SN/T 5121-2019 相关标准英文版PDF
| 标准号码 | 价格美元 | 第2步(购买) | 交付天数 | 标准名称 |
| SN/T 5121-2019 | 239 | SN/T 5121-2019 | [PDF]天数 <=3 | 进出口食用动物、饲料中伊维菌素残留测定 液相色谱-质谱/质谱法 |
| 基本信息 | |
|---|---|
| 标准编号 | SN/T 5121-2019 (SN/T5121-2019) |
| 中文名称 | 进出口食用动物、饲料中伊维菌素残留测定 液相色谱-质谱/质谱法 |
| 英文名称 | Determination of Ivermectin residue in live animal and feed for import and export - LC-MS/MS method |
| 行业 | 商检行业标准 (推荐) |
| 中标分类 | B40 |
| 国际标准分类 | |
| 字数估计 | 11,138 |
| 发布日期 | 2019-09-03 |
| 实施日期 | 2020-03-01 |
| 标准依据 | 海关总署公告2019年第142号 |
| 发布机构 | 海关总署 |
SN/T 5121-2019: 进出口食用动物、饲料中伊维菌素残留测定 液相色谱-质谱/质谱法
SN/T 5121-2019 英文名称: Determination of Ivermectin residue in live animal and feed for import and export - LC-MS/MS method
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
进出口食用动物、饲料中伊维菌素残留测定
液相色谱-质谱／质谱法
中华人民共和国海关总署 发 布
前言
本标准是照按GB/T １．１-２００９起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布
机构不承担识别这些专利的责任。
本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国重庆海关。
本标准主要起草人：李光满、夏明星、陈宗祥、唐璜、王安良、郑小玲、熊英、周树予、李应国。
进出口食用动物、饲料中伊维菌素残留测定
液相色谱-质谱／质谱法
１ 范围
本标准规定了进出口食用动物、饲料中伊维菌素残留测定 液相色谱-质谱／质谱法。
本标准适用于进出口食用动物（如猪、牛、羊、兔、鸡、鸭）血液以及动物饲料中伊维菌素的测定和
确证。
２ 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本
文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T ６６８２分析实验室用水规格和试验方法
３ 原理
试样经乙腈涡旋振荡提取后，液相色谱-质谱／质谱法检测和确证，内标峰面积法定量。
４ 试剂材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T ６６８２规定的一级水。
４．１ 乙腈：高效液相色谱级。
４．２ 甲酸。
４．３ 乙酸铵。
４．４ 氯化钠。
４．５ ５ｍｍｏｌ／Ｌ乙酸铵＋０．１％甲酸水溶液：称取０．３８５ｇ乙酸铵于烧杯中，用水溶解，转移至１０００ｍＬ
容量瓶中，用水洗涤烧杯至少３次，直至洗净，并将洗液全部转移至１０００容量瓶中，再加入１ｍＬ甲酸
于１０００ｍＬ容量瓶中，用水定容。
４．６ 标准物质：伊维菌素（Ｉｖｅｒｍｅｔｉｎｅ，ＣＡＳ号：７０２８８-８６-７），纯度均大于９６％；伊维菌素同位素内标
（Ｉｖｅｒｍｅｔｉｎ-ｄ２），纯度大于９８％。
４．７ 标准储备液：准确称取伊维菌素标准品０．１ｇ（精确到０．０００１ｇ），用乙腈（４．１）充分溶解，稀释定容
于１００ｍＬ容量瓶中，配制成浓度为１ｍｇ／ｍＬ的标准储备液；另将伊维菌素同位素内标标准品１０ｍｇ，
用乙腈（４．１）充分溶解，稀释定容于１０ｍＬ容量瓶中，配制成浓度为１ｍｇ／ｍＬ的伊维菌素同位素内标
标准储备液，最后分别将定容后的标准储备液倒入棕色试剂瓶中，-１８℃以下避光保存。
４．８ 标准中间储备液：准确移取１００μＬ伊维菌素标准储备液（４．７）和１００μＬ伊维菌素内标标准储备液（４．７）于两个１００ｍＬ容量瓶中，用乙腈稀释定容，分别配成１μ／ｍＬ的伊维菌素标准中间储备液和１μｇ／ｍＬ伊维菌素同位素内标标准中间储备液，溶液置于棕色试剂瓶中，-１８℃以下避光保存。４．９ 含内标的标准工作液：根据需要用乙腈（４．１）将伊维菌素标准中间储备液（４．８）稀释成合适的浓度
