| 标准编号 | GB 31604.62-2025 (GB31604.62-2025) | | 中文名称 | 食品安全国家标准 食品接触材料及制品 N-亚硝胺类化合物迁移量和释放量的测定 | | 英文名称 | National food safety standard - Food contact materials and products - Determination of migration and release of N-nitrosamines | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | X09 | | 字数估计 | 21,222 | | 发布日期 | 2025-03-16 | | 实施日期 | 2025-09-16 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生健康委员会、国家市场监督管理总局 | GB 31604.62-2025: 食品安全国家标准 食品接触材料及制品 N-亚硝胺类化合物迁移量和释放量的测定
中华人民共和国国家标准
食品安全国家标准
食品接触材料及制品 N-亚硝胺类化合物
迁移量和释放量的测定
2025-03-16发布
2025-09-16实施
中华人民共和国国家卫生健康委员会
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局 发 布
食品安全国家标准
食品接触材料及制品 N-亚硝胺类化合物
迁移量和释放量的测定
1 范围
本标准规定了食品接触材料及制品中N-亚硝胺类化合物和N-亚硝胺可生成物的迁移量及释放量
的测定方法。
本标准第一部分适用于食品接触用橡胶材料及制品中N-二甲基亚硝胺、N-亚硝基-N-甲基乙胺、
N-亚硝基二乙胺、N-亚硝基二异丙胺、N-亚硝基二正丙胺、N-亚硝基二异丁胺、N-亚硝基二正丁胺、
N-亚硝基哌啶、N-亚硝基吡咯烷、N-亚硝基吗啉、N-亚硝基-N-乙基苯胺、N-亚硝基-N-甲基苯胺、N-
亚硝基二异壬胺、N-亚硝基二环己基胺、N-亚硝基二苄胺等15种N-亚硝胺类化合物迁移量的测定,并
且适用于食品接触用橡胶材料及制品中上述15种N-亚硝胺可生成物迁移量的测定。本标准第二部分
适用于奶嘴中上述15种N-亚硝胺类化合物释放量的测定,并且适用于奶嘴中上述15种N-亚硝胺可
生成物释放量的测定。
第一部分 N-亚硝胺类化合物和N-亚硝胺可生成物迁移量的测定
第一法 气相色谱-质谱法
2 原理
迁移试验所得浸泡液中N-亚硝胺类化合物在碱性条件下经二氯甲烷萃取、浓缩后,采用气相色谱-
质谱仪(GC-MS)测定,外标法定量,获得直接迁移出的N-亚硝胺类化合物迁移量。
迁移试验所得浸泡液中N-亚硝胺可生成物,在酸性条件下与人工唾液中的亚硝酸盐反应生成N-
亚硝胺类化合物,反应生成的N-亚硝胺类化合物和直接迁移出的N-亚硝胺类化合物按上述步骤同步
测定,获得N-亚硝胺可生成物和直接迁移出的N-亚硝胺类化合物二者迁移量之和。单种N-亚硝胺可
生成物的迁移量由测得的二者迁移量之和减去直接迁移出的相应N-亚硝胺迁移量计算获得。
3 试剂与材料
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂
3.1.1 二氯甲烷(CH2Cl2):色谱纯。
3.1.2 浓盐酸(HCl)。
3.1.3 氢氧化钠(NaOH)。
3.1.4 无水乙醇(C2H6O):色谱纯。
3.1.5 冰醋酸(C2H4O2):优级纯。
3.1.6 碳酸氢钠(NaHCO3)。
3.1.7 氯化钠(NaCl)。
