7.1 液相色谱参考条件
液相色谱参考条件如下:
a) 色谱柱:C18不锈钢柱(250mm×4.6mm×5μm)。
b) 检测波长:290nm。
c) 流动相:0.1%(体积分数)磷酸水溶液∶乙腈(83∶17,体积比)用三乙胺调节pH值到2.5~3.0。
d) 流速:1.0mL/min。
e) 柱温:30℃。
f) 进样量:10μL。
7.2 标准工作液制备
将100mg/L的混合标准储备溶液(4.7)用流动相液逐级稀释,配制成50mg/L、20mg/L、10mg/L、5mg/L的标准工作液。经0.45μm滤膜过滤备用。在设定色谱条件下,分别取10μL进行分析。以标准系列溶液的质量浓度为横坐标(mg/L)、对照品峰面积为纵坐标绘制校准曲线(线性相关系数R≥0.9990)。甲硝唑和诺氟沙星混合标准样品液相色谱图参见附录A中图A.1。
7.3 测定步骤
样品按照第6章的步骤处理完成后按照7.1的仪器条件进行上机检测,样品待测液中甲硝唑和诺
氟沙星的响应值应在标准曲线的线性范围内,超过线性范围则应稀释后再进样测定。
7.4 空白试验
除不加试样外,均按第6章的处理步骤和7.1的仪器条件进行检测。
8 结果计算
结果按式(1)计算,计算结果保留两位有效数字。
9 精密度
按本测定方法所确定的实验条件,在添加质量分数为5.0mg/kg~100.0mg/kg的范围内,回收率
在85.0%~110.......
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