的混合标准工作曲线溶液，同时每个标液里面添加等量伊维菌素同位素内标标准中间储备液标准中间
储备液（４．８），每个标液中伊维菌素同位素内标浓度为２０μｇ／Ｌ，伊维菌素浓度参考线性浓度范围为５μｇ／Ｌ～５０μｇ／Ｌ，临用时现配。４．１０ 基质标准工作液：选择不含伊维菌素的样品５份，按照本标准７．１进行处理至“取上清液５ｍＬ氮
气吹干”（不用添加伊维菌素内标），分别加入１ｍＬ不同浓度含内标的标准工作液（４．９），超声溶解残
渣，过０．２２μｍ滤膜（４．１１）后，配置成基质标准工作液，临用时现配。４．１１ 微孔滤膜：有机系，０．２２μｍ。
５ 仪器与设备
５．１ 液相色谱-质谱／质谱仪：配电喷雾离子源（ＥＳＩ）。
５． 天平：感量为０．０００１ｇ和０．０１ｍｇ。
５．３ 冷冻离心机：转速不低于８０００ｒ／ｍｉｎ。
５．４ 旋涡混匀器。
５．５ 超声波清洗器。
５．６ 氮吹仪。
６ 试样制备与保存
６．１ 试样制备
６．１．１ 饲料：从所取样品中取出具有代表性样品适量，磨碎混匀后，装入洁净的塑料袋中，样品数量
１５ｇ，密封，并标记。
６．１．２ 血液：动物血液用肝素钠抗凝采血管收集，样品数量１５ｍＬ，密封，并标记。
６．２ 试样保存
饲料常温保存，待检血液试样于４℃保存，留存血液试样于-１８℃冷冻保存。
７ 分析步骤
７．１ 提取
７．１．１ 血液
称取２．０ｇ（精确到０．０１ｇ）试样和０．５ｇ氯化钠（４．４）于５０ｍＬ离心管中，加入４０μＬ的伊维菌素同位素内标中间储备液（４．８，相当于伊维菌素同位素内标质量为４ｎｇ）、３ｍＬ水和１０ｍＬ乙腈（４．１），旋涡
混匀２ｍｉｎ，振荡提取３０ｍｉｎ，以８０００ｒ／ｍｉｎ在１０℃以下条件冷冻离心５ｍｉｎ，取上清液５ｍＬ氮气吹
干，加入１．０ｍＬ乙腈（４．１），超声溶解残渣，过０．２２μｍ滤膜（４．１１）后，供液相色谱-质谱／质谱仪测定和确证。
７．１．２ 饲料
称取２．０ｇ（精确到０．０１ｇ）试样和３．０ｇ氯化钠（４．４）于５０ｍＬ离心管中，加入４０μＬ的伊维菌素同位素内标中间储备液（４．８，相当于伊维菌素同位素内标质量为４ｎｇ）、７．５ｍＬ水和１０ｍＬ乙腈（４．１），旋
涡混匀２ｍｉｎ，振荡提取３０ｍｉｎ，以８０００ｒ／ｍｉｎ在１０℃以下条件冷冻离心５ｍｉｎ，取上清液５ｍＬ氮气
吹干，加入１．０ｍＬ乙腈（４．１），超声溶解残渣，过０．２２μｍ滤膜（４．１１）后，供液相色谱-质谱／质谱仪测定和确证。
７．２ 测定和确证
７．２．１ 液相色谱-质谱／质谱参考条件
７．２．１．１ 液相色谱参考条件
参考条件如下：
ａ） 色谱柱：Ｃ１８柱，１００ｍｍ×４．６ｍｍ（内径），２．６μｍ，或相当者。
ｂ） 流动相：Ａ：５ｍｍｏｌ／Ｌ乙酸铵＋０．１％甲酸水溶液（４．５）；Ｂ：乙腈（４．１），梯度洗脱程序见表１。
ｃ） 流速：０．４ｍＬ／ｍｉｎ。
ｃ） 柱温：３０℃。
ｄ） 进样量：２０μＬ。
７．２．１．２ 质谱参考条件
参考条件如下：
ａ） 离子源：电喷雾离子源（ＥＳＩ）；
ｂ） 扫描方式：正离子；
ｃ） 监测方式：多反应监测（ＭＲＭ）；
ｄ） 雾化气（ＯＳ１）、气帘气（ＣＵＲ）、辅助气（ＧＳ２）、碰撞气（ＣＡＤ）均为高纯氮气或其他合适气体；使
用前应设置各气体流量、离子源温度以及电喷雾电压到合适值，使质谱灵敏度达到检测要求，
详细条件参见附录Ａ；
ｅ） 去簇电压（ＤＰ）、碰撞室入口电压（ＥＰ）、碰撞电压（ＣＥ）、碰撞室出口电压（ＣＸＰ）应优化至最佳
条件，监测离子和定量离子等详细信息条件参见附录Ａ。
７．２．２ 定量测定
根据试样中待测物的含量情况，配制响应值适宜的基质标准工作液进行色谱分析，基质标准工作液
应有５个浓度水平。基质标准工作液和待测液中伊维菌素的响应值应在仪器线性响应范围内。如果样
品中待测物含量超过标准曲线的线性范围，应用乙腈（４．１）稀释至合适浓度后分析。在上述色谱条件下
伊维菌素参考保留时间为７．６０ｍｉｎ，伊维菌素标准溶液的多反应监测（ＭＲＭ）色谱图参见图Ｂ．１。
７．２．３ 定性分析
按照液相色谱-质谱／质谱条件测定试样和基质标准工作液，如果试样中待测物质的保留时间与标
准品一致，保留时间偏差在５％之内；定性离子对的相对丰度是用相对于最强离子丰度的强度百分比表
示，应当与浓度相当标准工作溶液的相对丰度一致，相对丰度允许偏差不超过表２规定的范围，则可判
断试样中存在对应的待测物。
７．３ 空白试验
除不加试样外，均按上述操作步骤进行。
８ 结果计算和表达
用仪器软件处理数据或按内标法绘制标准曲线，以各基质标准工作液与内标物溶液色谱峰面积比
值为横坐标，以各基质标准工作液与内标物溶液浓度比值为纵坐标绘制标准曲线，将样液中分析物与内
标物峰面积比值代入曲线方程，计算出样液中分析物与内标物浓度比值，因内标物浓度已知，进而得出
样液中分析物浓度Ｃ，代入公式（１）中，计算结果须扣除空白值：......