| 标准编号 | GB 5413.40-2016 (GB5413.40-2016) | | 中文名称 | 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定 | | 英文名称 | National Standard of Food Safety - Determination of Nucleotide in Foods and Milk Products for Infants and Young Children | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | X09 | | 字数估计 | 6,615 | | 发布日期 | 2016-08-31 | | 实施日期 | 2017-03-01 | | 标准依据 | 国家卫生和计划生育委员会公告2016年第11号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会、国家食品药品监督管理总局 | GB 5413.40-2016: 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定
GB 5413.40-2016 英文名称: National Food Safety Standard -- Determination of Nucleotide in Foods and Milk Products for Infants and Young Children
中华人民共和国国家标准
1 范围
本标准规定了液相色谱法测定游离核苷酸总量的方法。
本标准适用于婴幼儿食品和乳品中游离核苷酸总量(包括胞嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸、次黄嘌呤
核苷酸、鸟嘌呤核苷酸、腺嘌呤核苷酸)的测定。
5 分析步骤
5.1 试样制备
5.1.1 样品预处理
5.1.1.1 含淀粉的试样
称取混合均匀的固体试样约5g(精确至0.1mg),于100mL锥形瓶中,加入约0.2g淀粉酶,加入
20mL热水(30℃~40℃)充分溶解试样,或称取混合均匀的液体试样约20g(精确至1mg)于100mL
锥形瓶中,加入约0.2g淀粉酶摇匀,于37℃±2℃培养箱内酶解30min。取出冷却至室温。
5.1.1.2 不含淀粉的试样
称取混合均匀的固体试样约5g(精确至0.1mg),于100mL锥形瓶中,加入20mL热水(50℃~
60℃)充分溶解试样,冷却至室温,或称取混合均匀的液体试样约20g(精确至1mg)于100mL锥形瓶中。
5.1.2 待测液的制备
用醋酸溶液调试样溶液pH4.1,移入50mL容量瓶中,定容,滤纸过滤,所得滤液用0.45μm微膜过滤备用。
5.2 参考色谱条件
5.2.1 流动相:磷酸盐缓冲液+甲醇=1000+40。
5.2.2 色谱柱:C18-T反相色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)或具同等性能的色谱柱。
5.2.3 流速:1mL/min。
5.2.4 波长:254nm。
5.2.5 柱温:25℃。
5.2.6 进样体积:10μL。
注:必要时可以用磷酸或磷酸氢二钾溶液适当调流动相的pH至分离情况最佳。
5.3 标准曲线绘制
分别吸取标准混合溶液2mL、4mL、6mL、8mL、10mL,加超纯水定容至50mL,配成核苷酸系列
标准工作液,见表1。
5.4 试样溶液的测定
将制备好的试样溶液注入高效液相色谱仪中,测定相应的峰面积或峰高。根据标准曲线得到待测
液中核苷酸的浓度(μg/mL)。
6 分析结果的表述
6.2 结果表示
计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保留到小数点后两位。
7 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
8 其他
高效液相色谱紫外法标准和试样核苷酸色谱图见附录A。
本标核苷酸各组分定量限分别为:
CMP 定量限为 3.3mg/kg。
AMP 定量限为 5.0mg/kg。
UMP 定量限为 5.0mg/kg。
GMP 定量限为 5.0mg/kg。
IMP 定量限为......
|