| 标准编号 | BJS 202204-2022 (BJS202204-2022) | | 中文名称 | 豆制品中碱性嫩黄等11种工业染料的测定 | | 英文名称 | Determination of 11 industrial dyes including auramine O in soybean products | | 行业 | Chinese Industry Standard | | 字数估计 | 11,181 | BJS 202204-2022: 豆制品中碱性嫩黄等11种工业染料的测定
书食 品 补 充 检 验 方 法
BJS２０２２０４
豆制品中碱性嫩黄等１１种工业染料的测定
２０２２-０２-０７发布
国家市场监督管理总局 发 布
书豆制品中碱性嫩黄等１１种工业染料的测定
１ 范围
本方法规定了豆制品中分散橙１１、分散橙１、分散橙３、分散橙３７、分散黄３、二甲基黄、二乙基黄、碱
性橙２２、碱性橙２１、碱性嫩黄、苏丹橙Ｇ的高效液相色谱-串联质谱测定方法。
本方法适用于豆腐、豆皮、腐竹、油豆皮、油豆腐中分散橙１１、分散橙１、分散橙３、分散橙３７、分散黄
３、二甲基黄、二乙基黄、碱性橙２２、碱性橙２１、碱性嫩黄、苏丹橙Ｇ的定性确证和定量测定。
２ 原理
样品中的碱性嫩黄等１１种染料，经过乙腈提取、离心，上清液经分散固相萃取净化，高效液相色谱-
串联质谱仪检测，外标法定量。
３ 试剂和材料
除另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T ６６８２规定的一级水。
３．１ 试剂
３．１．１ 乙腈（ＣＨ３ＣＮ）：色谱纯。
３．１．２ 乙酸铵（ＣＨ３ＣＯＯＮＨ４）：色谱纯。
３．１．３ 甲酸（ＨＣＯＯＨ）：优级纯。
３．１．４ 无水硫酸钠（Ｎａ２ＳＯ４）。
３．２ 试剂配制
０．１％甲酸水溶液（含５ｍｍｏｌ／Ｌ乙酸铵）：称取０．３８５ｇ乙酸铵（３．１．２），加入适量水溶解，再加入
１ｍＬ甲酸（３．１．３），用水定容至１０００ｍＬ。
３．３ 标准品
分散橙１１、分散橙１、分散橙３、分散橙３７、分散黄３、二甲基黄、二乙基黄、碱性橙２２、碱性橙２１、碱
性嫩黄、苏丹橙Ｇ标准品的中文名称、英文名称、ＣＡＳ号、分子式、相对分子质量详见附录Ａ中表Ａ．１，
纯度均≥９０％。
３．４ 标准溶液配制
３．４．１ 标准品储备液（１ｍｇ／ｍＬ）：准确称取标准品（３．３）１０ｍｇ（精确至０．０１ｍｇ），用乙腈（３．１．１）溶解定
容至１０ｍＬ，配制成质量浓度为１ｍｇ／ｍＬ的标准品储备液，０℃～４℃保存，有效期３个月。
注：在配制标准品储备液时，要注意将标准品纯度折算进储备液浓度中。
３．４．２ 混合标准中间溶液（５０ｎｇ／ｍＬ）：分别准确移取各组分的标准品储备液（３．４．１）０．０５ｍＬ，置于同
一１００ｍＬ容量瓶中，用乙腈（３．１．１）溶解，摇匀并定容。精密吸取上述混合标准溶液１．０ｍＬ置于
１０ｍＬ量瓶中，乙腈（３．１．１）定容至刻度，摇匀，配制成质量浓度为５０ｎｇ／ｍＬ的混合标准中间溶液。
BJS２０２２０４
０℃～４℃ 避光保存，可保存１周。
３．４．３ 混合标准工作溶液：取５ｍＬ容量瓶６个，分别依次加入混合标准中间溶液（５０ｎｇ／ｍＬ）（３．４．２）
０ｍＬ、０．０２ｍＬ、０．０５ｍＬ、０．１０ｍＬ、０．５ｍＬ、１．０ｍＬ，用空白样品提取液（５．３）稀释并定容至刻度，余下
操作同５．２．２，制备成系列标准工作溶液，溶液中各组分质量浓度分别为０ｎｇ／ｍＬ、０．２ｎｇ／ｍＬ、０．５ｎｇ／ｍＬ、
１．０ｎｇ／ｍＬ、５．０ｎｇ／ｍＬ、１０．０ｎｇ／ｍＬ。临用现配。
３．５ 材料
３．５．１ N-丙基乙二胺（ＰＳＡ）：４０μｍ～１００μｍ。
３．５．２ 十八烷基硅烷键合硅胶（Ｃ１８）：４０μｍ～１００μｍ。
３．５．３ ＱｕＥＣｈＥＲＳ净化粉末：每份含ＰＳＡ（３．５．１）５０ｍｇ、Ｃ１８（３．５．２）５０ｍｇ、ＭｇＳＯ４１００ｍｇ。