3.1.8 碳酸钾(K2CO3)。
3.1.9 亚硝酸钠(NaNO2)。
3.2 试剂配制
3.2.1 食品模拟物:按GB 5009.156配制。
3.2.2 0.1mol/L盐酸溶液:按GB 5009.156配制。
3.2.3 0.1mol/L氢氧化钠溶液:按GB 5009.156配制。
3.2.4 1mol/L盐酸溶液:量取盐酸83mL缓慢加入500mL水中,待溶液冷却至室温后,转移至1L
容量瓶中,用水定容至刻度后,混匀。
3.2.5 5mol/L氢氧化钠溶液:称取5.0g氢氧化钠于聚乙烯或聚四氟乙烯塑料烧杯中,加250mL水
溶解。冷却后,转移至塑料(PET除外)瓶中,待用。
3.2.6 人工唾液:按GB 5009.156配制,或采购市售人工唾液。
3.3 标准品/物质
15种N-亚硝胺类化合物标准物质:纯度均 >98%,具体信息见附录A中表A.1,或经国家认证并
授予标准物质证书的标准物质。
3.4 标准溶液配制
3.4.1 15种N-亚硝胺类化合物混合标准储备液(100mg/L):准确称取15种N-亚硝胺类化合物标准
物质各25mg(精确至0.1mg),用无水乙醇溶解后转移至250mL棕色容量瓶中,用乙醇定容至刻
度,混匀。将溶液转移至棕色玻璃容器内,-18℃避光保存,保存期6个月。
3.4.2 N-亚硝胺类化合物混合标准中间液(1.00mg/L):准确移取15种N-亚硝胺类化合物混合标准
储备液(100mg/L)1.00mL于100mL棕色容量瓶中,用无水乙醇定容至刻度,混匀。将溶液转移至棕
色玻璃容器内,-18℃避光保存,保存期3个月。
3.4.3 混合标准系列工作液:分别移取 N-亚硝胺类化合物混合标准中间液(1.00mg/L)0.50mL、
1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL于6个10mL棕色容量瓶中,用无水乙醇定容至刻
度,混匀。15种 N-亚硝胺类化合物的质量浓度分别为0.0500mg/L、0.100mg/L、0.200mg/L、
0.300mg/L、0.400mg/L、0.500mg/L的混合标准系列工作溶液。临用现配。
4 仪器和设备
4.1 气相色谱仪-质谱仪(GC-MS):配电子轰击源(EI源)。
4.2 电子天平:感量分别为0.1g、0.1mg。
4.3 电热鼓风干燥箱。
4.4 旋转蒸发仪:负压装置以及水冷设备。
4.5 氮吹仪。
4.6 pH计:精度0.1。
4.7 微孔滤膜:尼龙,孔径0.22μm。
4.8 分液漏斗:150mL,配聚四氟乙烯塞。
5 分析步骤
5.1 迁移试验
食品接触材料及制品按照GB 31604.1和GB 5009.156的要求进行迁移试验。迁移试验中应避免
使用橡胶材质的耗材和工具,如密封圈、手套、切割工具等。迁移试验所得浸泡液恢复至室温后应尽快
进行测试。
5.2 试液的制备
5.2.1 N-亚硝胺类化合物迁移量试液的制备
5.2.1.1 浸泡液的处理
按表1要求依次将规定体积的浸泡液、5mol/L氢氧化钠溶液加入分液漏斗中,混匀;再加入表1
中规定体积的水和乙醇,混匀。
表1 N-亚硝胺类化合物迁移量试液相关试剂用量表
浸泡液种类
移取体积/mL
浸泡液 5mol/L氢氧化钠溶液 乙醇 水
水 40.0 1.0 20.0 39.0
4%(体积分数)乙酸 40.0 6.5 20.0 33.5
10%(体积分数)乙醇 40.0 1.0 16.0 43.0
20%(体积分数)乙醇 40.0 1.0 12.0 47.0
50%(体积分数)乙醇 40.0 1.0 0.0 59.0
95%(体积分数)乙醇 20.0 0.5 1.0 78.5
