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| 标准编号 | GB/T 35908-2018 (GB/T35908-2018) | | 中文名称 | 蜜蜂白垩病诊断技术 | | 英文名称 | Diagnostic techniques for chalkbrood of honeybees | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 18,127 | | 发布日期 | 2018-02-06 | | 实施日期 | 2018-09-01 | | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 35908-2018
Diagnostic techniques for chalkbrood of honey bees
ICS 11.220
B41
中华人民共和国国家标准
蜜蜂白垩病诊断技术
2018-02-06发布
2018-09-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
目次
前言 Ⅰ
1 范围 1
2 规范性引用文件 1
3 缩略语 1
4 试剂和材料 1
4.1 水 1
4.2 固定液、染色液和培养基 1
4.3 PCR检测方法试剂 1
4.4 引物序列及对照样品 1
5 仪器设备 2
6 临床诊断 2
6.1 流行病学 2
6.2 箱外观察 2
6.3 开箱检查 2
6.4 结果判定 2
7 实验室诊断 2
7.1 采样 2
7.2 镜检法 3
7.3 分离培养 3
7.4 PCR检测 4
8 综合判定 5
附录A(规范性附录) 固定液、染色液和培养基配方 6
附录B(规范性附录) PCR检测方法试剂的配方 7
附录C(资料性附录) 蜜蜂白垩病发病蜂群的巢门前死虫和病虫症状 9
附录D(资料性附录) 蜜蜂白垩病发病蜂群的病脾状态 10
附录E(资料性附录) 蜂球囊菌的光镜下显微图像 11
附录F(资料性附录) 蜂球囊菌PCR产物电泳图 13
附录G(资料性附录) 蜂球囊菌PCR产物参考序列 14
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。
本标准起草单位.中华人民共和国福建出入境检验检疫局、中华人民共和国吉林出入境检验检疫
局、福建农林大学、福建赛福食品检测研究所有限公司。
本标准主要起草人.郑腾、张体银、宋战昀、黄少康、李宋钰、张志灯、陈日春、王武军、白泉阳、
林素洁。
蜜蜂白垩病诊断技术
1 范围
本标准规定了蜜蜂白垩病的诊断技术。
本标准适用于蜜蜂白垩病诊断和病原检测。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB 19489 实验室 生物安全通用要求
3 缩略语
下列缩略语适用于本文件。
EB.溴化乙锭(Ethidiumbromide)
4 试剂和材料
4.1 水
本标准所用水应符合GB/T 6682中一级水的规格要求。
4.2 固定液、染色液和培养基
乳酸苯酚固定液(配方见附录A中的A.1)、乳酸棉蓝染色液(配方见A.2)、病原菌分离培养基(配
方见A.3)。
4.3 PCR检测方法试剂
亚精胺-SDS缓冲液(配方见附录B中的B.1)、饱和酚、氯仿、3mol/L的醋酸钠(pH5.5)(配方见B.2)、
TE缓冲液(配方见B.3)、0.5×TBE缓冲液(配方见B.4)、上样缓冲液(配方见B.5)、1.5%琼脂糖凝胶
(配方见B.6)、TaqDNA聚合酶(5U/μL)、10×PCR缓冲液、dNTPMix(10mmol/L)。
4.4 引物序列及对照样品
上游引物(F).5'-TGTCTGTGCGGCTAGGTG-3';
下游引物(R).5'-GAWCACGACGCCG......
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