SN/T 3847-2019 相关标准英文版PDF
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| SN/T 3847-2019 | 610 | SN/T 3847-2019 | 3秒自动 | 出口食品中苯二氮卓类药物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 |
| SN/T 3847-2014 | RFQ | 询价 | [PDF]天数 <=7 | 出口食品中苯二氮卓类药物的测定 液相色谱-质谱/质谱法 |
| 基本信息 | |
|---|---|
| 标准编号 | SN/T 3847-2019 (SN/T3847-2019) |
| 中文名称 | 出口食品中苯二氮卓类药物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 |
| 英文名称 | Determination of benzodiazepines residues in foodstuffs for export -- LC-MS/MS method |
| 行业 | 商检行业标准 (推荐) |
| 中标分类 | C53 |
| 国际标准分类 | 67.050 |
| 字数估计 | 24,270 |
| 发布日期 | 2019 |
| 实施日期 | 2020-07-01 |
| 发布机构 | 海关总署 |
SN/T 3847-2019: 出口食品中苯二氮卓类药物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法
SN/T 3847-2019 英文名称: Determination of benzodiazepines residues in foodstuffs for export -- LC-MS/MS method
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
代替 SN/T 3847- 2014、SN/T 2220- 2008
出口食品中苯二氮卓类药物残留量的测定 液相色谱 - 质谱/质谱法
中华人民共和国海关总署 发 布
1 范围
本标准规定了出口保健食品和动物源性食品中普拉西泮、去甲西泮、氯氮卓、替马西泮、三唑
仑、氯巴占、奥沙西泮、硝西泮、氟西泮、氯甲西泮、阿普唑仑、艾司唑仑、劳拉西泮、氯硝西泮、
氟硝西泮、地西泮、咪达唑仑、去烷基氟西泮、去甲基氟硝西泮、α- 羟基咪达唑仑、7- 氨基氟硝西
泮、2- 羟乙基氟西泮、α- 羟基阿普唑仑等苯二氮卓类药物的液相色谱 - 质谱/ 质谱检测方法。
本标准适用于保健食品（片剂、冲剂、胶囊、糖浆、口服液等剂型）中苯二氮卓类药物含量和动
物源性食品（猪肉、猪肝、鱼肉、鸡肉、鸡蛋、牛奶、蜂蜜、肠衣等）中苯二氮卓类药物残留量的测
定和确证。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 方法提要
保健食品试样中的苯二氮卓类药物用二氯甲烷 - 乙醚混合溶液提取，提取液经浓缩后，液相色
谱 - 串联质谱仪测定，内标法定量。
动物源性食品试样中的苯二氮卓类药物采用 β- 盐酸葡萄糖醛苷酶水解，在碱性条件下用乙酸乙
酯 - 异丙醇混合溶液提取，阳离子交换小柱净化后，液相色谱 - 串联质谱仪测定，内标法定量。
4 试剂和材料
除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为符合 GB/T 6682 规定的一级水。
4.1 甲醇：高效液相色谱级。
4.2 乙腈：高效液相色谱级。
4.3 甲酸：高效液相色谱级。
4.4 二氯甲烷：高效液相色谱级。
4.5 乙酸铵。
4.6 乙酸乙酯。
4.7 异丙醇。
4.8 乙醚。
4.9 冰乙酸。
4.10 无水硫酸钠：650 ℃ 灼烧 4 h，冷却后贮于密闭容器中备用。
4.11 硼砂（Na2B4O7·10H2O）。
4.12 氢氧化钠。
4.13 浓盐酸：浓度为 12 mol/L。
4.14 氨水：浓度为 28 %。