３．５．４ 微孔滤膜（ＰＶＤＦ）：０．２２μｍ，水相。
４ 仪器和设备
４．１ 高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪：配有电喷雾离子源（ＥＳＩ）。
４．２ 分析天平：感量为０．０１ｍｇ和０．００１ｇ。
４．３ 涡漩振荡器。
４．４ 超声波提取器。
４．５ 离心机：≥８０００ｒ／ｍｉｎ。
５ 分析步骤
５．１ 试样制备与保存
取有代表性样品约５００ｇ，粉碎均匀后装入洁净容器内密封并做好标识，于０℃～４℃下保存。
注：豆腐基质试样需在３天内进行检验。
５．２ 样品前处理
５．２．１ 提取
准确称取样品１ｇ（精确至０．００１ｇ）置于１５ｍＬ具塞离心管中，加无水硫酸钠（３．１．４）２ｇ，准确加入
５ｍＬ乙腈（３．１．１），涡漩混匀１ｍｉｎ，超声２０ｍｉｎ（超声１０ｍｉｎ时取出涡漩混匀１ｍｉｎ），冷却至室温后，
８０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，取上清液净化。
５．２．２ 净化
取上述上清液１．５ｍＬ，置于内含１份ＱｕＥＣｈＥＲＳ净化粉末（３．５．３）的离心管中，涡漩振荡１ｍｉｎ，
８０００ｒ／ｍｉｎ离心５ｍｉｎ，取上清液过０．２２μｍ微孔滤膜（３．５．４），供高效液相色谱-串联质谱仪测定。
５．３ 空白样品提取液的制备
分别准确称取与试样基质相同或相近的阴性样品１ｇ（精确至０．００１ｇ）共６份，按试样同法（５．２．１）
制备，上清液作为空白样品提取液，用于混合标准工作溶液（３．４．３）制备。
BJS２０２２０４
５．４ 仪器参考条件
５．４．１ 高效液相色谱参考条件
高效液相色谱参考条件如下：
ａ） 色谱柱：ＫｉｎｅｔｅｘＸＢ-Ｃ１８ ２．１ｍｍ×１００ｍｍ １．７μｍ，或性能相当者；
ｂ） 流动相：Ａ相为０．１％甲酸水溶液（含５ｍｍｏｌ／Ｌ乙酸铵）（３．２．１），Ｂ相为乙腈（３．１．１），梯度洗脱
程序见表１；
ｃ） 流速：０．２ｍＬ／ｍｉｎ；
表１ 梯度洗脱程序
时间／ｍｉｎ Ａ／％ Ｂ／％
０．００ ８０ ２０
４ ５０ ５０
５ ３０ ７０
８ ５ ９５
１５ ５ ９５
１６ ８０ ２０
２０ ８０ ２０
ｄ） 柱温：３０℃；
ｅ） 进样体积：５μＬ。
５．４．２ 质谱参考条件
质谱参考条件如下：
ａ） 离子源：电喷雾离子源（ＥＳＩ）；
ｂ） 扫描方式：正离子扫描；
ｃ） 检测方式：多反应监测（ＭＲＭ）。
其他质谱参考条件见附录Ｂ中表Ｂ．１。
５．５ 标准曲线的制作
将混合标准工作溶液分别注入高效液相色谱-串联质谱仪中，测定相应的峰面积，以混合标准工作
溶液中各组分的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得到线性方程。
５．６ 试样溶液的测定
５．６．１ 定性测定
将混合标准工作溶液（３．４．３）和试样溶液（５．２．２）注入高效液相色谱-串联质谱仪中，记录混合标准
工作溶液和试样溶液中各化合物的保留时间，在相同条件下，试样溶液与标准溶液中待测组分的质量色
谱峰相对保留时间偏差在±２．５％以内，且其定性离子与浓度相当的标准溶液中相应的定性离子相对丰
度相比，偏差不超过表２规定的范围，则可判定试样中检出对应的被测化合物。标准溶液典型图谱见附
BJS２０２２０４
录Ｃ中图Ｃ．１。
表２ 相对离子丰度的最大允许偏差
相对离子丰度犽／％ 犽＞５０ ５０≥犽＞２０ ２０≥犽＞１０ 犽≤１０
允许的相对偏差／％ ±２０ ±２５ ±３０ ±５０
５．６．２ 定量测定
将混合标准工作溶液（３．４．３）和试样溶液（５．２．２）注入高效液相色谱-串联质谱仪中，用标准曲线计
算试样溶液中各待测组分浓度。试样溶液中各待测组分的响应值应在线性范围内，若超出线性范围，应
