GB 5413.9-2010 相关标准英文版PDF, 自动发货
| 标准号码 | 价格美元 | 第2步(购买) | 交付天数 | 标准名称 |
| GB 5413.9-2010 | 70 | GB 5413.9-2010 | 3秒自动 | 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维生素A、D、E的测定 |
| GB/T 5413.9-1997 | 199 | GB/T 5413.9-1997 | [PDF]天数 <=2 | 婴幼儿配方食品和乳粉 维生素A、D、E的测定 |
| 基本信息 | |
|---|---|
| 标准编号 | GB 5413.9-2010 (GB5413.9-2010) |
| 中文名称 | 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维生素A、D、E的测定 |
| 英文名称 | National food safety standard -- Determination of vitamin A, D, E in foods for infants and young children, milk and milk products |
| 行业 | 国家标准 |
| 中标分类 | C53;X82 |
| 国际标准分类 | 67.100.10 |
| 字数估计 | 10,172 |
| 发布日期 | 2010-03-26 |
| 实施日期 | 2010-06-01 |
| 旧标准 (被替代) | GB/T 5413.9-1997 |
| 引用标准 | GB/T 6682 |
| 标准依据 | 卫通(2010)7号;国家卫生和计划生育委员会公告2016年第17号 |
| 发布机构 | 中华人民共和国卫生部 |
| 范围 | 本标准规定了婴幼儿食品和乳品中维生素A、D、E的测定方法。本标准适用于婴幼儿食品和乳品中维生素A、D、E的测定。 |
GB 5413.9-2010
书中华人民共和国国家标准
GB ５４１３．９-２０１０
食品安全国家标准
婴幼儿食品和乳品中
维生素A、D、E的测定
２０１０-０３-２６发布
２０１０-０６-０１实施
中华人民共和国卫生部 发 布
前言
本标准代替GB/T ５４１３．９-１９９７《婴幼儿配方食品和乳粉 维生素Ａ、Ｄ、Ｅ的测定》。
本标准与GB/T ５４１３．９-１９９７相比，主要变化如下：
---抗氧化剂由原来的焦性没食子酸改为抗坏血酸；
---将处理方法中的加热回流改为恒温皂化操作；
---增加了标准溶液的校正；
---将原有的单点定量改为标准曲线法；
---增加了维生素Ｄ回收率的测定；
---将计算公式进行修改。
本标准的附录Ａ为规范性附录，附录Ｂ为资料性附录。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为：
---GB/T ５４１３．９-１９９７。
GB ５４１３．９-２０１０
食品安全国家标准
婴幼儿食品和乳品中
维生素A、D、E的测定
１ 范围
本标准规定了婴幼儿食品和乳品中维生素Ａ、Ｄ、Ｅ的测定方法。
本标准适用于婴幼儿食品和乳品中维生素Ａ、Ｄ、Ｅ的测定。
２ 规范性引用文件
本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版
本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。
３ 原理
试样皂化后，经石油醚萃取，维生素Ａ、Ｅ用反相色谱法分离，外标法定量；维生素Ｄ用正相色谱法
净化后，反相色谱法分离，外标法定量。