5.2.1.2 N-亚硝胺类化合物的萃取和浓缩
向分液漏斗中加入二氯甲烷30.0mL,逆时针轻微摇晃漏斗,盖上盖子,剧烈振荡15s(必要时放
气),打开盖子,静置分层,收集下层提取液。再用二氯甲烷30.0mL重复提取2次,合并提取液,摇匀。
将提取液于18℃~25℃水浴温度下,减压旋转蒸发浓缩至约5mL,氮吹至0.8mL~0.9mL,转移至
1.0mL棕色容量瓶中,用无水乙醇定容,经微孔滤膜过滤后待测。
5.2.2 N-亚硝胺类化合物和N-亚硝胺可生成物的迁移量之和试液的制备
5.2.2.1 浸泡液中N-亚硝胺可生成物的亚硝化反应及处理
按表2要求移取规定体积的各浸泡液、溶剂和试剂。将迁移试验所得浸泡液置于150mL的具塞
锥形瓶中,加入人工唾液。将锥形瓶置于电热鼓风干燥箱中,40℃恒温30min后取出,加入1mol/L
盐酸溶液,混匀。将锥形瓶重新置于电热鼓风干燥箱中,40℃反应30min后取出;加入5mol/L氢氧
化钠溶液,混匀。待试液冷却至室温后,转移至分液漏斗中,加入表2中规定体积的水和乙醇,混匀。
表2 N-亚硝胺可生成物迁移量试液相关试剂用量表
浸泡液种类
移取体积/mL
浸泡液 人工唾液 1mol/L盐酸溶液 5mol/L氢氧化钠溶液 乙醇 水
水 40.0 40.0 5.0 2.0 20.0 0.0
4%(体积分数)乙酸 40.0 40.0 5.0 7.5 20.0 0.0
10%(体积分数)乙醇 40.0 40.0 5.0 2.0 16.0 0.0
20%(体积分数)乙醇 40.0 40.0 5.0 2.0 12.0 0.0
50%(体积分数)乙醇 40.0 40.0 5.0 2.0 0.0 13.0
95%(体积分数)乙醇 20.0 20.0 2.5 1.0 1.0 55.5
5.2.2.2 N-亚硝胺类化合物的萃取和浓缩
同5.2.1.2。
5.2.3 空白试液的制备
按5.1、5.2.1和5.2.2处理未与食品接触材料及制品接触的食品模拟物。
5.3 仪器参考条件
5.3.1 气相色谱参考条件
气相色谱参考条件如下:
a) 色谱柱:改性聚乙二醇色谱柱,30m×0.25mm(内径)×0.32μm(膜厚)或性能相当者;
b) 进样口温度:240℃;
c) 程序升温条件:初始温度60℃,保留2min,以15℃/min升至82℃,以1℃/min升至
88℃,以15℃/min升至110℃,保留7min,再以15℃/min升至240℃,保留7min;
d) 载气:氦气(纯度≥99.999%);
e) 流速:1.2mL/min;
f) 进样方式:不分流进样;
g) 进样体积:1μL。
5.3.2 质谱参考条件
质谱参考条件如下:
a) 接口温度:250℃;
b) 离子源温度:250℃;
c) 电离方式:电子轰击源(EI源);
d) 溶剂延迟:5min;
e) 扫描模式:选择离子扫描(SIM),离子参数见附录B中表B.1。
5.4 标准曲线的绘制
按照5.3所列仪器参考条件,对混合标准系列工作液依次进样测定。以混合标准系列工作液中N-
亚硝胺类化合物的质量浓度为横坐标,以对应的定量离子峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。15种N-亚
硝胺类化合物标准工作溶液的色谱图见图B.1。
5.5 试样溶液的测定
5.5.1 定性测定
按照所列的仪器参考条件,测定试样溶液和混合标准系列工作液,若试液与标准溶液中待测物的质
量色谱峰保留时间的偏差在±0.5%范围内,并且在扣除背景后的试样质谱图中,所有定性离子均出现
且信噪比≥3,而且定性离子的相对丰度与浓度相当的标准工作溶液中对应物质的相对丰度偏差不超过
