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| 标准编号 | GB 1886.229-2016 (GB1886.229-2016) | | 中文名称 | 食品安全国家标准 食品添加剂 硫酸铝钾(又名钾明矾) | | 英文名称 | Food additive -- Aluminum potassium sulfate | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | X42 | | 字数估计 | 16,128 | | 发布日期 | 2016-08-31 | | 实施日期 | 2017-01-01 | | 旧标准 (被替代) | GB 1895-2004 | | 标准依据 | 国家卫生和计划生育委员会公告2016年第11号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会、国家食品药品监督管理总局 | GB 1886.229-2016
(Food safety national standard - Food additive - Potassium aluminum sulfate (also known as potassium alum))
中华人民共和国国家标准
GB 1886.231-2016
食品安全国家标准
食品添加剂 乳酸链球菌素
2016-08-31发布
2017-01-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家卫生和计划生育委员会 发 布
GB 1886.231-2016
食品安全国家标准
食品添加剂 乳酸链球菌素
1 范围
酸链球菌素。
2 分子式、结构式和相对分子质量
2.1 分子式
2.2 结构式
NisnA:第27位氨基酸为组氨酸(His);NisnZ:第27位氨基酸为天冬酰胺(Asn)
2.3 相对分子质量
NisinA:3354.35(按2013年国际相对原子质量)
NisinZ:3330.31(按2013年国际相对原子质量)
3 技术要求
3.1 感官要求
感官要求应符合表1的规定。
GB 1886.231-2016
表1 感官要求
项目 要求 检验方法
色泽 浅棕色至乳白色
状态 粉末
将适量试样均匀置于白瓷盘内,在自然光线下观察其色泽
和状态
3.2 理化指标
理化指标应符合表2的规定。
表2 理化指标
项 目 指 标 检验方法
效价/(IU/mg) ≥ 900 附录A中的A.3
干燥减量,w/% ≤ 3.0 GB 5009.3
氯化钠,w/% ≥ 50.0 GB/T 5009.42
铅(Pb)/(mg/kg) ≤ 1.0 GB 5009.75
注:商品化的乳酸链球菌素产品应以符合本标准的乳酸链球菌素为原料,可添加氯化钠、乳固体等辅料而制成,
其效价符合声称。
3.3 微生物指标
微生物指标应符合表3的规定。
表3 微生物指标
项 目 指 标 检验方法
菌落总数/(CFU/g) ≤ 10 GB 4789.2
大肠菌群/(MPN/g) < 3.0 GB 4789.3
大肠埃希氏菌/(MPN/g) < 3.0 GB 4789.38
沙门氏菌 不得检出 GB 4789.4
GB 1886.231-2016
附 录 A
检 验 方 法
A.1 一般规定
本标准除另有规定外,所用试剂的纯度应为分析纯,所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂
及制品,应按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的规定制备,试验用水应符合GB/T 6682中三级水的规
定。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时,均指水溶液。
A.2 鉴别试验
A.2.1 试剂和材料
A.2.1.1 盐酸溶液:0.02mol/L。
A.2.1.2 氢氧化钠溶液:5mol/L。
A.2.1.3 脱脂牛奶:脂肪含量< 1%。
A.2.1.4 石蕊牛奶培养基。
A.2.1.5 检测菌:乳酸乳球菌(ATCC11454,NCIMB8586)。
A.2.2 分析步骤
A.2.2.1 试样储备液制备
取1g试样,溶于1L盐酸溶液中,溶液效价约为1000IU/mL。
A.2.2.2 对酸溶液的稳定性试验
用盐酸溶液将试样储备液稀释至约50IU/mL,制成试样溶液。将该试样溶液煮沸5min,按效价