４ 试剂和材料
除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T ６６８２规定的一级水。
４．１ α-淀粉酶：酶活力≥１．５Ｕ／ｍｇ。
４．２ 无水硫酸钠。
４．３ 异丙醇：色谱纯。
４．４ 乙醇：色谱纯。
４．５ 氢氧化钾水溶液：称取固体氢氧化钾２５０ｇ，加入２００ｍＬ水溶解。
４．６ 石油醚：沸程３０℃～６０℃。
４．７ 甲醇：色谱纯。
４．８ 正己烷：色谱纯。
４．９ 环己烷：色谱纯。
４．１０ 维生素Ｃ的乙醇溶液（１５ｇ／Ｌ）。
４．１１ 维生素Ａ、Ｄ、Ｅ标准溶液。
４．１１．１ 维生素Ａ标准储备液（视黄醇）（１００μｇ／ｍＬ）：精确称取１０ｍｇ的维生素Ａ标准品，用乙醇
（４．４）溶解并定容于１００ｍＬ棕色容量瓶中。
４．１１．２ 维生素Ｅ标准储备液（α-生育酚）（５００μｇ／ｍＬ）：精确称取５０ｍｇ的维生素Ｅ标准品，用乙醇
（４．４）溶解并定容于１００ｍＬ棕色容量瓶中。
４．１１．３ 维生素Ｄ２ 标准储备液（１００μｇ／ｍＬ）：精确称取１０ｍｇ的维生素Ｄ２ 标准品，用乙醇（４．４）溶解
并定容于１００ｍＬ棕色容量瓶中。
４．１１．４ 维生素Ｄ３ 标准储备液（１００μｇ／ｍＬ）：精确称取１０ｍｇ的维生素Ｄ３ 标准品，用乙醇（４．４）溶解
并定容于１００ｍＬ棕色容量瓶中。
注：维生素Ａ、Ｄ、Ｅ标准储备液均须-１０℃以下避光储存。标准工作液临用前配制。标准储备溶液用前需校正，见
附录Ａ。
GB ５４１３．９-２０１０
５ 仪器和设备
５．１ 高效液相色谱仪，带紫外检测器。
５．２ 旋转蒸发器。
５．３ 恒温磁力搅拌器：２０℃～８０℃。
５．４ 氮吹仪。
５．５ 离心机：转速≥５０００转／分钟。
５．６ 培养箱：６０℃±２℃。
５．７ 天平：感量为０．１ｍｇ。
６ 分析步骤
６．１ 试样处理
６．１．１ 含淀粉的试样
称取混合均匀的固体试样约５ｇ或液体试样约５０ｇ（精确到０．１ｍｇ）于２５０ｍＬ三角瓶中，加入１ｇ
α-淀粉酶（４．１），固体试样需用约５０ｍＬ４５℃～５０℃的水使其溶解，混合均匀后充氮，盖上瓶塞，置于
６０℃±２℃培养箱（５．６）内培养３０ｍｉｎ。
６．１．２ 不含淀粉的试样
称取混合均匀的固体试样约１０ｇ或液体试样约５０ｇ（精确到０．１ｍｇ）于２５０ｍＬ三角瓶中，固体试
样需用约５０ｍＬ４５℃～５０℃的水使其溶解，混合均匀。
６．２ 测定维生素D的试样需要同时做回收率实验。
６．３ 待测液的制备
６．３．１ 皂化：于上述处理的试样溶液中加入约１００ｍＬ维生素Ｃ的乙醇溶液（４．１０），充分混匀后加
２５ｍＬ氢氧化钾水溶液（４．５）混匀，放入磁力搅拌棒，充氮排出空气，盖上胶塞。１０００ｍＬ的烧杯中加
入约３００ｍＬ的水，将烧杯放在恒温磁力搅拌器（５．３）上，当水温控制在５３℃±２℃时，将三角瓶放入烧
杯中，磁力搅拌皂化约４５ｍｉｎ后，取出立刻冷却到室温。
６．３．２ 提取：用少量的水将皂化液全部转入５００ｍＬ分液漏斗中，加入１００ｍＬ石油醚（４．６），轻轻摇
动，排气后盖好瓶塞，室温下振荡约１０ｍｉｎ后静置分层，将水相转入另一５００ｍＬ分液漏斗中，按上述方
法进行第二次萃取。合并醚液，用水洗至近中性。醚液通过无水硫酸钠过滤脱水，滤液收入５００ｍＬ圆
底烧瓶中，于旋转蒸发器上在４０℃±２℃充氮条件下蒸至近干（绝不允许蒸干）。残渣用石油醚转移至
１０ｍＬ容量瓶中，定容。
６．３．３ 从上述容量瓶中准确移取２．０ｍＬ石油醚溶液放入试管Ａ中，再准确移取７．０ｍＬ石油醚溶液
放入另一试管Ｂ中，将试管置于４０℃±２℃的氮吹仪（５．４）中，将试管Ａ和Ｂ中的石油醚吹干。向试