表3规定,则可判断试样中存在相应的待测物。
表3 定性时相对离子丰度的最大允许偏差
相对离子丰度 >50% < 20%~50% < 10%~20% ≤10%
最大允许偏差 ±20% ±25% ±30% ±50%
5.5.2 定量测定
将试液和空白试液注入GC-MS中,得到各N-亚硝胺类化合物的峰面积,根据标准曲线得到试液
中各N-亚硝胺类化合物的浓度。若各N-亚硝胺类化合物的含量超出标准曲线范围,试液可适当稀释
后,重新测定。
5.5.3 N-亚硝胺类化合物的定性确证
如果N-亚硝胺类化合物迁移总量超过产品标准的限量要求,应通过以下途径之一予以确认。
a) 利用N-亚硝胺类化合物受紫外线照射分解的性质,将剩余的测试溶液转入透明进样瓶中,置
于365nm紫外线下,距离灯管约24cm的位置照射3h后,重新采用GC-MS测定。若照射后
试液检出的N-亚硝胺类化合物对应色谱峰峰面积降低至原来峰面积的60%以下,则可确认
为检出物质为相应的N-亚硝胺类化合物,否则可确定所检出化合物为假阳性。此方法不适用
于N-亚硝基-N-甲基苯胺和N-亚硝基-N-乙基苯胺。
b) 参照5.5.3.a)的方法,采用气相色谱-热能分析仪法(GC-TEA)确认。
6 分析结果的表述
6.1 N-亚硝胺类化合物迁移量的计算
6.1.1 食品接触材料及制品中单种N-亚硝胺特定迁移量的计算(以mg/kg表示)
食品接触材料及制品中单种N-亚硝胺特定迁移量以mg/kg表示时,按式(1)进行计算。
Xa1=
(ca-ca0)×V1
V2 ×
V3
S1×
F (1)
式中:
Xa1---单种N-亚硝胺的特定迁移量,单位为毫克每千克(mg/kg);
ca ---迁移量试液中单种N-亚硝胺的含量,单位为毫克每升(mg/L);
ca0 ---迁移量空白试液中单种N-亚硝胺的含量,单位为毫克每升(mg/L);
V1 ---迁移量试液的定容体积,单位为升(L);
V2 ---检测时浸泡液的移取体积,单位为升(L);
V3 ---迁移试验中试样浸泡液的体积,单位为升(L);
S1 ---迁移试验中试样与浸泡液接触的面积,单位为平方分米(dm2);
F ---食品接触材料及制品在可预见使用情形下实际的接触面积与食品体积(质量)比(以下简
称实际S/V),单位为平方分米每千克(dm2/kg)。各种液态食品通常密度以1kg/L计将其
体积换算为质量来计算实际S/V。当实际S/V 已知时,F 即为可预见使用情形下的最大
S/V;当实际S/V未知时,F采用6dm2/kg,即6dm2食品接触材料及制品接触1kg食品。
结果保留3位有效数字。
6.1.2 密封制品类食品接触材料及制品中单种N-亚硝胺特定迁移量的计算(以mg/件表示)
对盖子、密封圈、连接件等密封制品(以下简称密封制品)类食品接触材料及制品中单种N-亚硝胺
特定迁移量以mg/件表示时,按式(2)计算,需注明采用的迁移试验方法、迁移试验中单个密封制品与
食品模拟物接触的面积。
Xa2=
(ca-ca0)×V1
V2 ×
V3
(2)
式中:
Xa2---单种N-亚硝胺的特定迁移量,单位为毫克每件(mg/件);
ca ---迁移量试液中单种N-亚硝胺的含量,单位为毫克每升(mg/L);
ca0 ---迁移量空白试液中单种N-亚硝胺的含量,单位为毫克每升(mg/L);
V1 ---迁移量试液的定容体积,单位为升(L);
V2 ---检测时浸泡液的移取体积,单位为升(L);
V3 ---迁移试验中试样浸泡液的体积,单位为升(L);
n ---浸泡用密封制品的数量,单位为件。
结果保留3位有效数字。
6.2 单种N-亚硝胺可生成物迁移量(以相应的N-亚硝胺计)的计算