减少试样称样量重新检测。
６ 结果计算
试样中各目标化合物含量按式（１）计算：
式中：
X ---试样中目标化合物含量，单位为微克每千克（μｇ／ｋｇ）；
ρ ---由标准工作曲线得到的试样溶液中目标化合物的质量浓度，单位为纳克每毫升（ｎｇ／ｍＬ）；
犞 ---试样定容体积，单位为毫升（ｍＬ）；
以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，计算结果保留２位有效数字。
７ 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的２０％。
８ 其他
当样品称样量为１ｇ，定容体积为５ｍＬ时，本方法检出限和定量限如下：
碱性橙２１、分散黄３、碱性嫩黄、二乙基黄、分散橙３、分散橙３７、碱性橙２２、分散橙１、苏丹橙Ｇ、二
甲基黄和分散橙１１检出限为１．０μｇ／ｋｇ，定量限为２．０μｇ／ｋｇ。
BJS２０２２０４
附 录 A
（资料性）
标准品的中文名称、英文名称、CAS号、分子式和相对分子质量
标准品的中文名称、英文名称、ＣＡＳ号、分子式和相对分子质量见表Ａ．１。
表A．１ 标准品的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量
序号 化合物名称 英文名称 ＣＡＳ号 分子式 相对分子质量
１ 苏丹橙Ｇ ＳｕｄａｎＯｒａｎｇｅＧ ２０５１-８５-６ Ｃ１２Ｈ１０Ｎ２Ｏ２ ２１４．２２
２ 二甲基黄 Ｍｅｔｈｙｌｙｅｌｏｗ ６０-１１-７ Ｃ１４Ｈ１５Ｎ３ ２２５．２９
３ 分散橙１１ ＤｉｓｐｅｒｓｅＯｒａｎｇｅ１１ ８２-２８-０ Ｃ１５Ｈ１１ＮＯ２ ２３７．２５
４ 分散橙３ ＤｉｓｐｅｒｓｅＯｒａｎｇｅ３ ７３０-４０-５ Ｃ１２Ｈ１０Ｎ４Ｏ２ ２４２．２３
５ 二乙基黄 Ｅｔｈｙｌｙｅｌｏｗ ２４８１-９４-９ Ｃ１６Ｈ１９Ｎ３ ２５３．３４
６ 碱性嫩黄 ＡｕｒａｍｉｎｅＯ ２４６５-２７-２ Ｃ１７Ｈ２２Ｎ３Ｃｌ ３０３．８４
７ 分散黄３ Ｄｉｓｐｅｒｓｅｙｅｌｏｗ３ ２８３２-４０-８ Ｃ１５Ｈ１５Ｎ３Ｏ２ ２６９．３０
８ 碱性橙２１ ＢａｓｉｃＯｒａｎｇｅ２１ ３０５６-９３-７ Ｃ２２Ｈ２３ＣｌＮ２ ３５０．８８
９ 分散橙１ ＤｉｓｐｅｒｓｅＯｒａｎｇｅ１ ２５８１-６９-３ Ｃ１８Ｈ１４Ｎ４Ｏ２ ３１８．３３
１０ 碱性橙２２ ＢａｓｉｃＯｒａｎｇｅ２２ ４６５７-００-５ Ｃ２８Ｈ２７ＣｌＮ２ ４２６．９８
１１ 分散橙３７ ＤｉｓｐｅｒｓｅＯｒａｎｇｅ３７ １３３０１-６１-６ Ｃ１７Ｈ１５Ｃｌ２Ｎ５Ｏ２ ３９２．２４
BJS２０２２０４
附 录 B
（资料性）
质谱参考条件
质谱参考条件如下：
ａ） 毛细管电压：３ｋＶ；
ｂ） 脱溶剂气温度：５００℃；
ｃ） 鞘气流速：８００Ｌ／ｈ；
ｄ） 辅助气流速：１５０Ｌ／ｈ；
ｅ） 定量离子对、定性离子对、碰撞能量和锥孔电压见表Ｂ．１。
表B．１ 多反应监测（MRM）条件
苏丹橙Ｇ ＋ ２１５．０ ９３．２
ａ ３１ ３０
１９８．１ １５ ３０
二甲基黄 ＋ ２２６．０ ７７．２
ａ ２１ ３０
１２０．１ ３０ ３０
分散橙１１ ＋ ２３８．０ １６４．７
ａ ３５ ３０
１８１．４ ３０ ３０
分散橙３ ＋ ２４３．０ １２２．１
ａ １７ ３０
７５．３ １５ ３０
二乙基黄 ＋ ２５４．２ ７７．１
ａ ２０ ３０
１３４．１ ２２ ３０
碱性嫩黄 ＋ ２６８．０ １４７．１
ａ ２８ ３０
１０７．２ ３２ ３０
分散黄３ ＋ ２７０．０ １０７．０
ａ ２６ ３０
１５０．０ １６ ３０
碱性橙２１ ＋ ３１５．２ ２７０．０
ａ ２３ ３０
３００．０ ３９ ３０
分散橙１ ＋ ３１９．２ １６９．１
ａ ２２ ３０
１２２．０ ２０ ３０
碱性橙２２......
|