管Ａ中加５．０ｍＬ甲醇（４．７），振荡溶解残渣。向试管Ｂ中加２．０ｍＬ正己烷（４．８），振荡溶解残渣。再
将试管Ａ和试管Ｂ以不低于５０００转／分钟的速度离心１０ｍｉｎ，取出静置至室温后待测。Ａ管用来测
定维生素Ａ、Ｅ，Ｂ管用来测定维生素Ｄ。
６．４ 测定
６．４．１ 维生素A、E的测定
６．４．１．１ 色谱参考条件
色谱柱：Ｃ１８柱，２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ，或具同等性能的色谱柱。
流动相：甲醇（４．７）。
流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ。
检测波长：维生素Ａ：３２５ｎｍ；维生素Ｅ：２９４ｎｍ。
柱温：３５℃±１℃。
GB ５４１３．９-２０１０
进样量：２０μＬ。
６．４．１．２ 维生素A、E标准曲线的绘制
分别准确吸取维生素Ａ标准储备液（４．１１．１）０．５０ｍＬ、１．００ｍＬ、１．５０ｍＬ、２．００ｍＬ、２．５０ｍＬ于
５０ｍＬ棕色容量瓶中，用乙醇定容至刻度混匀。此标准系列工作液浓度分别为１．００μｇ／ｍＬ、２．００μｇ／ｍＬ、
３．００μｇ／ｍＬ、４．００μｇ／ｍＬ、５．００μｇ／ｍＬ。
分别准确吸取维生素Ｅ标准储备液（４．１１．２）１．００ｍＬ、２．００ｍＬ、３．００ｍＬ、４．００ｍＬ、５．００ｍＬ于
５０ｍＬ棕色容量瓶中，用乙醇定容至刻度混匀。此标准系列工作液浓度分别为１０．０μｇ／ｍＬ、２０．０μｇ／ｍＬ、
３０．０μｇ／ｍＬ、４０．０μｇ／ｍＬ、５０．０μｇ／ｍＬ。
分别将维生素Ａ、Ｅ标准工作液注入液相色谱仪中（色谱图参见附录Ｂ），得到峰高（或峰面积）。以
峰高（或峰面积）为纵坐标，以维生素Ａ、Ｅ标准工作液浓度为横坐标分别绘制维生素Ａ、Ｅ标准曲线。
６．４．１．３ 维生素A、E试样的测定
将试液（６．３．３中Ａ管）注入液相色谱仪中，得到峰高（或峰面积），根据各自标准曲线得到待测溶液
中维生素Ａ、Ｅ的浓度。
６．４．２ 维生素D的测定
６．４．２．１ 维生素D待测液的净化
６．４．２．１．１ 色谱参考条件。
色谱柱：硅胶柱，１５０ｍｍ×４．６ｍｍ，或具同等性能的色谱柱。
流动相：环己烷（４．９）与正己烷（４．８）按体积比１∶１混合，并按体积分数０．８％加入异丙醇（４．３）。
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ。
波长：２６４ｎｍ。
柱温：３５℃±１℃。
进样体积：５００μＬ。
６．４．２．１．２ 取约０．５ｍＬ维生素Ｄ标准储备液（４．１１．３、４．１１．４）于１０ｍＬ具塞试管中，在４０℃±２℃
的氮吹仪（５．４）上吹干。残渣用５ｍＬ正己烷振荡溶解。取该溶液５０μＬ注入液相色谱仪中测定，确定
维生素Ｄ保留时间。然后将５００μＬ待测液（６．３．３中Ｂ管）注入液相色谱仪中，根据维生素Ｄ标准溶
液保留时间收集维生素Ｄ馏分于试管Ｃ中。将试管Ｃ置于４０℃±２℃条件下的氮吹仪中吹干，取出
准确加入１．０ｍＬ甲醇（４．７），残渣振荡溶解，即为维生素Ｄ测定液。
６．４．２．２ 维生素D测定液的测定
６．４．２．２．１ 参考色谱条件
色谱柱：Ｃ１８柱，２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ，或具同等性能的色谱柱。
流动相：甲醇（４．７）。
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ。
检测波长：２６４ｎｍ。
柱温：３５℃±１℃。
进样量：１００μＬ。
６．４．２．２．２ 标准曲线的绘制
分别准确吸取维生素 Ｄ２（或 Ｄ３）标准储备液（４．１１．３、４．１１．４）０．２０ｍＬ、０．４０ｍＬ、０．６０ｍＬ、