4.15 β- 盐酸葡萄糖醛苷酶溶液：活力≥ 100 000 units/mL。
4.16 乙酸铵缓冲溶液：0.02 mol/L，pH = 5.2。称取 1.54 g 乙酸铵（4.5）溶解于 900 mL 水中，用冰
乙酸（4.9）调节 pH 值到 5.2±0.1，最后用水稀释到 1 L，贮存于 4 ℃ 冰箱中，使用期为 1 个月。
4.17 2 mol/L 氢氧化钠溶液：称取 8 g 氢氧化钠（4.12）溶于 90 mL 水中，冷却至室温，用水定容至
100 mL。
4.18 硼砂 - 氢氧化钠缓冲液：称取 7.6 g 硼砂（4.11）溶解于 900 mL 水中，用 2 mol/L 氢氧化钠溶液（4.17）
调节 pH 值到 11.0±0.1，最后用水稀释到 1 L。
4.19 二氯甲烷 - 乙醚溶液：取 200 mL 二氯甲烷（4.4），加入 800 mL 乙醚（4.8），混匀。
4.20 乙酸乙酯 - 异丙醇溶液：取 1 000 mL 乙酸乙酯（4.6），加入 200 mL 异丙醇，混匀。
4.21 乙腈 - 水溶液：取 20 mL 乙腈（4.2），加入 80 mL 水，混匀。现配现用。
4.22 0.1 mol/L 盐酸溶液：准确量取 9 mL 浓盐酸（4.13），用水稀释到 1 L，摇匀后备用。
4.23 乙腈 - 氨水溶液：取 98 mL 乙腈（4.2），加入 2 mL 氨水（4.14），混匀。使用前配制。
4.24 2 mmol/L 乙酸铵溶液（含 0.2 % 甲酸）：准确称取 0.154g 乙酸铵（4.5），用适量水溶解，加入
2 mL 甲酸（4.3），用水稀释至 1 000 mL，混匀。
4.25 苯二氮卓类药物标准物质：标准物质信息见附录 A。标准物质均为 1.0 mg/mL 的甲醇（4.1）
溶液，同位素内标标准物质为 100.0 μg/mL 甲醇（4.1）溶液。
4.26 标准中间溶液：用乙腈（4.2）分别稀释标准物质溶液至终浓度约为 1.0 μg/mL 和 100.0 ng/mL，
低于 5℃ 保存，有效期为 6 个月。
4.27 同位素内标标准工作溶液：用乙腈（4.2）分别稀释同位素内标标准溶液至终浓度为 100.0 ng/mL，
低于 5 ℃ 保存，有效期为 6 个月。
4.28 标准工作液：根据需要，临用时吸取一定量的标准中间溶液（4.26）和同位素内标工作溶液
（4.27），用乙腈 - 水溶液（4.21）稀释配制成适当浓度的标准工作溶液（参考线性浓度范围为 1.0 ng/
mL 至 50.0 ng/mL），每毫升标准工作溶液含有同位素内标物质各 10.0 ng。现配现用。
4.29 混合阳离子交换小柱：3 mL，60 mg 或相当者，使用前用 5 mL 甲醇（4.1）和 5 mL 水活化。
4.30 微孔滤膜：0.22 μm，有机系。
5 仪器和设备
5.1 高效液相色谱 - 质谱/ 质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。
5.2 电子天平：感量为 0.01 g 和 0.1 mg。
5.3 超声波清洗器。
5.4 涡旋混合器。
5.5 恒温箱。
5.6 氮吹仪。
5.7 离心机：转速 5 000 r/min 以上。
5.8 组织捣碎机。
5.9 容量瓶：10 mL、50 mL、100 mL。
5.10 具塞塑料离心管：50 mL。
6 试样的制备与保存
6.1 胶囊、片剂、冲剂：取有代表性样品约 100 g，用碾钵碾碎（胶囊、片剂同时将糖衣和胶囊壳碾
碎），装入洁净容器内，密封并做好标识，于常温保存。
6.2 糖浆、口服液：取有代表性样品约 100 g，搅拌均匀后装入洁净容器内，密封并做好标识，于 4 ℃
冰箱内保存。
6.3 肌肉、内脏、肠衣、鸡蛋：取有代表性样品约 500 g，用组织捣碎机捣碎，装入洁净容器内，密
封并做好标识，于 -18 ℃ 冰箱内保存。
6.4 牛奶、蜂蜜：取有代表性样品约 500 g，搅拌均匀后装入洁净容器内，密封并做好标识，于 4 ℃
冰箱内保存。
7 测定步骤
7.1 提取
7.1.1 保健食品（胶囊、片剂、冲剂、糖浆、口服液）