6.2.1 食品接触材料及制品中单种N-亚硝胺可生成物迁移量的计算(以mg/kg表示)
6.2.1.1 食品接触材料及制品单种N-亚硝胺及其可生成物特定迁移量之和以mg/kg表示时,按式(3)
进行计算。
Xb1=
(cb-cb0)×V1
V2 ×
V3
S1×
F (3)
式中:
Xb1---单种N-亚硝胺及其可生成物的特定迁移量之和,单位为毫克每千克(mg/kg);
cb ---5.2.2所得试液中单种N-亚硝胺的含量,单位为毫克每升(mg/L);
cb0 ---5.2.2所得空白试液中单种N-亚硝胺的含量,单位为毫克每升(mg/L);
V1 ---5.2.2所得试液的定容体积,单位为升(L);
V2 ---检测时浸泡液的移取体积,单位为升(L);
V3 ---迁移试验中试样浸泡液的体积,单位为升(L):
S1 ---迁移试验中试样与浸泡液接触的面积,单位为平方分米(dm2);
F ---实际S/V,单位为平方分米每千克(dm2/kg)。各种液态食品通常密度以1kg/L计将其体
积换算为质量来计算实际S/V。当实际S/V 已知时,F 即为可预见使用情形下的最大
S/V;当实际S/V 未知时,F 采用6dm2/kg,即6dm2 食品接触材料及制品接触1kg
食品。
6.2.1.2 食品接触材料及制品单种 N-亚硝胺可生成物特定迁移量以 mg/kg表示时,按式(4)进行
计算。
Xc1=Xb1-Xa1 (4)
式中:
Xc1---单种N-亚硝胺可生成物的特定迁移量,单位为毫克每千克(mg/kg);
Xb1---单种N-亚硝胺及其可生成物的特定迁移总量,单位为毫克每千克(mg/kg);
Xa1---单种N-亚硝胺的特定迁移量,单位为毫克每千克(mg/kg)。
结果保留3位有效数字。
6.2.2 密封制品类食品接触材料及制品中单种N-亚硝胺可生成物迁移量的计算(以mg/件表示)
6.2.2.1 当密封制品类食品接触材料及制品中单种N-亚硝胺及其可生成物特定迁移之和以 mg/件表
示时,按式(5)计算,需注明采用的迁移试验方法、迁移试验中单个密封制品与食品模拟物接触的面积。
Xb2=
(cb-cb0)×V1
V2 ×
V3
(5)
式中:
Xb2---单种N-亚硝胺及其可生成物的特定迁移之和,单位为毫克每件(mg/件);
cb ---5.2.2所得试液中单种N-亚硝胺的含量,单位为毫克每升(mg/L);
cb0 ---5.2.2所得试液空白试液中单种N-亚硝胺的含量,单位为毫克每升(mg/L);
V1 ---5.2.2所得试液的定容体积,单位为升(L);
V2 ---检测时浸泡液的移取体积,单位为升(L);
V3 ---迁移试验中试样浸泡液的体积,单位为升(L);
n ---浸泡用密封制品的数量,单位为件。
6.2.2.2 密封制品类食品接触材料及制品单种N-亚硝胺可生成物特定迁移量以 mg/件表示时,按
式(6)进行计算。
Xc2=Xb2-Xa2 (6)
式中:
Xc2---单种N-亚硝胺可生成物的特定迁移量,单位为毫克每件(mg/件);
Xb2---单种N-亚硝胺及其可生成物的特定迁移量之和,单位为毫克每件(mg/件);
Xa2---单种N-亚硝胺的特定迁移量,单位为毫克每件(mg/件)。
结果保留3位有效数字。
6.3 N-亚硝胺类化合物迁移总量的计算
N-亚硝胺类化合物迁移总量为各种N-亚硝胺的迁移量之和。若某种N-亚硝胺迁移量低于其检
出限,应记录为“未检出”或“ND”,其值以零处理。
6.4 N-亚硝胺可生成物迁移总量(以相应的N-亚硝胺类化合物计)的计算
N-亚硝胺可生成物迁移总量为各种N-亚硝胺可生成物迁移量之和。若某种N-亚硝胺可生成物