０．８０ｍＬ、１．００ｍＬ于１００棕色容量瓶中，用乙醇定容至刻度混匀。此标准系列工作液浓度分别为
０．２００μｇ／ｍＬ、０．４００μｇ／ｍＬ、０．６００μｇ／ｍＬ、０．８００μｇ／ｍＬ、１．０００μｇ／ｍＬ。
分别将维生素Ｄ２（或Ｄ３）标准工作液注入液相色谱仪中，得到峰高（或峰面积），参见附录Ｂ。以峰
高（或峰面积）为纵坐标，以维生素Ｄ２（或Ｄ３）标准工作液浓度为横坐标分别绘制标准曲线。
６．４．２．２．３ 维生素D试样的测定
吸取维生素Ｄ测定液（６．４．２．１中Ｃ管）１００μＬ注入液相色谱仪中（色谱图参见附录Ｂ），得到峰高
GB ５４１３．９-２０１０
（或峰面积），根据标准曲线得到维生素Ｄ测定液中维生素Ｄ２（或Ｄ３）的浓度。
结果进行校正。
７ 分析结果的表述
７．１ 维生素A含量的计算
维生素Ａ含量按式（１）计算：
X＝犮狊×１０
／２×５×１００
（１）
式中：
X---试样中维生素Ａ的含量，单位为微克每百克（μｇ／１００ｇ）；
犮狊---从标准曲线得到的维生素Ａ待测液的浓度，单位为微克每毫升（μｇ／ｍＬ）；
注：１μｇ视黄醇＝３．３３ＩＵ维生素Ａ。
以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。
７．２ 维生素D含量的计算
维生素Ｄ含量按式（２）计算：
X＝犮狊×１０
／７×２×２×１００
（２）
式中：
X---试样中维生素Ｄ２（或Ｄ３）的含量，单位为微克每百克（μｇ／１００ｇ）；
犮狊---从标线得到的维生素Ｄ２（或Ｄ３）待测液的浓度，单位为微克每毫升（μｇ／ｍＬ）；
注：试样中维生素Ｄ的含量以维生素Ｄ２ 和Ｄ３ 的含量总和计。
以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。
７．３ 维生素E含量
维生素Ｅ含量按式（３）计算：
X＝犮狊×１０
／２×５×１００
（３）
式中：
X---试样中维生素Ｅ（α-生育酚）的含量，单位为毫克每百克（ｍｇ／１００ｇ）；
犮狊---从标准曲线得到的维生素Ｅ待测液的浓度，单位为微克每毫升（μｇ／ｍＬ）；
以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。
８ 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值，维生素Ａ、Ｅ不得超过算术平均值的５％，
维生素Ｄ不得超过算术平均值的１０％。
９ 其他
本标准检出限：维生素Ａ为１μｇ／１００ｇ、维生素Ｅ为１０．００μｇ／１００ｇ、维生素Ｄ为０．２０μｇ／１００ｇ。
GB ５４１３．９-２０１０
附 录 A
（规范性附录）
标准溶液浓度校正方法
维生素Ａ、Ｄ、Ｅ标准储备液配制后需要进行校正，具体操作如下：
分别取维生素Ａ、Ｄ、Ｅ标准储备液若干微升，分别注入至含有３．００ｍＬ乙醇的比色皿中，根据给定
波长测定各维生素的吸光值，按表Ａ．１给定的条件进行测定，通过下列公式计算出该维生素的浓度。
表A．１ 各维生素吸光值的测定条件
标准品 加入标准储备液的量（μＬ） 比吸光系数E
１％
ｃｍ 波长λ（ｎｍ）
视黄醇（维生素Ａ） 犞 １８３５ ３２５
α-生育酚（维生素Ｅ） 犞 ７１ ２９４
麦角钙化甾醇（维生素Ｄ２） 犞 ４８５ ２６４
胆钙化醇（维生素Ｄ３） 犞 ４６２ ２６４
浓度计算按......
英文网页English: GB 5413.9-2010
相关标准: GB 5413.38|GB 5413.20|GB 5413.30|GB 5413.18|GB 5413.9-2010|GB 5413.9|