准确称取2 g试样（精确到0.01 g）于50 mL具塞离心管中，加入10 mL硼砂-氢氧化钠缓冲液（4.18），
用 2 mol/L 的氢氧化钠溶液（4.17）调节 pH 值至 11.0 左右，添加 100.0 ng/mL 的同位素内标工作溶液（4.27）
100 μL 于待测样品中，加入 20 mL 二氯甲烷 - 乙醚溶液（4.19），加盖混匀后超声 10 min，涡旋振荡 5 min，
5 000 r/min 离心 5 min ；取上层有机相于 100 mL 旋蒸瓶中，再用 20 mL 二氯甲烷 - 乙醚溶液（4.19）重
复提取两次，合并提取液，在不高于 40 ℃ 下用氮吹仪吹干。加入 1.0 mL 乙腈 - 水溶液（4.21）振荡
溶解残渣，过 0.22 μm 微孔滤膜（4.30）后，滤液供高效液相色谱 - 质谱/ 质谱仪测定。
7.1.2 动物源性食品（猪肉、猪肝、鱼肉、鸡肉、鸡蛋、牛奶、蜂蜜、肠衣）
称取 5 g 试样（精确至 0.01 g）于 50 mL 塑料离心管中，加入 15.0 mL 乙酸铵缓冲溶液（4.16），
涡旋混合 2 min。添加 100.0 μL 同位素内标工作溶液（4.27）于待测样品中。加 25 μL 的 β- 盐酸葡萄
糖醛苷酶溶液（4.15），加盖后振荡 2 min，于恒温箱中在 37 ℃ 酶解 16 h。酶解后溶液用氨水（4.14）
调节 pH 值至 11.0 左右，用 15 mL 乙酸乙酯 - 异丙醇溶液（4.20）振荡提取 5 min，在 5 000 r/min 离
心 5 min，上清液过无水硫酸钠（4.10）于 250 mL 梨形瓶中，重复上述提取操作。合并提取液，在不
高于 40 ℃ 下用氮吹仪吹干。加入 5.0 mL 0.1 mol/L 的盐酸溶液（4.22）溶解残渣，待净化。
7.2 净化
转移待净化液（7.1.2）至活化后的混合阳离子交换小柱（4.29）的顶部，以 0.5 mL/min 流速过柱。
用5 mL水淋洗后，用8 mL乙腈 - 氨水溶液（4.23）洗脱，收集洗脱液，在不高于40 ℃下用氮吹仪吹干。
加入 1.0 mL 乙腈 - 水溶液（4.21）振荡溶解残渣后，过 0.22 μm 微孔滤膜（4.30），滤液供高效液相色谱 -
质谱/ 质谱仪测定。
7.3 测定
7.3.1 液相色谱 - 质谱/ 质谱条件
7.3.1.1 色谱柱：C18，150 mm×2.0 mm（内径），粒径 5.0 μm 或性能相当者。
7.3.1.2 流动相：乙腈（4.2）、2 mmol/L 乙酸铵溶液（含 0.2 % 甲酸）（4.24），梯度洗脱程序参见附录 B
中的 B.1。
7.3.1.3 流速：0.30 mL/min。
7.3.1.4 柱温：40 ℃。
7.3.1.5 进样量：30 μL。
7.3.1.6 离子源：电喷雾离子源。
7.3.1.7 扫描方式：正离子扫描。
7.3.1.8 检测方式：多反应监测模式（MRM）。
7.3.1.9 质谱/ 质谱参考条件：参见附录 B 中的 B.2。
7.3.2 定性测定
在相同实验条件下，样液与标准工作液中待测物质的质量色谱峰相对保留时间在 2.5 % 以内，并且
在扣除背景后的样液谱图中，所选择的离子对均出现，同时与标准品的相对离子丰度允许偏差不超过
表 1 规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。在 7.3.1 条件下，待测药物的参考保留时间分别
约为：7- 氨基氟硝西泮（8.8 min）、氯氮卓（9.4 min）、咪达唑仑（10.1 min）、氟西泮（10.2 min）、
α- 羟基咪达唑仑（10.5 min）、α- 羟基阿普唑仑（12.7 min）、去甲基氟硝西泮（12.9 min）、硝西泮
（13.0 min）、奥沙西泮（13.1 min）、艾司唑仑（13.2 min）、劳拉西泮（13.4 min）、氯硝西泮（13.5 min）、
2- 羟乙基氟西泮（13.5 min）、阿普唑仑（13.7 min）、三唑仑（13.9 min）、去烷基氟西泮（14.1 min）、
去甲西泮（14.2 min）、氟硝西泮（14.2 min）、替马......