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| 标准编号 | WS/T 342-2011 (WS/T342-2011) | | 中文名称 | 红细胞比容测定参考方法 | | 英文名称 | Reference method for hematocrit | | 行业 | 卫生行业标准 (推荐) | | 中标分类 | C50 | | 国际标准分类 | 11.020 | | 字数估计 | 7,793 | | 发布日期 | 2011-09-30 | | 实施日期 | 2012-04-01 | | 标准依据 | 卫通(2011)16号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 | | 范围 | 本标准规定了红细胞比容测定参考方法的技术要求。本标准适用于建立并运行红细胞比容测定参考方法的实验室。 |
WS/T 342-2011: 红细胞比容测定参考方法
WS/T 342-2011 英文名称: Reference method for hematocrit
ICs 11.020
C50
中 华 人 民 共 和 国 卫 生 行 业 标 准
Ws/T 342- 2ˉ011
红细胞比容测定参考方法
1 范 围
本标准规定 了红细胞 比容测定参考方法 的技术要求 。
本标准适用于建立并运行红细胞 比容测定参考方法的实验室 。
2 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件 。
2.1红细胞 比容
一定体积的全血 中红细胞所 占容积的相对 比例 。
2.2参考方法
一种可清楚和准确描述的用于特定检测的技术 ,该技术要有依据 ,可提供足够准确和精密的实验数
据以评价其他实验方法检测结果的有效性。若有决定性方法 ,参考方法的准确性应与决定性方法进行
比较 ,并且须标示不准确度和不精密度。
2.3微Ι 比容法
应用少量全血、毛细管和高速离心机来测定红细胞比容的方法。
2.4相对离心力
在离心力场中 ,作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数 ,用重力加速度“g”表示。
3 总则
为了保证参考方法测定结果的准确性 ,建立参考方法的实验室应与其他参考实验室进行结果比对。
4 一般技术要求
4.1 设备与器具
4.1.1 微童比容测定离心机
应使用专用的微量比容测定离心机 ,半径大于 8cm;能在 30s内达到最大速度 ;离 心机转子边缘
RCF能维持 10000g~15000g,离心时间至少为 5min;配有一个经校准的自动定时器 ,最 大刻度应不
小于 5min,且每隔 30s都标有刻度。
4.1.2 红细胞比容测定参考方法专用毛细管规格
4.1.2.1 材质 :钠钙硅酸盐玻璃 ;
4.1,2.2 长度 :75mm±0,5mm;
4,1.2.3 内径 :1,155mm±0。 085mm;
4.1.2,4 管壁厚度 :0.18mm~0.23mm,推荐为 0.⒛ mm;
4.1,2.5 毛细管要直 ,管孔的内径的变化不能超过内径的 2%。
4.1.3 显微镜
选用一台带有台式游标卡尺的光学显微镜 ,要求配有 4× 或 10× 物镜以及带十字标示的目镜。此
种测量仪器可获得准确的测量值 (准确到 0.1mm)。
4.1.4 密封剂
推荐使用黏土样的密封剂。不得使用加热方法为毛细管封口。
4,1.5 毛细管固定架
用一块标准的载玻片(25mm×75mm)固定于另一块大的载玻片(50mm×75mm)上,制 成毛细管固定架。
4.2 血液标本的采集
应使用带有抗凝剂的真空管采集血液标本。推荐抗凝剂为 EDTA· K2(终 浓度为 1.4mg/mL~
2.O mg/mL),也可用 EDTA· K3(终浓度为 1.6mg/mL~2.4mg/mL),摩尔浓度均为 3,7umoVmL~
5.4umol/mL。血液加人抗凝管后 ,管 内剩余空间至少 占试管体积的 ⒛ %。 标本置于 22℃ ±4℃条件
下 ,如使用 EDTA· K3,应在 3h内完成测定 ,使用 EDTA· K2可在 6h内完成测定 ,避 免红细胞体积
随时间延长而膨胀产生的误差。标本采集应避免红细胞溶血。
5 测定步骤
5.1 将标本颠倒 8次 ,使其充分混匀。
5.2 取两根长 75mm的毛细管 ,各 充人血液至管长的 2/3~3/4处,每根毛细管大约需要 50uL血。
用柔软且有吸水性的材料擦净管外壁 ,水平倾斜毛细管 ,使 吸人血柱的下端与毛细管 口的距离至少为o mm。
5.3 将毛细管垂直插人专用的密封剂里 ,轻轻旋转毛细管 ,从密封剂中取出。插人毛细管中封 口剂的
长度不少于 4mm,仔细观察封 口,确 保封 口平整 ,且与毛细管长轴垂直。
5.4 将封 口的毛细管放入离心机 ,封 口端朝向离心机转子的边缘。在毛细管对面 ,放置另一根毛细管 ,
记录位置编号。拧紧转头的盖子。
5.5 在 RCF10ooog~15000g条仵下离心 5min。
5.6 在离心机 自动停止后 ,从离心机中取出毛细管 ,读数前垂直放置 ,应在 60min内读取结果。
5.7 于显微镜下观察每根毛细管 ,确 定界面位置用于计算红细胞比容结果。
5.7.1 先将毛细管固定在固定架上 ,再将毛细管固定架置于载物台上。在视野里 ,确 保架子和毛细管
呈水平摆放 ,通过水平移动载物台进行观察。
5.7.2 在低倍镜下观察每一支毛细管 ,用游标卡尺标注下列界面读数 :
a) 红细胞/黏土 ;
b) 红细胞/白 细胞 ;
c) 血浆/空 气。
5.8 通过 5,7.2中 的界面读数来计算红细胞比容 HCT,见式 (1)。
5.8.1 确定测定结果的可接受限 :同 一标本双份毛细管离心后测定结果之差要求在 0.007内 。
5.8.2 计算每对红细胞比容测宁结果的均值。
5.g 结果的表达方式
红细胞比容值用十进制小数或百分位数表示 ,例如钌CT值为 0.42,也可表示为 42%。
6 常见误差来源
6.1 标本采集误差常见于 :
a) 使用止血带时间过长和过紧 ,造成局部血液浓缩 ;
b) 静脉穿刺不够顺利 ,导致组织液混人血中造成血液稀释或血凝块形成 ;
c) 使用的采血针头过细易造成溶血 ;
d) 使用的抗凝剂......
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