测定方法测煮沸过的试样溶液中Nisin效价。计算煮沸过的试样中Nisin的效价,计算结果在其效价值
的(100%±5%)内,表明无显著活性损失。
A.2.2.3 对碱溶液的稳定性试验
用盐酸溶液将试样储备液稀释至约50IU/mL,制成试样溶液。将该试样溶液煮沸5min,用氢氧
化钠溶液调pH至11.0将溶液加热到65℃保持30min,冷却。然后滴加盐酸调pH至2.0,用效价测定
方法测定最终溶液中Nisin的效价。在按照上述操作处理后会出现抑菌活性的几乎完全损失。
A.2.2.4 不同抑菌物质中Nisin的鉴别
A.2.2.4.1 乳酸乳球菌的培养:乳酸乳球菌(工作菌株)(ATCC11454,NCIMB8586)在无菌脱脂牛奶中
培养,30℃培养18h。
A.2.2.4.2 准备1个或多个装有100mL石蕊牛奶培养基的长颈烧瓶,在121℃灭菌15min,将0.1g
试样加入该无菌的石蕊牛奶培养基中混匀,在室温下静置2h后加入0.1mL检测菌,30℃下培养
24h。
A.2.2.4.3 检测菌(乳酸乳球菌)可在该效价的试样(约1000IU/mL)中生长,但不能在相似浓度的其
他抑菌物质中生长。
GB 1886.231-2016
A.3 效价的测定
A.3.1 试剂和材料
A.3.1.1 乳酸链球菌素标准品(效价:1×106IU/g)。
A.3.1.2 盐酸溶液:0.02mol/L。
A.3.1.3 吐温溶液:吐温20∶水=1∶1。
A.3.1.4 培养基(S1):胰蛋白胨0.8%;酵母膏0.5%;葡萄糖0.5%;氯化钠0.5%;磷酸氢二钠0.2%;琼
脂粉1.2%~1.5%,灭菌后pH6.8~7.0。
A.3.1.5 检测菌:黄色微球菌(NCIB8166)。
A.3.2 分析步骤
A.3.2.1 检测菌(NCIB8166)的培养及菌悬液的制备
A.3.2.1.1 检测菌的培养
用无菌接种环从甘油管或冻干管中取一环检测菌(NCIB8166),接种在无菌的S1 平皿上,进行自然
分离,挑出饱满、边缘光滑的菌落,扩大,接在S1 的试管斜面上,在30℃恒温箱中培养24h,放入2℃~
5℃冰箱中。
A.3.2.1.2 菌株悬浮液的制备
取在冰箱中的检测菌(NCIB8166),用无菌生理盐水洗脱下来,制成108CFU/mL浓度的细胞悬液,
备用。
A.3.2.2 平板的制备
配制S1 培养基200mL(按比例先把琼脂溶化,依次加入各组分溶解,磷酸氢二钠溶解后加入),经
121℃、20min灭菌后,放冷至70℃左右,加入4mL吐温20溶液,充分摇匀,等冷却到50℃~55℃左
右,加入已制备好的菌株悬浮液适量,使培养基中检测菌的最终浓度为1.0×106个/mL,摇匀,倒入水平
放置的已灭菌的平板中,等完全凝固后,用直径为7mm打孔器,在平板上打出所需的孔数,小心挖掉孔
内琼脂,移入洁净工作台中吹风1.5h~3.0h(吹风时间按空气中的湿度大小而定,同时控制室内温度最
低,尽量不要让检测菌生长),吹干后,置2℃~5℃冰箱中,到次日使用。
A.3.2.3 标准品溶液的制备
准确称取乳酸链球菌素标准品(精确到0.0001g),溶于盐酸溶液中,使最终浓度为2mg/mL
(2000IU/mL),摇匀,用盐酸稀释成300倍、600倍,即成高、低剂量标准溶液。
A.3.2.4 试样溶液的制备
称取一定量的试样(精确到0.0001g),用盐酸溶液溶解后,稀释成高、低剂量试样溶液,其乳酸链
球菌素含量,按估计单位高、低剂量与标准品溶液大致相当。
A.3.2.5 滴加溶液
取出存放在冰箱中的平板,用移液器,取70μL~80μL标准品高剂量溶液,随机滴加在平板的孔
中,滴6个孔,再取70μL~80μL标准品低剂量溶液,随机滴加在与高剂量溶液同一平板其余孔的6个
GB 1886.231-2016
孔中。
试样溶液和标准品溶液滴在同一平板上,其操作同标准品。
A.3.2.6 恒温培养
等孔内的溶液渗透完全后,移入30℃恒温箱中培养16h~24h后,测量抑菌圈直径。
A.3.3 结果计算
用卡尺测量抑菌圈直径,取其平均值,按式(A.1)计算效价:
CSH=CBH×k
(XSH+XSL)-(XBH+XBL)
(XSH+XBH)-(XSL+XBL) (A.1)
式中:
CSH ---试样溶液的效价,单位为国际单位每毫克(IU/mg);
CBH ---标准溶液的效价,单位为国际单位每毫克(IU/mg);
XS......
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