| 标准编号 | GB 29683-2013 (GB29683-2013) | | 中文名称 | 食品安全国家标准 动物性食品中对乙酰氨基酚残留量的测定 高效液相色谱法 | | 英文名称 | Determination of Paracetamol residues in animal derived food by High Performance Liquid Chromatographic method | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | C53 | | 国际标准分类 | 67.020 | | 字数估计 | 9,981 | | 引用标准 | GB/T 6682; GB/T 1.1-2000 | | 采用标准 | GB/T 6682; GB/T 1.1-2000 | | 标准依据 | 农业部公告第1927号 | | 发布机构 | 中华人民共和国农业部、中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 | | 范围 | 本标准规定了动物性食品中对乙酰氨基酚残留量检测的制样和高效液相色谱测定方法。本标准适用于猪、羊和牛的肌肉、肝脏和肾脏组织中对乙酰氨基酚残留量的检测。 | GB 29683-2013: 食品安全国家标准 动物性食品中对乙酰氨基酚残留量的测定 高效液相色谱法
GB 29683-2013 英文名称: Determination of Paracetamol residues in animal derived food by High Performance Liquid Chromatographic method
中华人民共和国国家标准
食品安全国家标准
动物性食品中对乙酰氨基酚残留量的测定
高效液相色谱法
1 范围
本标准规定了动物性食品中对乙酰氨基酚残留量检测的制样和高效液相色谱测定方法。
本标准适用于猪、牛和羊的肌肉、肝脏和肾脏组织中对乙酰氨基酚残留量的检测。
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GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 原理
试料中残留的乙酰氨基酚,用乙酸乙酯提取,HLB柱净化,甲醇洗脱,氮气吹干,流动相溶解,高效
液相色谱测定,外标法定量。
4 试剂和材料
以下所用试剂,除特别注明者外均为分析纯;水为符合GB/T 6682规定的一级水。
4.1 对乙酰氨基酚标准品:含量≥99%。
4.2 甲醇:色谱纯。
4.3 乙酸乙酯。
4.4 正己烷。
4.5 HLB固相萃取柱:60mg/3mL,或相当者。
4.6 5%甲醇水溶液:取甲醇5mL,用水溶解并稀释至100mL。
4.7 0.05mol/L乙酸铵溶液:取乙酸铵3.15g,用水溶解并稀释至1000mL,滤膜过滤。
4.8 1mg/mL对乙酰氨基酚标准贮备液:精密称取对乙酰氨基酚10mg,于10mL量瓶中,用甲醇溶
解并稀释至刻度,配制成浓度为1mg/mL的对乙酰氨基酚标准贮备液。-20℃以下保存,有效期3个月。
4.9 10μg/mL对乙酰氨基酚标准工作液:精密量取1mg/mL对乙酰氨基酚标准贮备液1.0mL,于
100mL量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,配制成浓度为10μg/mL的对乙酰氨基酚标准工作液。现配现用。
5 仪器和设备
5.1 高效液相色谱仪:配紫外检测器。
5.2 分析天平:感量0.00001g。
5.3 天平:感量0.01g。
5.4 冷冻高速离心机。
5.5 匀浆机。
5.6 旋涡混合器。
5.7 循环水真空泵。
5.8 具塞离心管:50mL。
5.9 滤膜:0.45μm。
6 试料的制备与保存
6.1 试料的制备
取新鲜或冷冻的空白或供试组织,去除筋膜,绞碎,并使均质。
---取均质后的供试样品,作为供试试料。
---取均质后的空白样品,作为空白试料。
---取均质后的空白样品,添加适宜浓度的标准工作液,作为空白添加试料。
6.2 试料的保存
-20℃以下保存。
7 测定步骤
7.1 提取
称取试料5g±0.05g,于具塞离心管中,加乙酸乙酯20mL旋涡2min,6000r/min离心15min,
取上清液,于另一离心管中,残渣中加乙酸乙酯10mL,重复提取一次,合并两次上清液,6000r/min离
心10min,取上清液,于45℃水浴蒸发至干,用甲醇3mL溶解残余物,加正己烷5mL,混匀,静置分
层,弃正己烷层液,取下层液,于45℃水浴氮气吹干,用水6mL溶解残余物,10000r/min离心10min,取上清液,备用。
7.2 净化
HLB柱依次用甲醇3mL和水3mL活化,取备用液过柱,控制流速小于2mL/min。用水3mL
和5%甲醇3mL淋洗,甲醇4mL洗脱,收集洗脱液,于40℃~45℃水浴氮气吹干,用流动相1.0mL
溶解残余物,10000r/min离心5min,取上清液,供高效液相色谱测定。
7.3 标准曲线的制备
精密量取10μg/mL对乙酰氨基酚标准工作液适量,用流动相稀释,配制成浓度为10、25、50、100、
200、400、800和1600μg/L的系列标准溶液,供高效液相色谱测定。以测得峰面积为纵坐标,对应的标
准溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线。求回归方程和相关系数。
7.4 测定
7.4.1 液相色谱条件
7.4.1.1 色谱柱:C18(250mm×4.6mm,粒径5μm),或相当者。
7.4.1.2 流动相:甲醇+0.05mol/L乙酸铵溶液(20+80,体积比)。
7.4.1.3 流速:1.0mL/min。
7.4.1.4 紫外检测波长:250nm。
7.4.1.5 进样量:50μL。
7.4.1.6 柱温:30℃。
7.4.2 测定法
取试样溶液和相应的标准溶液,作单点或多点校准,按外标法以峰面积计算。标准溶液及试样溶液
中对乙酰氨基酚响应值应在仪器检测的线性范围之内。在上述色谱条件下,标准溶液和空白添加试样
溶液的高效液相色谱图分别见附录A。
7.5......
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