迁移量低于其检出限,应记录为“未检出”或“ND”,其值以零处理。
7 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的20%。
8 检出限和定量限
本方法对95%(体积分数)乙醇浸泡液中单种N-亚硝胺含量的检出限均为1.3μg/L,定量限均为
2.50μg/L,其他浸泡液中单种N-亚硝胺含量的检出限均为0.7μg/L,定量限均为1.25μg/L。在同种
浸泡液中、指定的亚硝化条件下,若直接迁出的单种N-亚硝胺未检出时,单种N-亚硝胺可生成物(以相
应的N-亚硝胺计)含量检出限和定量限与相应的N-亚硝胺类化合物含量的检出限和定量限相同。各
N-亚硝胺类化合物和N-亚硝胺可生成物迁移量的检出限和定量限按第6章计算。
9 其他
试验过程中应遵循以下注意事项:
a) 分析所用二氯甲烷和无水乙醇浓缩60倍后,不应检出任意一种N-亚硝胺类化合物(即信噪比
S/N< 3);
b) 各标准溶液配制时需在通风良好的环境下进行;
c) 混合标准系列工作液按5.5.3的要求处理至少14h后废弃,其他高浓度标准溶液用水稀释至
0.5mg/L以下,按5.5.3的要求处理至少14h后废弃;
d) 试验过程中应避免橡胶材质的物品(如手套、密封垫、切割工具等)带来的污染。
第二法 气相色谱-热能分析仪法
10 原理
迁移试验所得浸泡液中N-亚硝胺类化合物在碱性条件下经二氯甲烷萃取、浓缩后,采用气相色谱-
热能分析仪(GC-TEA)测定,外标法定量,获得直接迁移出的N-亚硝胺类化合物迁移量。
迁移试验所得浸泡液中N-亚硝胺可生成物,在酸性条件下与人工唾液中的亚硝酸盐反应生成N-
亚硝胺类化合物,反应生成的N-亚硝胺类化合物和直接迁移出的N-亚硝胺类化合物按上述步骤同步
测定,获得N-亚硝胺可生成物和直接迁移出的N-亚硝胺类化合物二者迁移量之和。单种N-亚硝胺可
生成物的迁移量由测得的二者迁移量之和减去直接迁移出的相应N-亚硝胺类化合物迁移量计算获得。
11 试剂与材料
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。
11.1 试剂
同3.1。
11.2 试剂配制
同3.2。
11.3 标准品/物质
同3.3。
11.4 标准溶液配制
11.4.1 15种N-亚硝胺类化合物混合标准储备液(100mg/L):同3.4.1。
11.4.2 N-亚硝胺类化合物混合标准中间液(1.00mg/L):同3.4.2。
11.4.3 混合标准系列工作液:分别移取N-亚硝胺类化合物混合标准中间液(1.00mg/L)0.25mL、
0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL于5个10mL棕色容量瓶中,用无水乙醇定容至刻度,混匀。得
到15种N-亚硝胺类化合物的质量浓度分别为0.0250mg/L、0.0500mg/L、0.100mg/L、0.250mg/L、
0.500mg/L的混合标准工作溶液。临用现配。
12 仪器和设备
12.1 气相色谱-热能分析仪(GC-TEA)。
12.2 其他同4.2~4.7。
13 分析步骤
13.1 迁移试验
同5.1。
13.2 试液的制备
同5.2。
13.3 仪器参考条件
13.3.1 气相色谱条件
气相色谱参考条件如下:
a) 色谱柱:改性聚乙二醇色谱柱,30m×0.25mm(内径)×0.32μm(膜厚)或性能相当者;
b) 进样口温度:170℃;
c) 程序升温条件:初......
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